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PCR試(shi)劑盒(he)
其(qi)他PCR試(shi)劑盒(he)
50T兔黏(nian)液瘤(liu)病(bing)毒(du)(RMV)核酸試(shi)劑盒(he)





產品簡介
兔黏(nian)液瘤(liu)病(bing)毒(du)(RMV)核酸試(shi)劑盒(he)是(shi)我司(si)實(shi)時(shi)熒(ying)光(guang)探針(zhen)法試(shi)劑盒(he),種(zhong)類(lei)齊(qi)全,精(jing)準(zhun)高效,現(xian)貨供(gong)應(ying),歡(huan)迎(ying)廣大新老(lao)客戶(hu)前來(lai)選購。
產品分(fen)類(lei)
【產品名稱】
商(shang)品名稱:兔黏(nian)液瘤(liu)病(bing)毒(du)(RMV)核酸試(shi)劑盒(he)(熒(ying)光(guang)-PCR法)
【包(bao)裝規(gui)格(ge)】25T/盒(he)、50T/盒(he)
【檢驗(yan)原(yuan)理】本(ben)試(shi)劑盒(he)采(cai)用(yong)TaqMan 探針(zhen)法實(shi)時(shi)熒(ying)光(guang)PCR 技(ji)術(shu),根據 兔黏(nian)液瘤(liu)病(bing)毒(du)(RMV)基因(yin)設(she)計(ji)特異(yi)性引(yin)物和熒(ying)光(guang)探針(zhen),用(yong)熒(ying)光(guang)PCR技(ji)術(shu)對兔黏(nian)液瘤(liu)病(bing)毒(du)(RMV)的核酸進(jin)行體外擴(kuo)增(zeng)檢測(ce),用(yong)於臨(lin)床上(shang)對可疑(yi)感染(ran)病(bing)料的病(bing)原(yuan)學診斷。
【試(shi)劑組(zu)成(cheng)】
包(bao)裝規(gui)格(ge) | 25T/盒(he) | 50T/盒(he) |
反(fan)應(ying)液(ye) | 500μL×1 管(guan) | 500μL×2 管(guan) |
酶(mei)液(ye) | 25μL×1 管(guan) | 50μL×1 管(guan) |
陽(yang)性(xing)質(zhi)控(kong)品 | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
陰性質控(kong)品 | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
說(shuo)明(ming):不(bu)同批(pi)號的試(shi)劑盒(he)組(zu)分(fen)不(bu)可交(jiao)互使用(yong)
【儲(chu)存(cun)條件及有效期(qi)】
-20℃±5℃,避光(guang)保存、運(yun)輸(shu)、反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)次數(shu)不(bu)超過 5 次,有效期(qi) 12 個月(yue)。
【適用(yong)儀器】 ABI7500、安(an)捷(jie)倫(lun) MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系列(lie)熒(ying)光(guang)定量PCR 檢測(ce)儀。
【使用(yong)方法】
1.樣(yang)品處(chu)理(樣本(ben)處(chu)理區(qu))
核酸提(ti)取(qu) 推薦采(cai)用(yong)核酸提(ti)取(qu)或純(chun)化試(shi)劑(磁珠法或離(li)心柱(zhu)法)進(jin)行核酸提(ti)取(qu), 請(qing)按(an)照(zhao)試(shi)劑說(shuo)明(ming)書(shu)進(jin)行操(cao)作。
2.試(shi)劑配(pei)制(試(shi)劑準(zhun)備(bei)區(qu))根據待檢測(ce)樣本(ben)總(zong)數(shu),設(she)所需要的PCR 反(fan)應(ying)管(guan)管數(shu)為(wei) N(N=樣(yang)本(ben)數(shu)+1 管(guan)陰性對照+1 管(guan)陽(yang)性(xing)對照;反(fan)應(ying)管(guan)數每(mei)滿(man)10 份,多(duo)配制1 份),每(mei)測(ce)試(shi)反(fan)應(ying)體系(xi)配(pei)制如下(xia)表:
試(shi)劑 | 反(fan)應(ying)液(ye) | 酶(mei)液(ye) |
用(yong)量(樣(yang)本(ben)數(shu)為(wei) N) | 19μL | 1μL |
將混合(he)好(hao)的測試(shi)反(fan)應(ying)液(ye)分(fen)裝(zhuang)到 PCR 反(fan)應(ying)管(guan)中,20μL/管(guan)。
3.加(jia)樣(yang)(樣(yang)本(ben)處(chu)理區(qu))將步(bu)驟(zhou) 1 提(ti)取(qu)的核酸、陽(yang)性(xing)質控(kong)品、陰性質控(kong)品各(ge)取5μL,分(fen)別(bie)加(jia)入(ru)相(xiang)應(ying)的反(fan)應(ying)管(guan)中,蓋好管(guan)蓋,混勻(yun),短(duan)暫(zan)離(li)心。
4.PCR 擴(kuo)增(zeng)(核酸擴(kuo)增(zeng)區(qu))
2.1 將待檢測(ce)反(fan)應(ying)管(guan)置於熒(ying)光(guang)定量 PCR 儀反(fan)應(ying)槽(cao)內;
2.2 設(she)置好通(tong)道、樣品信息(xi),反(fan)應(ying)體系(xi)設(she)置為(wei) 25μL;熒(ying)光(guang)通道選擇(ze):檢測(ce)通道(dao)(Reporter Dye)FAM,淬(cui)滅(mie)通道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系(xi)列(lie)儀器請(qing)勿(wu)選擇 ROX 參(can)比熒(ying)光(guang),選擇 None 即(ji)可(ke)。
2.3 推薦循環參(can)數(shu)設(she)置:
步(bu)驟(zhou) | 循環數(shu) | 溫度 | 時(shi)間(jian) | 收(shou)集(ji)熒(ying)光(guang)信號 |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否(fou) |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否(fou) |
60℃ | 30sec | 是(shi) |
5.結(jie)果(guo)分(fen)析(xi)判(pan)定
5.1結(jie)果(guo)分(fen)析(xi)條件(jian)設(she)定(請(qing)參(can)照(zhao)各(ge)儀器使用(yong)說(shuo)明(ming)書(shu)進(jin)行設(she)置,以分(fen)析(xi) ABI7500 儀器為(wei)例(li)) 反(fan)應(ying)結(jie)束(shu)後自動保(bao)存結(jie)果(guo),根據分(fen)析(xi)後圖(tu)像調(tiao)節 Baseline 的 Start 值、End 值以及 Threshold 值(用(yong)戶可(ke)根 據(ju)實(shi)際(ji)情(qing)況(kuang)自行調(tiao)整,Start 值可設(she)在 3~15、End 值可設(she)在 5~20,使閾值線位(wei)於(yu)擴(kuo)增(zeng)曲線指數(shu)期(qi),陰性質控(kong) 品的擴(kuo)增(zeng)曲線平直或低於(yu)閾值線),點擊(ji) Analyze 自動獲(huo)得分(fen)析(xi)結果(guo)。
5.2結(jie)果(guo)判(pan)斷(duan)
陽(yang)性(xing):檢測(ce)通道(dao)Ct 值≤40,且(qie)曲線有明顯的指數(shu)增(zeng)長(chang)曲線;
陰性:樣本(ben)檢測(ce)結果(guo)無(wu)Ct 值,且(qie)無(wu)特(te)異(yi)性擴(kuo)增(zeng)曲線;
可(ke)疑(yi):樣(yang)本(ben)檢測(ce)結果(guo)40<Ct 值≤45,建(jian)議(yi)重(zhong)復(fu)檢測(ce),如果(guo)檢測(ce)通道(dao)仍(reng)為(wei)40值≤45,且(qie)曲線有明顯的增(zeng)長(chang) 曲線,判(pan)定為(wei)陽性(xing),否(fou)則為(wei)陰性。
5.3 質(zhi)控(kong)標準(zhun) 陰性質控(kong)品:無特異性(xing)擴(kuo)增(zeng)曲線或無(wu)Ct 值顯示(shi);陽(yang)性(xing)質(zhi)控(kong)品:擴(kuo)增(zeng)曲線有明顯指(zhi)數(shu)增(zeng)長(chang)期(qi),且(qie) Ct 值≤32;以上(shang)條(tiao)件應(ying)同(tong)時滿(man)足(zu),否(fou)則實(shi)驗(yan)視(shi)為(wei)無效。
3. 檢測(ce)方法的局限性
1. 樣(yang)本(ben)檢測(ce)結果(guo)與(yu)樣(yang)本(ben)收(shou)集(ji)、處(chu)理、運(yun)送(song)以及保存(cun)質量有關;
2. 樣(yang)本(ben)提(ti)取(qu)過程中沒有控(kong)制好(hao)交(jiao)叉(cha)汙染(ran),會(hui)出(chu)現(xian)假陽性(xing)結果(guo);
3. 陽(yang)性(xing)對照、擴(kuo)增(zeng)產物泄漏,會(hui)導(dao)致(zhi)假(jia)陽性(xing)結(jie)果(guo);
4. 病(bing)原(yuan)體在(zai)流(liu)行過程(cheng)中(zhong)基因(yin)突變(bian)、重(zhong)組(zu),會(hui)導(dao)致(zhi)假(jia)陰性結果(guo);
5. 不(bu)同的提取(qu)方法存在提取(qu)效率(lv)差異(yi),會(hui)導(dao)致(zhi)假(jia)陰性結果(guo);
6. 試(shi)劑運(yun)輸(shu),保(bao)存(cun)不(bu)當(dang)或試(shi)劑配(pei)制不(bu)準(zhun)確引起(qi)的試(shi)劑檢測(ce)效能下(xia)降(jiang),出現(xian)假陰性或定量檢測(ce)不(bu)準(zhun)確的結果(guo);
7. 本(ben)檢測(ce)結果(guo)僅(jin)供(gong)參(can)考(kao),如須(xu)確診請結(jie)合(he)臨(lin)床癥狀(zhuang)以及其他檢測(ce)手段。
【兔黏(nian)液瘤(liu)病(bing)毒(du)(RMV)核酸試(shi)劑盒(he)(熒(ying)光(guang)-PCR法)註(zhu)意(yi)事項】
1.所(suo)有操(cao)作嚴格(ge)按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)進(jin)行;
2.試(shi)劑盒(he)內各(ge)種(zhong)組分(fen)使用(yong)前應(ying)自然融化,完quan混(hun)勻(yun)並短暫(zan)離(li)心;
3.反(fan)應(ying)液(ye)應(ying)避光(guang)保存;
4.反(fan)應(ying)中(zhong)盡量(liang)避免氣泡(pao)存(cun)在,管蓋需蓋緊(jin);
5.使用(yong)壹(yi)次性(xing)吸(xi)頭、壹(yi)次性(xing)手套(tao)和各(ge)區(qu)專用(yong)工作服(fu);
6.樣(yang)本(ben)處(chu)理、試(shi)劑配(pei)制、加(jia)樣(yang)需在(zai)不(bu)同區(qu)進(jin)行,以免交(jiao)叉(cha)汙染(ran);
7.實(shi)驗(yan)完畢(bi)後用(yong) 10%次氯(lv)酸或(huo) 75%酒(jiu)精(jing)或(huo)紫外燈處(chu)理工作臺(tai)和(he)移液器;
8.試(shi)劑盒(he)裏(li)所(suo)有物品應(ying)視(shi)為(wei)汙染(ran)物對待,並按照(zhao)《微生物生物醫學(xue)實(shi)驗(yan)室(shi)生物安全通則》進(jin)行處(chu)理。
我司(si)的實(shi)時(shi)熒(ying)光(guang)探針(zhen)法試(shi)劑盒(he)種(zhong)類(lei)齊(qi)全(涵蓋禽病(bing)、豬病(bing)、馬牛(niu)羊(yang)病(bing)和水產動物病(bing)原(yuan)體檢測(ce)),精(jing)準(zhun)高效,多(duo)重(zhong)檢測(ce)(壹(yi)重(zhong)、雙(shuang)重(zhong)、三(san)重(zhong)),現(xian)貨供(gong)應(ying)歡(huan)迎(ying)廣大新老(lao)客戶(hu)前來(lai)選購。
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