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PCR試(shi)劑盒
其(qi)他(ta)PCR試(shi)劑盒
50T沙門(men)氏(shi)菌(SPP)核(he)酸試(shi)劑盒(熒光(guang)-PCR法(fa))





產品簡介
沙門(men)氏(shi)菌(SPP)核(he)酸試(shi)劑盒(熒光(guang)-PCR法(fa))是(shi)我(wo)司(si)實(shi)時(shi)熒光(guang)探(tan)針(zhen)法(fa)試(shi)劑盒,種(zhong)類齊(qi)全,精(jing)準高效,現貨(huo)供(gong)應(ying),歡迎(ying)廣(guang)大新(xin)老客戶前來咨詢(xun)和選購(gou)。
產品分(fen)類(lei)
相(xiang)關文(wen)章
【產品名稱】
商品名稱:沙門(men)氏(shi)菌(SPP)核(he)酸試(shi)劑盒(熒光(guang)-PCR法(fa))
【包裝(zhuang)規格(ge)】25T/盒、50T/盒
【檢驗原理】本(ben)試(shi)劑盒采用TaqMan 探(tan)針(zhen)法(fa)實(shi)時(shi)熒光(guang)PCR 技(ji)術,根(gen)據(ju)沙門(men)氏(shi)菌(SPP)基因(yin)設計特異性引(yin)物(wu)和熒光(guang)探(tan)針(zhen),用(yong)熒光(guang)PCR技(ji)術對(dui)沙門(men)氏(shi)菌(SPP)的核(he)酸進(jin)行體外擴增(zeng)檢測(ce),用於(yu)臨床上對可(ke)疑感染(ran)病(bing)料(liao)的病(bing)原(yuan)學診(zhen)斷。
我司(si)的實(shi)時(shi)熒光(guang)探(tan)針(zhen)法(fa)試(shi)劑盒種(zhong)類齊(qi)全(涵蓋禽病(bing)、豬病(bing)、馬(ma)牛羊(yang)病(bing)和水產動物(wu)病原(yuan)體檢測),精(jing)準(zhun)高效,多重(zhong)檢(jian)測(ce)(壹(yi)重(zhong)、雙重(zhong)、三(san)重(zhong)),現貨(huo)供(gong)應(ying)歡迎(ying)廣(guang)大新(xin)老客戶前來咨詢(xun)和選購。
【試劑組成】
包裝(zhuang)規格(ge) | 25T/盒 | 50T/盒 |
反應液(ye) | 500μL×1 管(guan) | 500μL×2 管(guan) |
酶(mei)液 | 25μL×1 管(guan) | 50μL×1 管(guan) |
陽(yang)性質控(kong)品 | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
陰性質控(kong)品 | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
說明:不(bu)同批(pi)號(hao)的試(shi)劑盒組分(fen)不(bu)可交(jiao)互(hu)使(shi)用
【儲存條(tiao)件(jian)及有(you)效期】
-20℃±5℃,避(bi)光(guang)保(bao)存(cun)、運輸(shu)、反復凍(dong)融(rong)次數(shu)不(bu)超過(guo) 5 次,有(you)效期 12 個(ge)月(yue)。
【適用儀(yi)器】 ABI7500、安捷(jie)倫(lun) MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR 檢測儀(yi)。
【沙門(men)氏(shi)菌(SPP)核(he)酸試(shi)劑盒(熒光(guang)-PCR法(fa))使(shi)用方(fang)法】
1.樣品處(chu)理(樣本(ben)處(chu)理區(qu))
核(he)酸提(ti)取 推薦(jian)采用(yong)核(he)酸提(ti)取或純化試劑(磁(ci)珠(zhu)法或離(li)心柱(zhu)法(fa))進(jin)行核(he)酸提(ti)取,請(qing)按(an)照(zhao)試劑說明書進(jin)行操(cao)作(zuo)。
2.試劑配(pei)制(zhi)(試(shi)劑準備(bei)區(qu))根(gen)據(ju)待檢測(ce)樣本(ben)總(zong)數(shu),設所需(xu)要(yao)的PCR 反應管(guan)管(guan)數(shu)為 N(N=樣本(ben)數(shu)+1 管(guan)陰性對(dui)照(zhao)+1 管(guan)陽(yang)性對(dui)照(zhao);反應管(guan)數(shu)每滿(man)10 份(fen),多配(pei)制(zhi)1 份(fen)),每測試(shi)反應體系配(pei)制(zhi)如(ru)下表(biao):
試劑 | 反應液(ye) | 酶(mei)液 |
用量(樣本(ben)數(shu)為 N) | 19μL | 1μL |
將混(hun)合好(hao)的測(ce)試(shi)反應液(ye)分(fen)裝(zhuang)到(dao) PCR 反應管(guan)中(zhong),20μL/管(guan)。
3.加樣(樣本(ben)處(chu)理區(qu))將步驟(zhou) 1 提取的核(he)酸、陽(yang)性質控(kong)品、陰性質控(kong)品各取5μL,分別加(jia)入相應的反應管(guan)中(zhong),蓋好(hao)管(guan)蓋(gai),混(hun)勻(yun),短暫離(li)心(xin)。
4.PCR 擴增(核(he)酸擴(kuo)增區(qu))
2.1 將待檢測(ce)反應管(guan)置(zhi)於(yu)熒光(guang)定(ding)量(liang) PCR 儀(yi)反應槽(cao)內(nei);
2.2 設置好(hao)通(tong)道(dao)、樣品信息,反應體系設置為 25μL;熒光(guang)通(tong)道(dao)選(xuan)擇(ze):檢測(ce)通道(dao)(Reporter Dye)FAM,淬(cui)滅(mie)通道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系列儀(yi)器請(qing)勿選(xuan)擇(ze) ROX 參比熒光(guang),選(xuan)擇(ze) None 即可。
2.3 推薦(jian)循(xun)環參數(shu)設置:
步驟(zhou) | 循(xun)環數(shu) | 溫度(du) | 時(shi)間(jian) | 收集熒光(guang)信號(hao) |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否 |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否 |
60℃ | 30sec | 是 |
5.結果(guo)分析判(pan)定(ding)
5.1結果(guo)分析條(tiao)件(jian)設定(ding)(請(qing)參(can)照(zhao)各儀(yi)器使(shi)用說(shuo)明書進(jin)行設置,以(yi)分(fen)析(xi) ABI7500 儀(yi)器為例) 反應結(jie)束(shu)後自(zi)動(dong)保(bao)存結(jie)果(guo),根(gen)據(ju)分(fen)析後圖(tu)像調(tiao)節(jie) Baseline 的 Start 值、End 值以(yi)及 Threshold 值(用戶(hu)可(ke)根(gen) 據(ju)實(shi)際(ji)情(qing)況自行調(tiao)整(zheng),Start 值可設在 3~15、End 值可設在 5~20,使(shi)閾(yu)值(zhi)線位於(yu)擴增(zeng)曲(qu)線指數(shu)期(qi),陰性質控(kong) 品的擴(kuo)增(zeng)曲線平直或低(di)於(yu)閾(yu)值(zhi)線),點擊(ji) Analyze 自動獲(huo)得(de)分(fen)析(xi)結(jie)果(guo)。
5.2結果(guo)判斷
陽(yang)性:檢(jian)測(ce)通(tong)道Ct 值≤40,且(qie)曲(qu)線有(you)明顯(xian)的指(zhi)數(shu)增(zeng)長(chang)曲線;
陰性:樣本(ben)檢(jian)測結果(guo)無Ct 值,且(qie)無(wu)特異性擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線;
可疑:樣本(ben)檢(jian)測結果(guo)40<Ct 值≤45,建議重(zhong)復(fu)檢(jian)測(ce),如(ru)果(guo)檢測通(tong)道仍為40值≤45,且(qie)曲(qu)線有(you)明顯(xian)的增(zeng)長(chang) 曲線,判定(ding)為陽(yang)性,否則(ze)為陰性。
5.3 質控(kong)標(biao)準 陰性質控(kong)品:無(wu)特異性擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線或無Ct 值顯示(shi);陽(yang)性質控(kong)品:擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線有(you)明顯(xian)指(zhi)數(shu)增(zeng)長(chang)期,且(qie) Ct 值≤32;以(yi)上條(tiao)件(jian)應同(tong)時(shi)滿(man)足,否則(ze)實(shi)驗視為無(wu)效。
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