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產品中(zhong)心(xin)
寵(chong)物(wu)PCR試(shi)劑(ji)盒
禽類(lei)PCR試(shi)劑(ji)盒
50T禽流(liu)感病毒H6亞(ya)型(xing)(AIV-H6)PCR試(shi)劑(ji)盒
產品(pin)簡(jian)介
禽(qin)流感病毒H6亞(ya)型(xing)(AIV-H6)PCR試(shi)劑(ji)盒是(shi)我(wo)司(si)實(shi)時熒光探(tan)針(zhen)法(fa)試(shi)劑(ji)盒,種類(lei)齊全(quan),精(jing)準(zhun)高(gao)效(xiao),現貨(huo)供應,歡(huan)迎(ying)廣大新(xin)老(lao)客(ke)戶(hu)前(qian)來選購。
產(chan)品(pin)分類(lei)
【產(chan)品(pin)名稱(cheng)】
商品名稱(cheng):禽(qin)流(liu)感病毒H6亞(ya)型(xing)(AIV-H6)PCR試(shi)劑(ji)盒(熒光PCR 法(fa))
【包(bao)裝(zhuang)規格(ge)】25T/盒(he)、50T/盒(he)
【檢(jian)驗(yan)原理】本試(shi)劑(ji)盒采用(yong)TaqMan 探(tan)針(zhen)法(fa)實時熒光PCR 技術,根(gen)據 禽(qin)流(liu)感病毒H6亞(ya)型(xing)(AIV-H6)基(ji)因(yin)設(she)計(ji)特(te)異性引(yin)物(wu)和(he)熒光探(tan)針(zhen),用(yong)熒光PCR技術對(dui)禽(qin)流(liu)感病毒H6亞(ya)型(xing)(AIV-H6)的核酸(suan)進行體(ti)外(wai)擴增檢(jian)測(ce),用於臨床(chuang)上(shang)對(dui)可疑(yi)感染病料的病原學診斷(duan)。
【試(shi)劑(ji)組成】
| 包(bao)裝(zhuang)規格(ge) | 25T/盒(he) | 50T/盒(he) |
| 反(fan)應液 | 500μL×1 管 | 500μL×2 管 |
| 酶(mei)液 | 25μL×1 管 | 50μL×1 管 |
| 陽性質(zhi)控品 | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
| 陰(yin)性(xing)質控品 | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
說(shuo)明(ming):不(bu)同(tong)批號的試(shi)劑(ji)盒組分不(bu)可(ke)交(jiao)互(hu)使用
【儲(chu)存(cun)條件(jian)及有效(xiao)期】
-20℃±5℃,避(bi)光(guang)保(bao)存(cun)、運(yun)輸(shu)、反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)次數不(bu)超(chao)過(guo) 5 次,有效(xiao)期 12 個(ge)月(yue)。
【適(shi)用(yong)儀(yi)器(qi)】 ABI7500、安(an)捷(jie)倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系(xi)列(lie)熒光定(ding)量PCR 檢(jian)測(ce)儀(yi)。
【使(shi)用(yong)方法】
1.樣(yang)品(pin)處理(樣本處理區(qu))
核酸(suan)提(ti)取(qu) 推(tui)薦(jian)采用(yong)核酸(suan)提(ti)取(qu)或(huo)純化試(shi)劑(ji)(磁珠法(fa)或離(li)心柱法(fa))進行核酸(suan)提(ti)取(qu), 請(qing)按(an)照試(shi)劑(ji)說(shuo)明(ming)書進行操(cao)作。
2.試(shi)劑(ji)配(pei)制(zhi)(試(shi)劑(ji)準(zhun)備(bei)區(qu))根(gen)據(ju)待檢(jian)測(ce)樣本總(zong)數,設(she)所需(xu)要的PCR 反(fan)應管管數為(wei) N(N=樣(yang)本數+1 管陰性對(dui)照+1 管陽性對(dui)照;反(fan)應管數每(mei)滿10 份(fen),多(duo)配(pei)制(zhi)1 份(fen)),每(mei)測(ce)試(shi)反(fan)應體(ti)系(xi)配(pei)制(zhi)如下(xia)表:
| 試(shi)劑(ji) | 反(fan)應液 | 酶(mei)液 |
| 用(yong)量(樣本數為(wei) N) | 19μL | 1μL |
將(jiang)混合好(hao)的測(ce)試(shi)反(fan)應液分裝(zhuang)到 PCR 反(fan)應管中(zhong),20μL/管。
3.加樣(yang)(樣本處理區(qu))將(jiang)步驟(zhou) 1 提(ti)取(qu)的核酸(suan)、陽性質(zhi)控品、陰(yin)性質(zhi)控品各(ge)取5μL,分別(bie)加入(ru)相(xiang)應(ying)的反(fan)應管中(zhong),蓋好(hao)管蓋,混勻,短暫離(li)心。
4.PCR 擴增(核酸(suan)擴增區(qu))
2.1 將(jiang)待檢(jian)測(ce)反(fan)應管置(zhi)於熒光定(ding)量 PCR 儀(yi)反(fan)應槽(cao)內;
2.2 設(she)置(zhi)好(hao)通道(dao)、樣品(pin)信(xin)息(xi),反(fan)應體(ti)系(xi)設(she)置(zhi)為 25μL;熒光通道(dao)選擇(ze):檢測(ce)通道(dao)(Reporter Dye)FAM,淬滅通道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系(xi)列(lie)儀(yi)器(qi)請勿(wu)選擇(ze) ROX 參比熒光,選擇(ze) None 即可(ke)。
2.3 推(tui)薦(jian)循環(huan)參數設(she)置(zhi):
| 步(bu)驟(zhou) | 循(xun)環(huan)數 | 溫(wen)度(du) | 時間(jian) | 收(shou)集熒光信(xin)號 |
| 1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否(fou) |
| 2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否(fou) |
| 60℃ | 30sec | 是(shi) |
5.結(jie)果(guo)分析(xi)判(pan)定(ding)
5.1結(jie)果(guo)分析(xi)條件(jian)設(she)定(ding)(請(qing)參照各(ge)儀(yi)器(qi)使用(yong)說(shuo)明(ming)書進行設(she)置(zhi),以分析(xi) ABI7500 儀(yi)器(qi)為例) 反(fan)應結(jie)束後(hou)自動保(bao)存(cun)結(jie)果(guo),根據分析(xi)後(hou)圖像調(tiao)節 Baseline 的 Start 值(zhi)、End 值(zhi)以(yi)及(ji) Threshold 值(zhi)(用(yong)戶(hu)可(ke)根(gen) 據(ju)實(shi)際情況自(zi)行調(tiao)整(zheng),Start 值(zhi)可(ke)設(she)在(zai) 3~15、End 值(zhi)可(ke)設(she)在(zai) 5~20,使(shi)閾值(zhi)線(xian)位(wei)於擴增曲(qu)線(xian)指(zhi)數期(qi),陰(yin)性質控 品(pin)的擴增曲(qu)線(xian)平(ping)直(zhi)或低(di)於閾值(zhi)線(xian)),點擊 Analyze 自(zi)動(dong)獲得分析(xi)結(jie)果(guo)。
5.2結(jie)果(guo)判斷(duan)
陽性:檢(jian)測(ce)通道(dao)Ct 值(zhi)≤40,且(qie)曲(qu)線(xian)有明(ming)顯(xian)的指(zhi)數增(zeng)長(chang)曲(qu)線(xian);
陰(yin)性(xing):樣本檢測(ce)結果(guo)無Ct 值(zhi),且(qie)無(wu)特(te)異性擴增曲(qu)線(xian);
可(ke)疑(yi):樣本檢測(ce)結果(guo)40<Ct 值(zhi)≤45,建(jian)議(yi)重復(fu)檢(jian)測(ce),如果(guo)檢測(ce)通道(dao)仍為(wei)40值(zhi)≤45,且(qie)曲(qu)線(xian)有明(ming)顯(xian)的增長 曲(qu)線(xian),判(pan)定(ding)為陽性,否(fou)則(ze)為陰(yin)性。
5.3 質(zhi)控標準(zhun) 陰(yin)性(xing)質控品:無(wu)特(te)異性擴增曲(qu)線(xian)或(huo)無(wu)Ct 值(zhi)顯(xian)示(shi);陽性質(zhi)控品:擴增曲(qu)線(xian)有明(ming)顯(xian)指(zhi)數增(zeng)長(chang)期,且 Ct 值(zhi)≤32;以(yi)上(shang)條件(jian)應同(tong)時滿足(zu),否(fou)則(ze)實驗(yan)視(shi)為(wei)無效(xiao)。
3. 檢(jian)測(ce)方法(fa)的局限性
1. 樣(yang)本檢測(ce)結果(guo)與樣本收(shou)集、處理、運送以及保(bao)存(cun)質(zhi)量有關(guan);
2. 樣(yang)本提(ti)取(qu)過(guo)程中(zhong)沒(mei)有控制好(hao)交叉(cha)汙(wu)染(ran),會出(chu)現假(jia)陽性結(jie)果(guo);
3. 陽性對(dui)照、擴增產(chan)物(wu)泄(xie)漏,會導(dao)致(zhi)假(jia)陽性結(jie)果(guo);
4. 病原體(ti)在(zai)流(liu)行過(guo)程中(zhong)基(ji)因(yin)突(tu)變、重組,會導(dao)致(zhi)假(jia)陰性結果(guo);
5. 不(bu)同(tong)的提(ti)取(qu)方(fang)法(fa)存(cun)在(zai)提(ti)取(qu)效(xiao)率差異,會導(dao)致(zhi)假(jia)陰性結果(guo);
6. 試(shi)劑(ji)運輸(shu),保(bao)存(cun)不(bu)當或試(shi)劑(ji)配(pei)制(zhi)不(bu)準(zhun)確(que)引起(qi)的試(shi)劑(ji)檢測(ce)效(xiao)能下(xia)降(jiang),出(chu)現假(jia)陰性或定(ding)量檢測(ce)不準(zhun)確(que)的結果(guo);
7. 本檢測(ce)結果(guo)僅供參考,如須(xu)確(que)診請結(jie)合(he)臨床(chuang)癥狀以(yi)及(ji)其(qi)他(ta)檢測(ce)手段(duan)。
【 禽(qin)流(liu)感病毒H6亞(ya)型(xing)(AIV-H6)PCR試(shi)劑(ji)盒註(zhu)意(yi)事(shi)項】
1.所有操(cao)作嚴(yan)格按(an)照說(shuo)明(ming)書進行;
2.試(shi)劑(ji)盒內各(ge)種組(zu)分使(shi)用(yong)前(qian)應(ying)自(zi)然(ran)融(rong)化,完quan混勻並短暫離(li)心;
3.反(fan)應液應(ying)避(bi)光(guang)保(bao)存(cun);
4.反(fan)應中(zhong)盡量避(bi)免氣(qi)泡(pao)存(cun)在(zai),管蓋需(xu)蓋緊(jin);
5.使(shi)用(yong)壹(yi)次性(xing)吸頭(tou)、壹(yi)次性(xing)手(shou)套和(he)各(ge)區(qu)專用(yong)工作服;
6.樣(yang)本處理、試(shi)劑(ji)配(pei)制(zhi)、加樣(yang)需(xu)在不同(tong)區(qu)進行,以(yi)免交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran);
7.實(shi)驗(yan)完畢(bi)後(hou)用 10%次氯(lv)酸(suan)或 75%酒精(jing)或紫外(wai)燈(deng)處理工作臺和(he)移(yi)液器(qi);
8.試(shi)劑(ji)盒裏(li)所有物(wu)品(pin)應視(shi)為(wei)汙(wu)染(ran)物(wu)對(dui)待,並按(an)照《微生(sheng)物(wu)生(sheng)物(wu)醫(yi)學實驗室(shi)生(sheng)物(wu)安(an)全(quan)通則(ze)》進行處理。
我(wo)司(si)的實時熒光探(tan)針(zhen)法(fa)試(shi)劑(ji)盒種類(lei)齊全(quan)(涵蓋禽病、豬病、馬牛(niu)羊(yang)病和(he)水(shui)產(chan)動物(wu)病原體(ti)檢(jian)測(ce)),精準(zhun)高(gao)效(xiao),多重檢測(ce)(壹(yi)重、雙重、三重),現貨(huo)供應歡(huan)迎(ying)廣大新(xin)老(lao)客(ke)戶(hu)前(qian)來選購。
上(shang)壹(yi)個(ge):50T馬(ma)皰(pao)疹病毒4型(xing)(EHV-IV)核酸(suan)試(shi)劑(ji)盒
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下(xia)壹(yi)個(ge):50T禽(qin)流(liu)感病毒H10亞(ya)型(xing)(AIV-H10)PCR試(shi)劑(ji)盒
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