人(ren)抗(kang)腎(shen)上(shang)腺(xian)皮(pi)質抗(kang)體(AAA）ELISA試劑盒簡(jian)介(jie)

人(ren)抗(kang)腎(shen)上(shang)腺(xian)皮(pi)質抗(kang)體(AAA）ELISA試劑盒簡(jian)介(jie)

備註：

1、標(biao)準(zhun)品(pin)濃(nong)度依次(ci)為：詳(xiang)見(jian)說明書(shu)；

2、經過(guo)大(da)量正(zheng)常(chang)標(biao)本(ben)檢(jian)驗(yan)，標(biao)本(ben)的(de)正(zheng)常(chang)濃度(du)值均在(zai)試劑盒提(ti)供的(de)檢(jian)測範(fan)圍(wei)內，實驗過(guo)程(cheng)中(zhong)直接(jie)取(qu)50μL樣(yang)本(ben)上(shang)樣(yang)即(ji)可(ke)。當(dang)有部(bu)分(fen)樣(yang)本(ben)值(zhi)超(chao)過最(zui)大(da)標(biao)準(zhun)品(pin)濃(nong)度時，可(ke)用(yong)樣(yang)本(ben)稀釋(shi)液將標(biao)本(ben)進行適當(dang)稀釋(shi)後再進行實驗。

註意(yi)事項(xiang)

1、嚴格按(an)照(zhao)規(gui)定(ding)的時(shi)間和溫(wen)度(du)進行溫(wen)育以(yi)保(bao)證準確(que)結果。所(suo)有試劑都必(bi)須在(zai)使用前達到室(shi)溫20-25℃。使用後立即(ji)冷(leng)藏保(bao)存(cun)試劑。

2、洗板(ban)不(bu)正(zheng)確(que)可(ke)以(yi)導(dao)致(zhi)不(bu)準(zhun)確(que)的結果。在加入底物(wu)前確(que)保(bao)盡(jin)量(liang)吸幹(gan)孔(kong)內液體。溫育(yu)過程(cheng)中(zhong)不(bu)要(yao)讓(rang)微(wei)孔(kong)幹(gan)燥(zao)掉。

3、消除板(ban)底殘留的液體和手指印，否(fou)則影響(xiang)OD值。

4、底物(wu)顯(xian)色液應呈(cheng)無(wu)色或很淺的顏(yan)色，已經變(bian)藍(lan)的底物(wu)液不(bu)能(neng)使用。

5、避(bi)免試劑和標(biao)本(ben)的(de)交叉汙(wu)染以(yi)免造成錯(cuo)誤結(jie)果(guo)。

6、在儲(chu)存和溫(wen)育(yu)時(shi)避(bi)免強光(guang)直(zhi)接照(zhao)射。

7、平(ping)衡至(zhi)室溫(wen)後再打(da)開密(mi)封(feng)袋(dai)以(yi)防(fang)水滴凝聚(ju)在冷(leng)板(ban)條上(shang)。

8、任(ren)何(he)反(fan)應試劑不(bu)能(neng)接(jie)觸漂(piao)白溶劑或漂白溶劑所(suo)散發的(de)強(qiang)烈氣體。任(ren)何(he)漂(piao)白成分(fen)都會破壞(huai)試劑盒中(zhong)反應試劑的生物活(huo)性(xing)。

9、不(bu)能(neng)使用過(guo)期產(chan)品(pin)。

10、如果(guo)可(ke)能(neng)傳播(bo)疾病，所(suo)有的(de)樣(yang)品(pin)都應管(guan)理(li)好，按(an)照(zhao)規(gui)定(ding)的程(cheng)序(xu)處(chu)理(li)樣(yang)品(pin)和檢(jian)測裝置(zhi)。

試劑準備

試劑盒從(cong)冷(leng)藏環(huan)境(jing)中(zhong)取(qu)出(chu)應在(zai)室(shi)溫平(ping)衡後方可(ke)使用。

20×洗滌(di)緩(huan)沖液的稀釋(shi)：蒸餾水按1：20稀釋(shi)，即1份20×洗滌(di)緩(huan)沖液加19份蒸(zheng)餾(liu)水。

操作(zuo)步(bu)驟(zhou)

1.從(cong)室(shi)溫平(ping)衡20min後的鋁箔(bo)袋中(zhong)取(qu)出(chu)所(suo)需板(ban)條，剩余(yu)板(ban)條用(yong)自封(feng)袋(dai)密(mi)封(feng)放(fang)回(hui)4℃。

2. 設(she)置(zhi)標(biao)準(zhun)品(pin)孔(kong)和樣(yang)本(ben)孔(kong)，標(biao)準(zhun)品(pin)孔(kong)各(ge)加(jia)不(bu)同(tong)濃(nong)度(du)的(de)標(biao)準(zhun)品(pin)50μL；

3.樣(yang)本(ben)孔(kong)中(zhong)加入待測樣(yang)本(ben)50μL；空白孔不(bu)加(jia)。

4. 除空白孔外，標(biao)準(zhun)品(pin)孔(kong)和樣(yang)本(ben)孔(kong)中(zhong)每孔(kong)加入辣(la)根過氧化(hua)物(wu)酶(mei)（HRP）標(biao)記(ji)的檢(jian)測抗(kang)體100μL，用封(feng)板(ban)膜(mo)封(feng)住反(fan)應孔(kong)，37℃水浴鍋或恒(heng)溫箱(xiang)溫育(yu)60min。

5. 棄去液體，吸水紙上拍(pai)幹(gan)，每(mei)孔(kong)加(jia)滿洗滌(di)液（350μL），靜置(zhi)1min，甩去(qu)洗(xi)滌(di)液，吸水紙上拍(pai)幹(gan)，如(ru)此(ci)重(zhong)復洗(xi)板(ban)5次(ci)（也可(ke)用(yong)洗(xi)板(ban)機洗(xi)板(ban)）。

6.每孔(kong)加入底物(wu)A、B各(ge)50μL，37℃避(bi)光(guang)孵(fu)育(yu)15min。

7.每孔(kong)加入終(zhong)止液50μL，15min內，在(zai)450nm波長處測定(ding)各(ge)孔(kong)的(de)OD值。

實驗結(jie)果(guo)計(ji)算(suan)

以所(suo)測標(biao)準(zhun)品(pin)的(de)OD值為橫(heng)坐(zuo)標(biao)，標(biao)準(zhun)品(pin)的(de)濃度值為(wei)縱坐(zuo)標(biao)，在(zai)坐(zuo)標(biao)紙(zhi)上(shang)或用相(xiang)關(guan)軟件(jian)繪(hui)制(zhi)標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)，並得(de)到直線(xian)回(hui)歸方(fang)程(cheng)，將樣(yang)品(pin)的(de)OD值代入方(fang)程(cheng)，計(ji)算(suan)出(chu)樣(yang)品(pin)的濃度(du)。

試劑盒性(xing)能(neng)

1、檢測範(fan)圍(wei)：詳(xiang)見(jian)產品(pin)說明書(shu)。

2、靈(ling)敏度(du)：最(zui)di檢測濃度(du)小於(yu)0.1 U/L。

3、特異性：不(bu)與(yu)其(qi)它(ta)可(ke)溶性(xing)結(jie)構類似(si)物交叉反(fan)應。

4、重(zhong)復性(xing)：板(ban)內變(bian)異系數(shu)小於(yu)10% ，板(ban)間變(bian)異系數(shu)小於(yu)15% 。