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PCR試劑(ji)盒(he)
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50T野兔熱(re)(Tul)核(he)酸試劑(ji)盒(he)(熒光-PCR法(fa))





產(chan)品(pin)簡(jian)介(jie)
野兔熱(re)(Tul)核(he)酸試劑(ji)盒(he)(熒光-PCR法(fa))是我(wo)司(si)實(shi)時(shi)熒(ying)光探(tan)針(zhen)法(fa)試劑(ji)盒(he),種(zhong)類齊全(quan),精(jing)準高效,現貨(huo)供應,歡迎廣大(da)新(xin)老(lao)客戶(hu)前來(lai)選購(gou)。
產(chan)品(pin)分(fen)類
【產(chan)品(pin)名(ming)稱】
商(shang)品(pin)名(ming)稱:野兔熱(re)(Tul)核(he)酸試劑(ji)盒(he)(熒光-PCR法(fa))
【包(bao)裝規(gui)格(ge)】25T/盒(he)、50T/盒(he)
【檢驗(yan)原(yuan)理】本(ben)試劑(ji)盒(he)采用(yong)TaqMan 探(tan)針(zhen)法(fa)實(shi)時(shi)熒(ying)光PCR 技(ji)術,根(gen)據(ju) 野兔熱(re)(Tul)基因設計(ji)特異性引物(wu)和熒光探(tan)針(zhen),用(yong)熒(ying)光PCR技(ji)術對(dui)野兔熱(re)(Tul)的核(he)酸進行體(ti)外擴(kuo)增(zeng)檢測(ce),用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)上對(dui)可(ke)疑感(gan)染(ran)病(bing)料(liao)的病原(yuan)學(xue)診斷。
【試劑(ji)組(zu)成(cheng)】
包(bao)裝規(gui)格(ge) | 25T/盒(he) | 50T/盒(he) |
反(fan)應液 | 500μL×1 管(guan) | 500μL×2 管(guan) |
酶(mei)液 | 25μL×1 管(guan) | 50μL×1 管(guan) |
陽性質(zhi)控品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
陰(yin)性質(zhi)控品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
說(shuo)明:不同批(pi)號(hao)的試劑(ji)盒(he)組分(fen)不可(ke)交互(hu)使用(yong)
【儲(chu)存條件及(ji)有效期(qi)】
-20℃±5℃,避(bi)光保(bao)存、運輸(shu)、反(fan)復凍融次(ci)數(shu)不超(chao)過 5 次(ci),有效期(qi) 12 個(ge)月。
【適(shi)用(yong)儀(yi)器(qi)】 ABI7500、安(an)捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列(lie)熒(ying)光定(ding)量PCR 檢測(ce)儀(yi)。
【使用(yong)方法】
1.樣(yang)品(pin)處(chu)理(樣(yang)本(ben)處理(li)區(qu))
核(he)酸提(ti)取(qu) 推薦(jian)采用(yong)核(he)酸提(ti)取(qu)或(huo)純化(hua)試劑(ji)(磁(ci)珠法或(huo)離(li)心(xin)柱(zhu)法(fa))進行核(he)酸提(ti)取(qu), 請按照(zhao)試劑(ji)說(shuo)明書進行操(cao)作。
2.試劑(ji)配(pei)制(試劑(ji)準(zhun)備區(qu))根(gen)據待(dai)檢測(ce)樣(yang)本總(zong)數(shu),設所需要的PCR 反(fan)應管管(guan)數(shu)為(wei) N(N=樣(yang)本數(shu)+1 管(guan)陰性對照(zhao)+1 管(guan)陽性對照(zhao);反應管數(shu)每滿10 份(fen),多配制1 份(fen)),每(mei)測試反(fan)應體系配制如下表:
試劑(ji) | 反(fan)應液 | 酶(mei)液 |
用(yong)量(樣(yang)本(ben)數(shu)為(wei) N) | 19μL | 1μL |
將混(hun)合好(hao)的測試反(fan)應液分(fen)裝到(dao) PCR 反(fan)應管中,20μL/管(guan)。
3.加(jia)樣(yang)(樣本處理(li)區(qu))將步驟(zhou) 1 提(ti)取(qu)的核(he)酸、陽性質(zhi)控品(pin)、陰(yin)性質(zhi)控品(pin)各(ge)取(qu)5μL,分(fen)別加(jia)入(ru)相(xiang)應的反應管中,蓋(gai)好(hao)管(guan)蓋(gai),混(hun)勻,短(duan)暫(zan)離(li)心(xin)。
4.PCR 擴(kuo)增(zeng)(核(he)酸擴(kuo)增(zeng)區(qu))
2.1 將待(dai)檢測(ce)反(fan)應管置於(yu)熒(ying)光定(ding)量 PCR 儀(yi)反應槽(cao)內;
2.2 設(she)置好通(tong)道、樣品(pin)信(xin)息(xi),反(fan)應體系設置為(wei) 25μL;熒(ying)光通(tong)道選擇(ze):檢測(ce)通(tong)道(Reporter Dye)FAM,淬(cui)滅通(tong)道(Quencher Dye)NONE,ABI 系列(lie)儀(yi)器(qi)請勿選(xuan)擇 ROX 參(can)比(bi)熒(ying)光,選(xuan)擇(ze) None 即(ji)可(ke)。
2.3 推薦(jian)循環參(can)數(shu)設置:
步驟(zhou) | 循環數(shu) | 溫(wen)度 | 時(shi)間 | 收集(ji)熒光信(xin)號(hao) |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否(fou) |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否(fou) |
60℃ | 30sec | 是 |
5.結(jie)果分(fen)析(xi)判(pan)定(ding)
5.1結(jie)果分(fen)析(xi)條(tiao)件設定(ding)(請參(can)照(zhao)各(ge)儀(yi)器(qi)使用(yong)說(shuo)明書進行設(she)置,以(yi)分(fen)析(xi) ABI7500 儀(yi)器(qi)為(wei)例(li)) 反(fan)應結(jie)束後自(zi)動(dong)保(bao)存結(jie)果,根(gen)據(ju)分(fen)析(xi)後(hou)圖(tu)像調(tiao)節(jie) Baseline 的 Start 值、End 值以(yi)及(ji) Threshold 值(用(yong)戶(hu)可(ke)根 據(ju)實(shi)際情況(kuang)自(zi)行調(tiao)整(zheng),Start 值可(ke)設在(zai) 3~15、End 值可(ke)設在(zai) 5~20,使閾(yu)值線(xian)位(wei)於(yu)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)指(zhi)數(shu)期(qi),陰(yin)性質(zhi)控 品(pin)的擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)平直或(huo)低於(yu)閾(yu)值線(xian)),點(dian)擊 Analyze 自(zi)動(dong)獲得分(fen)析(xi)結(jie)果。
5.2結(jie)果判(pan)斷(duan)
陽性:檢測(ce)通(tong)道Ct 值≤40,且曲(qu)線(xian)有明顯的指(zhi)數(shu)增(zeng)長曲(qu)線(xian);
陰(yin)性:樣本(ben)檢測(ce)結(jie)果無Ct 值,且無特異性擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian);
可(ke)疑:樣(yang)本檢測(ce)結(jie)果40<Ct 值≤45,建議重(zhong)復檢測(ce),如(ru)果檢測(ce)通(tong)道仍為(wei)40值≤45,且曲(qu)線(xian)有明顯的增(zeng)長 曲(qu)線(xian),判(pan)定(ding)為(wei)陽性,否則為(wei)陰性。
5.3 質(zhi)控標(biao)準(zhun) 陰(yin)性質(zhi)控品(pin):無特異性擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)或(huo)無Ct 值顯示;陽性質(zhi)控品(pin):擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)有明顯指(zhi)數(shu)增(zeng)長期(qi),且 Ct 值≤32;以(yi)上條(tiao)件應同時(shi)滿足(zu),否(fou)則實(shi)驗(yan)視(shi)為(wei)無效。
【野兔熱(re)(Tul)核(he)酸試劑(ji)盒(he)(熒光-PCR法(fa))註(zhu)意事項(xiang)】
1.所有操(cao)作嚴格(ge)按照(zhao)說(shuo)明(ming)書進行;
2.試劑(ji)盒(he)內各(ge)種(zhong)組分(fen)使用(yong)前(qian)應自然(ran)融化,完quan混(hun)勻並(bing)短暫(zan)離(li)心(xin);
3.反(fan)應液應避光保(bao)存;
4.反(fan)應中盡(jin)量避(bi)免氣(qi)泡存在(zai),管(guan)蓋(gai)需蓋(gai)緊(jin);
5.使用(yong)壹次(ci)性吸頭(tou)、壹次(ci)性手套和各(ge)區(qu)專(zhuan)用(yong)工(gong)作服;
6.樣(yang)本處理、試劑(ji)配(pei)制、加(jia)樣(yang)需在(zai)不(bu)同(tong)區(qu)進行,以(yi)免交叉汙染(ran);
7.實(shi)驗(yan)完(wan)畢(bi)後用(yong) 10%次(ci)氯(lv)酸或(huo) 75%酒精(jing)或(huo)紫(zi)外(wai)燈處理工(gong)作臺和移(yi)液器(qi);
8.試劑(ji)盒(he)裏(li)所有物(wu)品(pin)應視(shi)為(wei)汙染(ran)物(wu)對待(dai),並(bing)按照(zhao)《微(wei)生物(wu)生物(wu)醫學實(shi)驗(yan)室生物(wu)安全通(tong)則》進行處(chu)理。
我(wo)司(si)的實(shi)時(shi)熒(ying)光探(tan)針(zhen)法(fa)試劑(ji)盒(he)種(zhong)類齊全(quan)(涵蓋(gai)禽病、豬(zhu)病、馬(ma)牛羊(yang)病和水產(chan)動(dong)物(wu)病原體(ti)檢測(ce)),精(jing)準高效,多重(zhong)檢測(ce)(壹重、雙(shuang)重、三(san)重),現(xian)貨(huo)供應歡迎廣大(da)新(xin)老(lao)客戶(hu)前來(lai)選購(gou)。
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