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50T致(zhi)病性大腸桿(gan)菌(EPEC)PCR核(he)酸(suan)試劑盒





產(chan)品(pin)簡(jian)介(jie)
致(zhi)病性大腸桿(gan)菌(EPEC)PCR核(he)酸(suan)試劑盒是(shi)我司實時(shi)熒光(guang)探(tan)針(zhen)法(fa)試(shi)劑盒,種(zhong)類齊全(quan),精(jing)準高效(xiao),現(xian)貨供(gong)應,歡迎(ying)廣(guang)大新老(lao)客戶(hu)前來咨(zi)詢和選購。
產(chan)品(pin)分(fen)類(lei)
【產品(pin)名(ming)稱(cheng)】
商品(pin)名(ming)稱(cheng):致病性大腸桿(gan)菌(EPEC)PCR核(he)酸(suan)試劑盒
【包裝規(gui)格】25T/盒、50T/盒
【檢(jian)驗(yan)原理(li)】本試劑盒采(cai)用(yong)TaqMan 探針(zhen)法(fa)實時(shi)熒光(guang)PCR 技術,根(gen)據致病性大腸桿(gan)菌(EPEC)基因(yin)設(she)計特(te)異(yi)性(xing)引物和熒光(guang)探(tan)針(zhen),用(yong)熒光(guang)PCR技術對致病性大腸桿(gan)菌(EPEC)的核(he)酸(suan)進行體外擴增檢(jian)測,用(yong)於(yu)臨(lin)床上對可疑(yi)感(gan)染病料(liao)的(de)病原學診(zhen)斷(duan)。
我司的(de)實時(shi)熒光(guang)探(tan)針(zhen)法(fa)試(shi)劑盒種(zhong)類齊全(quan)(涵(han)蓋(gai)禽病、豬病、馬牛(niu)羊(yang)病和水產動物病原體(ti)檢(jian)測),精(jing)準高效(xiao),多重檢(jian)測(壹(yi)重(zhong)、雙(shuang)重、三重),現(xian)貨供應歡迎(ying)廣(guang)大新老(lao)客戶(hu)前來咨詢和選購。
【試劑組(zu)成(cheng)】
包裝規(gui)格 | 25T/盒 | 50T/盒 |
反(fan)應(ying)液(ye) | 500μL×1 管 | 500μL×2 管 |
酶液(ye) | 25μL×1 管 | 50μL×1 管 |
陽(yang)性(xing)質控品(pin) | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
陰性質控品(pin) | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
說明:不同批號(hao)的試劑盒組(zu)分不可(ke)交互使(shi)用(yong)
【儲存條件(jian)及有效(xiao)期】
-20℃±5℃,避光(guang)保(bao)存、運輸、反(fan)復凍(dong)融(rong)次數(shu)不超(chao)過 5 次,有效(xiao)期 12 個(ge)月。
【適用(yong)儀器(qi)】 ABI7500、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系列熒光(guang)定量(liang)PCR 檢(jian)測儀(yi)。
【致病性大腸桿(gan)菌(EPEC)PCR核(he)酸(suan)試劑盒使(shi)用(yong)方法(fa)】
1.樣品(pin)處(chu)理(li)(樣(yang)本處(chu)理(li)區(qu))
核(he)酸(suan)提取(qu) 推(tui)薦(jian)采(cai)用(yong)核(he)酸(suan)提取(qu)或純(chun)化試(shi)劑(磁(ci)珠(zhu)法(fa)或(huo)離心柱法(fa))進(jin)行核(he)酸(suan)提取(qu),請(qing)按照試劑說(shuo)明書進行操(cao)作(zuo)。
2.試劑配(pei)制(zhi)(試(shi)劑準(zhun)備(bei)區(qu))根(gen)據待(dai)檢(jian)測樣(yang)本總(zong)數(shu),設(she)所需要(yao)的(de)PCR 反(fan)應(ying)管(guan)管(guan)數(shu)為(wei) N(N=樣本數(shu)+1 管陰性對照+1 管陽(yang)性(xing)對照;反(fan)應(ying)管(guan)數(shu)每(mei)滿10 份,多配制1 份),每測試反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)配(pei)制如下表(biao):
試劑 | 反(fan)應(ying)液(ye) | 酶液(ye) |
用(yong)量(樣(yang)本數(shu)為(wei) N) | 19μL | 1μL |
將混(hun)合(he)好(hao)的(de)測(ce)試反(fan)應(ying)液(ye)分(fen)裝(zhuang)到(dao) PCR 反(fan)應(ying)管(guan)中,20μL/管。
3.加(jia)樣(樣本處(chu)理(li)區(qu))將步驟 1 提取(qu)的核(he)酸(suan)、陽(yang)性(xing)質控品(pin)、陰性質控品(pin)各(ge)取(qu)5μL,分別加(jia)入相應的(de)反(fan)應(ying)管(guan)中,蓋好(hao)管蓋(gai),混(hun)勻(yun),短(duan)暫(zan)離(li)心。
4.PCR 擴增(核(he)酸(suan)擴增區(qu))
2.1 將待(dai)檢(jian)測反(fan)應(ying)管(guan)置(zhi)於(yu)熒光(guang)定量(liang) PCR 儀反(fan)應(ying)槽(cao)內(nei);
2.2 設置好通道、樣品(pin)信(xin)息(xi),反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)設(she)置為 25μL;熒光(guang)通(tong)道選擇:檢(jian)測通(tong)道(Reporter Dye)FAM,淬滅(mie)通(tong)道(Quencher Dye)NONE,ABI 系列儀器請(qing)勿(wu)選(xuan)擇 ROX 參(can)比熒光(guang),選(xuan)擇 None 即可(ke)。
2.3 推(tui)薦(jian)循環參(can)數(shu)設(she)置:
步驟 | 循環數(shu) | 溫(wen)度(du) | 時間 | 收(shou)集熒光(guang)信(xin)號(hao) |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否 |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否 |
60℃ | 30sec | 是 |
5.結(jie)果(guo)分(fen)析(xi)判定
5.1結(jie)果(guo)分(fen)析(xi)條件(jian)設定(請(qing)參(can)照各儀器使(shi)用(yong)說明書進行設置(zhi),以分(fen)析(xi) ABI7500 儀器為例(li)) 反(fan)應(ying)結(jie)束(shu)後(hou)自(zi)動(dong)保存結(jie)果(guo),根(gen)據分析後(hou)圖像調節(jie) Baseline 的 Start 值、End 值以及 Threshold 值(用(yong)戶(hu)可(ke)根(gen) 據實際(ji)情(qing)況(kuang)自(zi)行調整,Start 值可設在 3~15、End 值可設在 5~20,使(shi)閾值(zhi)線(xian)位(wei)於(yu)擴增曲線指數(shu)期,陰性質控 品(pin)的(de)擴增曲線平直(zhi)或(huo)低(di)於(yu)閾(yu)值線),點(dian)擊(ji) Analyze 自(zi)動(dong)獲得分析(xi)結(jie)果(guo)。
5.2結(jie)果(guo)判斷(duan)
陽(yang)性(xing):檢(jian)測通(tong)道Ct 值≤40,且(qie)曲線(xian)有(you)明顯的指數(shu)增長曲線;
陰性:樣本檢(jian)測結(jie)果(guo)無Ct 值,且(qie)無特(te)異(yi)性(xing)擴增曲線;
可疑:樣本檢(jian)測結(jie)果(guo)40<Ct 值≤45,建(jian)議重復檢(jian)測,如(ru)果檢(jian)測通(tong)道仍為40值≤45,且(qie)曲線(xian)有(you)明顯的增長 曲線,判定為(wei)陽(yang)性(xing),否則(ze)為陰性。
5.3 質控標準 陰性質控品(pin):無特(te)異(yi)性(xing)擴增曲線或無Ct 值顯示(shi);陽(yang)性(xing)質控品(pin):擴增曲線有明顯指數(shu)增長期,且(qie) Ct 值≤32;以上條件(jian)應同時滿(man)足,否則(ze)實驗(yan)視為(wei)無效(xiao)。
【產品(pin)推(tui)薦(jian)】
| ZK-D-0308 | 腦(nao)膜(mo)炎奈瑟菌W135群(qun)(NM-W135)核(he)酸(suan)檢(jian)測試(shi)劑盒(熒光(guang)-PCR法(fa)) |
| ZK-D-0309 | 肺(fei)炎鏈(lian)球菌(SP)核(he)酸(suan)檢(jian)測試(shi)劑盒(熒光(guang)-PCR法(fa)) |
| ZK-D-0310 | 雙(shuang)歧桿菌(BD)核(he)酸(suan)檢(jian)測試(shi)劑盒(熒光(guang)-PCR法(fa)) |
| ZK-D-0311 | 百(bai)日(ri)咳(ke)桿(gan)菌(BP)核(he)酸(suan)檢(jian)測試(shi)劑盒(熒光(guang)-PCR法(fa)) |
| ZK-D-0312 | 產(chan)腸毒素(su)性(xing)大腸桿(gan)菌(ETEC)核(he)酸(suan)檢(jian)測試(shi)劑盒(熒光(guang)-PCR法(fa)) |
| ZK-D-0313 | 腸集(ji)聚(ju)性大腸桿(gan)菌(EAEC)核(he)酸(suan)檢(jian)測試(shi)劑盒(熒光(guang)-PCR法(fa)) |
| ZK-D-0314 | 腸侵(qin)襲(xi)性大腸桿(gan)菌(EIEC)核(he)酸(suan)檢(jian)測試(shi)劑盒(熒光(guang)-PCR法(fa)) |
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