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PCR試(shi)劑盒
其他(ta)PCR試劑(ji)盒(he)
50T羊(yang)衣原體(ti)(OC)核酸(suan)試劑(ji)盒(he)(熒光(guang)-PCR法)





產品(pin)簡(jian)介
羊(yang)衣原體(ti)(OC)核酸(suan)試劑(ji)盒(he)(熒光(guang)-PCR法)是我(wo)司實時(shi)熒光(guang)探針(zhen)法試劑盒,種(zhong)類(lei)齊全,精準(zhun)高(gao)效,現(xian)貨(huo)供(gong)應(ying),歡(huan)迎廣(guang)大(da)新老(lao)客戶前來(lai)選(xuan)購(gou)。
產品(pin)分類
【產品(pin)名(ming)稱(cheng)】
商(shang)品(pin)名(ming)稱(cheng):羊(yang)衣原體(ti)(OC)核酸(suan)試劑(ji)盒(he)(熒光(guang)-PCR法)
【包裝(zhuang)規(gui)格(ge)】25T/盒(he)、50T/盒(he)
【檢(jian)驗原理】本試劑盒采用(yong)TaqMan 探針(zhen)法實時(shi)熒光(guang)PCR 技(ji)術,根據(ju) 羊(yang)衣原體(ti)(OC)基因設(she)計特(te)異(yi)性(xing)引物和(he)熒光(guang)探針(zhen),用熒光(guang)PCR技(ji)術對(dui)羊(yang)衣原體(ti)(OC)的(de)核酸(suan)進行(xing)體外擴(kuo)增(zeng)檢(jian)測(ce),用(yong)於(yu)臨床(chuang)上(shang)對(dui)可疑感(gan)染病料的(de)病原(yuan)學(xue)診斷(duan)。
我(wo)司的(de)實時(shi)熒光(guang)探針(zhen)法試劑盒種(zhong)類(lei)齊全(涵(han)蓋禽(qin)病、豬(zhu)病、馬(ma)牛(niu)羊(yang)病和(he)水產動(dong)物病原(yuan)體(ti)檢測(ce)),精準(zhun)高(gao)效,多(duo)重檢(jian)測(ce)(壹(yi)重、雙(shuang)重、三(san)重),現(xian)貨供應(ying)歡(huan)迎廣(guang)大(da)新老(lao)客戶前來(lai)選(xuan)購(gou)。
【試(shi)劑(ji)組(zu)成】
包裝(zhuang)規(gui)格(ge) | 25T/盒(he) | 50T/盒(he) |
反應(ying)液(ye) | 500μL×1 管 | 500μL×2 管 |
酶液(ye) | 25μL×1 管 | 50μL×1 管 |
陽性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin) | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
陰(yin)性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin) | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
說明(ming):不(bu)同批(pi)號(hao)的(de)試(shi)劑(ji)盒(he)組(zu)分不(bu)可交互使(shi)用(yong)
【儲(chu)存(cun)條件(jian)及有效(xiao)期】
-20℃±5℃,避光(guang)保存(cun)、運(yun)輸(shu)、反復(fu)凍融(rong)次數不(bu)超過(guo) 5 次,有效(xiao)期 12 個(ge)月。
【適用儀(yi)器(qi)】 ABI7500、安捷(jie)倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光(guang)定量PCR 檢(jian)測(ce)儀(yi)。
【使(shi)用(yong)方法】
1.樣(yang)品(pin)處(chu)理(樣(yang)本(ben)處(chu)理區)
核酸(suan)提取 推薦采用(yong)核酸(suan)提取或(huo)純化(hua)試劑(ji)(磁(ci)珠(zhu)法或離(li)心(xin)柱(zhu)法)進行(xing)核酸(suan)提取, 請按照試(shi)劑(ji)說(shuo)明(ming)書(shu)進行(xing)操(cao)作(zuo)。
2.試(shi)劑(ji)配制(試(shi)劑(ji)準(zhun)備(bei)區)根(gen)據待(dai)檢(jian)測(ce)樣(yang)本(ben)總(zong)數,設(she)所需(xu)要(yao)的(de)PCR 反應(ying)管管數為(wei) N(N=樣(yang)本(ben)數+1 管陰(yin)性(xing)對(dui)照+1 管陽性(xing)對(dui)照;反應(ying)管數每(mei)滿(man)10 份,多(duo)配制1 份),每(mei)測(ce)試(shi)反應(ying)體(ti)系(xi)配制如(ru)下(xia)表:
試(shi)劑(ji) | 反應(ying)液(ye) | 酶液(ye) |
用(yong)量(liang)(樣(yang)本(ben)數為(wei) N) | 19μL | 1μL |
將(jiang)混合(he)好的(de)測(ce)試(shi)反應(ying)液(ye)分裝(zhuang)到(dao) PCR 反應(ying)管中(zhong),20μL/管。
3.加樣(yang)(樣(yang)本(ben)處(chu)理區)將(jiang)步(bu)驟(zhou) 1 提取的(de)核酸(suan)、陽性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin)、陰(yin)性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin)各取5μL,分別加入相應(ying)的(de)反應(ying)管中(zhong),蓋好(hao)管蓋,混(hun)勻,短暫(zan)離(li)心(xin)。
4.PCR 擴(kuo)增(zeng)(核酸(suan)擴(kuo)增(zeng)區)
2.1 將(jiang)待檢(jian)測(ce)反應(ying)管置於(yu)熒光(guang)定量 PCR 儀(yi)反應(ying)槽內;
2.2 設(she)置好通道(dao)、樣(yang)品(pin)信(xin)息(xi),反應(ying)體(ti)系(xi)設(she)置為(wei) 25μL;熒光(guang)通道(dao)選擇:檢(jian)測(ce)通道(dao)(Reporter Dye)FAM,淬(cui)滅(mie)通道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系列(lie)儀(yi)器(qi)請勿(wu)選(xuan)擇 ROX 參比(bi)熒光(guang),選擇(ze) None 即(ji)可。
2.3 推薦循(xun)環參數設(she)置:
步(bu)驟(zhou) | 循(xun)環(huan)數 | 溫(wen)度(du) | 時(shi)間 | 收(shou)集熒光(guang)信(xin)號(hao) |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否(fou) |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否 |
60℃ | 30sec | 是 |
5.結果(guo)分析判定
5.1結果(guo)分析條件(jian)設(she)定(請參照各儀(yi)器(qi)使(shi)用(yong)說明書進(jin)行(xing)設(she)置,以分析 ABI7500 儀(yi)器(qi)為(wei)例) 反應(ying)結(jie)束(shu)後自動(dong)保存結(jie)果,根據分析後圖像(xiang)調(tiao)節(jie) Baseline 的(de) Start 值、End 值以(yi)及 Threshold 值(zhi)(用(yong)戶可根 據(ju)實際(ji)情況自行(xing)調(tiao)整(zheng),Start 值(zhi)可設(she)在(zai) 3~15、End 值可設(she)在(zai) 5~20,使(shi)閾(yu)值(zhi)線位於(yu)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)指(zhi)數期,陰(yin)性(xing)質(zhi)控(kong) 品(pin)的(de)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)平直(zhi)或(huo)低於(yu)閾(yu)值(zhi)線),點擊 Analyze 自(zi)動(dong)獲得(de)分析結(jie)果(guo)。
5.2結果判斷(duan)
陽性(xing):檢測(ce)通道(dao)Ct 值(zhi)≤40,且(qie)曲(qu)線(xian)有明(ming)顯的(de)指(zhi)數增(zeng)長(chang)曲(qu)線(xian);
陰(yin)性(xing):樣(yang)本(ben)檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)無(wu)Ct 值,且無(wu)特異性(xing)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian);
可疑:樣(yang)本(ben)檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)40<Ct 值≤45,建議(yi)重復(fu)檢測(ce),如(ru)果(guo)檢(jian)測(ce)通道(dao)仍(reng)為(wei)40值≤45,且(qie)曲(qu)線(xian)有明(ming)顯的(de)增(zeng)長(chang) 曲(qu)線(xian),判定為(wei)陽性(xing),否則(ze)為(wei)陰(yin)性(xing)。
5.3 質(zhi)控(kong)標(biao)準(zhun) 陰(yin)性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin):無(wu)特(te)異(yi)性(xing)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)或無(wu)Ct 值(zhi)顯(xian)示(shi);陽性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin):擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)有明(ming)顯指(zhi)數增(zeng)長(chang)期,且 Ct 值(zhi)≤32;以上(shang)條件(jian)應(ying)同(tong)時(shi)滿(man)足,否(fou)則實驗視(shi)為(wei)無效(xiao)。
【羊(yang)衣原體(ti)(OC)核酸(suan)試劑(ji)盒(he)(熒光(guang)-PCR法)註意事項(xiang)】
1.所(suo)有操(cao)作(zuo)嚴格(ge)按照(zhao)說(shuo)明(ming)書進(jin)行(xing);
2.試(shi)劑盒內各種(zhong)組(zu)分使(shi)用(yong)前應(ying)自(zi)然(ran)融(rong)化(hua),完(wan)quan混勻並(bing)短暫(zan)離(li)心(xin);
3.反應(ying)液(ye)應(ying)避光(guang)保存(cun);
4.反應(ying)中(zhong)盡量(liang)避免氣泡(pao)存在(zai),管蓋需(xu)蓋緊;
5.使(shi)用(yong)壹(yi)次性(xing)吸(xi)頭、壹(yi)次性(xing)手套和(he)各區專用工(gong)作(zuo)服;
6.樣(yang)本(ben)處(chu)理、試劑配制、加樣(yang)需(xu)在(zai)不(bu)同區進行(xing),以免交(jiao)叉汙染(ran);
7.實驗完(wan)畢後用 10%次氯酸(suan)或 75%酒精或紫(zi)外(wai)燈(deng)處(chu)理工作(zuo)臺和(he)移液(ye)器(qi);
8.試劑(ji)盒裏所(suo)有物品(pin)應(ying)視(shi)為(wei)汙染(ran)物對(dui)待,並(bing)按照(zhao)《微生物生物醫學(xue)實驗室生物安全通則(ze)》進(jin)行(xing)處(chu)理。
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