產品(pin)簡介

牛(niu)支原體(ti)（MYPB）核(he)酸試(shi)劑(ji)盒(he)(熒光-PCR法(fa))是我(wo)司(si)實時(shi)熒光探(tan)針(zhen)法(fa)試(shi)劑(ji)盒(he),種類齊全(quan),精(jing)準(zhun)高效，現(xian)貨(huo)供(gong)應,歡迎(ying)廣(guang)大新(xin)老(lao)客戶前來(lai)選(xuan)購。

【產品(pin)名稱(cheng)】

商品(pin)名稱(cheng)：牛(niu)支原體(ti)（MYPB）核(he)酸試(shi)劑(ji)盒(he)(熒光-PCR法(fa))

【包裝規格】25T/盒、50T/盒

【檢(jian)驗(yan)原理】本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)采(cai)用TaqMan 探(tan)針(zhen)法(fa)實時(shi)熒光PCR 技術(shu)，根(gen)據 牛(niu)支原體(ti)（MYPB）基(ji)因設計(ji)特異(yi)性引物和(he)熒光探(tan)針(zhen)，用熒光PCR技術(shu)對(dui)牛(niu)支原體(ti)（MYPB）的核(he)酸進行體(ti)外擴增檢(jian)測(ce)，用於臨床(chuang)上(shang)對(dui)可(ke)疑(yi)感染(ran)病料的病原學(xue)診(zhen)斷。

我(wo)司(si)的實時(shi)熒光探(tan)針(zhen)法(fa)試(shi)劑(ji)盒(he)種類齊全(quan)（涵蓋(gai)禽(qin)病、豬病(bing)、馬牛(niu)羊(yang)病(bing)和(he)水(shui)產動(dong)物病(bing)原體(ti)檢(jian)測(ce)），精(jing)準(zhun)高效，多(duo)重(zhong)檢(jian)測(ce)（壹(yi)重(zhong)、雙(shuang)重(zhong)、三(san)重(zhong)），現(xian)貨(huo)供(gong)應歡迎(ying)廣(guang)大新(xin)老(lao)客戶前來(lai)選(xuan)購。

【試(shi)劑(ji)組(zu)成】

說明：不同批(pi)號(hao)的試(shi)劑(ji)盒(he)組(zu)分(fen)不可(ke)交互(hu)使(shi)用

【儲存條(tiao)件(jian)及(ji)有(you)效(xiao)期】

 -20℃±5℃，避光(guang)保存、運輸、反復凍融次(ci)數不超過 5 次，有(you)效(xiao)期 12 個月(yue)。

【適用(yong)儀器(qi)】 ABI7500、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系列(lie)熒光定(ding)量PCR 檢(jian)測(ce)儀。

【使用(yong)方法(fa)】

1.樣品(pin)處理(li)（樣本(ben)處理區）

 核(he)酸提(ti)取(qu) 推薦采(cai)用核(he)酸提(ti)取(qu)或(huo)純(chun)化試(shi)劑(ji)（磁(ci)珠法(fa)或(huo)離(li)心(xin)柱法(fa)）進(jin)行核(he)酸提(ti)取(qu)， 請按(an)照試(shi)劑(ji)說明書進(jin)行操(cao)作。

2.試(shi)劑(ji)配制（試(shi)劑(ji)準(zhun)備區）根(gen)據待檢(jian)測(ce)樣本(ben)總數，設所(suo)需要(yao)的PCR 反應管管數為 N(N=樣本(ben)數+1 管陰(yin)性(xing)對(dui)照+1 管陽性對(dui)照；反應管數每滿10 份(fen)，多(duo)配制1 份(fen))，每測(ce)試(shi)反(fan)應體(ti)系配制如下表(biao)：

將混(hun)合好的測試(shi)反(fan)應液分(fen)裝到 PCR 反應管中，20μL/管。

3.加樣（樣本(ben)處理區）將步(bu)驟 1 提(ti)取(qu)的核(he)酸、陽性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin)、陰(yin)性(xing)質控品(pin)各取(qu)5μL，分(fen)別(bie)加入相應的反應管中，蓋好管蓋，混(hun)勻，短暫離(li)心(xin)。

4.PCR 擴增（核(he)酸擴增區）

2.1 將待檢(jian)測(ce)反應管置於熒光定(ding)量 PCR 儀反(fan)應槽內(nei)；

2.2 設置(zhi)好通道(dao)、樣品(pin)信(xin)息，反應體(ti)系設(she)置為 25μL；熒光通道(dao)選(xuan)擇：檢(jian)測(ce)通道(dao)（Reporter Dye）FAM，淬滅(mie)通道(dao)（Quencher Dye）NONE，ABI 系列(lie)儀器(qi)請(qing)勿選(xuan)擇 ROX 參比(bi)熒光，選(xuan)擇 None 即(ji)可(ke)。

2.3 推薦循環參數設置：

5.結(jie)果分(fen)析(xi)判定(ding)

5.1結(jie)果分(fen)析(xi)條(tiao)件(jian)設定(ding)（請參(can)照各儀器(qi)使(shi)用說明書進(jin)行設(she)置(zhi)，以(yi)分(fen)析(xi) ABI7500 儀器(qi)為例(li)） 反應結(jie)束後(hou)自動(dong)保存結(jie)果，根(gen)據分(fen)析(xi)後(hou)圖像調節(jie) Baseline 的 Start 值、End 值以(yi)及(ji) Threshold 值（用(yong)戶可(ke)根(gen) 據實際(ji)情(qing)況自行調(tiao)整(zheng)，Start 值可(ke)設(she)在(zai) 3～15、End 值可(ke)設(she)在(zai) 5～20，使閾值線(xian)位於擴增曲線(xian)指(zhi)數期，陰(yin)性(xing)質控 品(pin)的擴增曲線(xian)平(ping)直(zhi)或(huo)低(di)於閾值線(xian)），點擊 Analyze 自動(dong)獲得(de)分(fen)析(xi)結(jie)果。

5.2結(jie)果判斷

陽性(xing)：檢(jian)測(ce)通道(dao)Ct 值≤40，且(qie)曲線(xian)有(you)明顯的指(zhi)數增長(chang)曲線(xian)；

陰(yin)性(xing)：樣本(ben)檢(jian)測(ce)結(jie)果無Ct 值，且(qie)無特異(yi)性擴增曲線(xian)；

可(ke)疑(yi)：樣本(ben)檢(jian)測(ce)結(jie)果40＜Ct 值≤45，建議重(zhong)復檢(jian)測(ce)，如果檢(jian)測(ce)通道(dao)仍為40值≤45，且(qie)曲線(xian)有(you)明顯的增長(chang) 曲線(xian)，判(pan)定(ding)為陽性，否(fou)則為陰(yin)性(xing)。

5.3 質控(kong)標準(zhun) 陰(yin)性(xing)質控品(pin)：無特異(yi)性擴增曲線(xian)或(huo)無Ct 值顯(xian)示；陽性質控(kong)品(pin)：擴增曲線(xian)有(you)明顯指(zhi)數增長(chang)期，且(qie) Ct 值≤32；以上(shang)條(tiao)件(jian)應同時(shi)滿(man)足，否(fou)則實驗(yan)視(shi)為無效。

【牛(niu)支原體(ti)（MYPB）核(he)酸試(shi)劑(ji)盒(he)(熒光-PCR法(fa))註意(yi)事項(xiang)】

1.所(suo)有(you)操(cao)作嚴(yan)格按照(zhao)說明書進(jin)行；

2.試(shi)劑(ji)盒(he)內(nei)各種(zhong)組(zu)分(fen)使(shi)用前應自然融(rong)化，完(wan)quan混(hun)勻並(bing)短暫離(li)心(xin)；

3.反應液應避光保存；

4.反應中盡(jin)量避免(mian)氣泡(pao)存在(zai)，管蓋需蓋緊；

5.使用(yong)壹(yi)次性(xing)吸(xi)頭、壹(yi)次性(xing)手(shou)套和各區專(zhuan)用(yong)工作服(fu)；

6.樣本(ben)處理、試(shi)劑(ji)配制、加樣需在不同區(qu)進(jin)行，以(yi)免(mian)交叉(cha)汙染(ran)；

7.實驗(yan)完(wan)畢(bi)後(hou)用 10%次氯(lv)酸或(huo) 75%酒精(jing)或(huo)紫(zi)外(wai)燈處(chu)理(li)工作臺(tai)和移液器(qi)；

8.試(shi)劑(ji)盒(he)裏所(suo)有(you)物品(pin)應視為汙染(ran)物對(dui)待，並(bing)按(an)照(zhao)《微生物生物醫(yi)學(xue)實驗(yan)室(shi)生物安(an)全(quan)通則》進行處(chu)理(li)。