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PCR試(shi)劑盒
其(qi)他(ta)PCR試劑盒
50T馬皰疹(zhen)病毒4型(xing)(EHV-IV)核酸(suan)試劑盒





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馬皰疹(zhen)病毒4型(xing)(EHV-IV)核酸(suan)試劑盒是(shi)我(wo)司(si)實時(shi)熒光(guang)探針法(fa)試劑盒,種類(lei)齊全,精(jing)準高效(xiao),現(xian)貨(huo)供應,歡(huan)迎廣(guang)大(da)新老(lao)客戶(hu)前來(lai)選購。
產品(pin)分類(lei)
相(xiang)關(guan)文(wen)章(zhang)
【產品(pin)名稱(cheng)】
商品(pin)名稱(cheng):馬皰疹(zhen)病毒4型(xing)(EHV-IV)核酸(suan)試劑盒(熒(ying)光(guang)-PCR法(fa))
【包裝(zhuang)規格(ge)】25T/盒、50T/盒
【檢驗(yan)原(yuan)理(li)】本試(shi)劑盒采(cai)用TaqMan 探針(zhen)法(fa)實時(shi)熒光(guang)PCR 技(ji)術(shu),根(gen)據 馬皰疹(zhen)病毒4型(xing)(EHV-IV)基因設(she)計特(te)異性(xing)引(yin)物和(he)熒光(guang)探(tan)針(zhen),用熒光PCR技(ji)術(shu)對馬皰疹(zhen)病毒4型(xing)(EHV-IV)的核酸(suan)進行(xing)體(ti)外擴增檢(jian)測(ce),用於臨床(chuang)上對(dui)可(ke)疑(yi)感染(ran)病料的(de)病原(yuan)學(xue)診斷(duan)。
【試劑組成】
包裝(zhuang)規格(ge) | 25T/盒 | 50T/盒 |
反應液(ye) | 500μL×1 管(guan) | 500μL×2 管(guan) |
酶液(ye) | 25μL×1 管(guan) | 50μL×1 管(guan) |
陽性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
陰性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
說明(ming):不同(tong)批號的試(shi)劑盒組分不可(ke)交互使用
【儲存(cun)條件(jian)及有(you)效(xiao)期(qi)】
-20℃±5℃,避(bi)光(guang)保存(cun)、運輸(shu)、反復(fu)凍融次數(shu)不超(chao)過 5 次,有(you)效(xiao)期(qi) 12 個月(yue)。
【適用儀器】 ABI7500、安捷(jie)倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系(xi)列熒光(guang)定量PCR 檢測(ce)儀。
【使用方法(fa)】
1.樣品(pin)處理(樣(yang)本(ben)處(chu)理區(qu))
核酸(suan)提取 推薦采用核酸(suan)提取或純化試(shi)劑(磁珠法(fa)或離心柱(zhu)法(fa))進行(xing)核酸(suan)提取, 請按照試劑說明(ming)書進行(xing)操作。
2.試劑配(pei)制(試劑準備區)根(gen)據待檢測(ce)樣(yang)本總數(shu),設(she)所需(xu)要(yao)的(de)PCR 反應管(guan)管(guan)數(shu)為 N(N=樣本(ben)數(shu)+1 管(guan)陰性(xing)對(dui)照(zhao)+1 管(guan)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao);反(fan)應管(guan)數(shu)每(mei)滿10 份,多配(pei)制1 份),每測(ce)試反應體(ti)系(xi)配(pei)制如下(xia)表(biao):
試劑 | 反應液(ye) | 酶液(ye) |
用量(樣本(ben)數(shu)為 N) | 19μL | 1μL |
將(jiang)混合好(hao)的(de)測(ce)試(shi)反應液(ye)分裝到 PCR 反應管(guan)中,20μL/管(guan)。
3.加樣(yang)(樣本處理區)將(jiang)步(bu)驟(zhou) 1 提取(qu)的核酸(suan)、陽性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin)、陰性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin)各取5μL,分別(bie)加入相(xiang)應的(de)反(fan)應管(guan)中,蓋好(hao)管(guan)蓋,混勻(yun),短(duan)暫(zan)離心。
4.PCR 擴增(核酸(suan)擴增區(qu))
2.1 將(jiang)待檢測(ce)反(fan)應管(guan)置於熒光定量 PCR 儀反(fan)應槽(cao)內(nei);
2.2 設(she)置好(hao)通(tong)道、樣(yang)品(pin)信息(xi),反應體(ti)系(xi)設(she)置為 25μL;熒光(guang)通道選擇(ze):檢測通道(Reporter Dye)FAM,淬滅(mie)通道(Quencher Dye)NONE,ABI 系(xi)列儀器(qi)請(qing)勿(wu)選擇(ze) ROX 參(can)比(bi)熒(ying)光,選擇(ze) None 即可。
2.3 推薦循環(huan)參(can)數(shu)設(she)置:
步(bu)驟(zhou) | 循環(huan)數(shu) | 溫度(du) | 時(shi)間(jian) | 收集(ji)熒光(guang)信號(hao) |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否 |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否 |
60℃ | 30sec | 是(shi) |
5.結果(guo)分析(xi)判(pan)定
5.1結果(guo)分析(xi)條(tiao)件設(she)定(請參(can)照各(ge)儀器使用說明(ming)書進行(xing)設(she)置,以(yi)分析(xi) ABI7500 儀器(qi)為例(li)) 反應結(jie)束(shu)後(hou)自動(dong)保存(cun)結果(guo),根(gen)據分析(xi)後(hou)圖(tu)像調節(jie) Baseline 的 Start 值、End 值以(yi)及 Threshold 值(用戶(hu)可根(gen) 據實際(ji)情(qing)況(kuang)自行調整(zheng),Start 值可(ke)設(she)在 3~15、End 值可(ke)設(she)在 5~20,使閾(yu)值線(xian)位(wei)於擴增曲(qu)線(xian)指(zhi)數(shu)期(qi),陰性(xing)質(zhi)控(kong) 品(pin)的擴增曲(qu)線(xian)平(ping)直或低於(yu)閾值(zhi)線(xian)),點(dian)擊(ji) Analyze 自動(dong)獲(huo)得分析(xi)結(jie)果。
5.2結果(guo)判斷
陽性(xing):檢(jian)測(ce)通(tong)道Ct 值≤40,且(qie)曲(qu)線(xian)有(you)明(ming)顯(xian)的指(zhi)數(shu)增長曲(qu)線(xian);
陰性(xing):樣(yang)本(ben)檢(jian)測(ce)結(jie)果無Ct 值,且(qie)無(wu)特(te)異性(xing)擴增曲(qu)線(xian);
可疑(yi):樣本(ben)檢(jian)測(ce)結果40<Ct 值≤45,建議重(zhong)復(fu)檢(jian)測,如果(guo)檢(jian)測(ce)通道仍(reng)為40值≤45,且(qie)曲(qu)線(xian)有(you)明(ming)顯(xian)的增長 曲線(xian),判(pan)定為陽性(xing),否(fou)則為陰性(xing)。
5.3 質(zhi)控(kong)標(biao)準(zhun) 陰性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin):無特異性(xing)擴增曲(qu)線(xian)或無Ct 值顯(xian)示;陽性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin):擴增曲(qu)線(xian)有(you)明(ming)顯(xian)指(zhi)數(shu)增長期(qi),且(qie) Ct 值≤32;以(yi)上條(tiao)件(jian)應同(tong)時(shi)滿足(zu),否(fou)則實驗(yan)視(shi)為無效(xiao)。
【馬皰疹(zhen)病毒4型(xing)(EHV-IV)核酸(suan)試劑盒(熒(ying)光(guang)-PCR法(fa))註意(yi)事項(xiang)】
1.所有(you)操作嚴(yan)格(ge)按照說明(ming)書進行(xing);
2.試劑盒內(nei)各種組分使(shi)用前應自然(ran)融(rong)化,完quan混勻(yun)並短暫(zan)離心;
3.反應液(ye)應避(bi)光(guang)保存(cun);
4.反應中盡(jin)量(liang)避(bi)免(mian)氣(qi)泡(pao)存(cun)在,管(guan)蓋需(xu)蓋緊;
5.使用壹次性(xing)吸(xi)頭(tou)、壹次性(xing)手套(tao)和(he)各區(qu)專用工(gong)作服(fu);
6.樣本(ben)處理、試劑配(pei)制、加樣需(xu)在(zai)不同(tong)區進行(xing),以(yi)免(mian)交(jiao)叉汙染(ran);
7.實驗(yan)完畢(bi)後(hou)用 10%次氯酸(suan)或 75%酒精(jing)或紫外(wai)燈處(chu)理(li)工(gong)作臺和(he)移液(ye)器;
8.試劑盒裏(li)所(suo)有(you)物品(pin)應視(shi)為汙染(ran)物對待,並按照《微生物生物醫學實驗(yan)室(shi)生物安全通(tong)則》進行(xing)處(chu)理。
我(wo)司(si)的實時(shi)熒光(guang)探針法(fa)試劑盒種類(lei)齊全(涵(han)蓋禽病、豬病、馬牛(niu)羊病和(he)水產(chan)動(dong)物病原(yuan)體(ti)檢測(ce)),精(jing)準高效(xiao),多重(zhong)檢(jian)測(ce)(壹重(zhong)、雙(shuang)重(zhong)、三(san)重(zhong)),現(xian)貨(huo)供應歡(huan)迎廣(guang)大(da)新老(lao)客戶(hu)前來(lai)選購。
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