產(chan)品中(zhong)心
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產(chan)品中(zhong)心
PCR試劑盒(he)
禽類PCR試劑盒(he)
50T禽流感病(bing)毒(du)H10亞型(AIV-H10)PCR試劑盒(he)
產(chan)品簡介
禽(qin)流感病(bing)毒(du)H10亞型(AIV-H10)PCR試劑盒(he)是我(wo)司實(shi)時(shi)熒光探(tan)針法試劑盒(he),種類齊全,精(jing)準(zhun)高效(xiao),現(xian)貨(huo)供(gong)應,歡(huan)迎(ying)廣大(da)新(xin)老客(ke)戶(hu)前(qian)來選(xuan)購。
產(chan)品分(fen)類
【產(chan)品名(ming)稱(cheng)】
商(shang)品名(ming)稱(cheng):禽(qin)流感病(bing)毒(du)H10亞(ya)型(AIV-H10)PCR試劑盒(he)(熒光PCR 法(fa))
【包裝(zhuang)規(gui)格】25T/盒(he)、50T/盒(he)
【檢(jian)驗(yan)原理(li)】本(ben)試劑盒(he)采(cai)用(yong)TaqMan 探(tan)針法實(shi)時(shi)熒光PCR 技(ji)術(shu),根據 禽(qin)流感病(bing)毒H10亞(ya)型(AIV-H10)基因(yin)設計(ji)特異性(xing)引物(wu)和熒光探(tan)針,用熒光PCR技(ji)術(shu)對禽(qin)流感病(bing)毒(du)H10亞(ya)型(AIV-H10)的(de)核(he)酸進(jin)行(xing)體(ti)外擴(kuo)增(zeng)檢(jian)測(ce),用(yong)於臨床上對可(ke)疑感(gan)染病料(liao)的(de)病原學(xue)診(zhen)斷。
【試劑組(zu)成】
| 包裝(zhuang)規(gui)格 | 25T/盒(he) | 50T/盒(he) |
| 反(fan)應液(ye) | 500μL×1 管(guan) | 500μL×2 管(guan) |
| 酶(mei)液(ye) | 25μL×1 管(guan) | 50μL×1 管(guan) |
| 陽(yang)性質(zhi)控品 | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
| 陰(yin)性質(zhi)控品 | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
說(shuo)明:不同批號(hao)的(de)試劑盒(he)組(zu)分(fen)不可(ke)交互使(shi)用(yong)
【儲(chu)存(cun)條(tiao)件(jian)及有效期】
-20℃±5℃,避(bi)光保(bao)存(cun)、運(yun)輸、反復(fu)凍(dong)融次(ci)數(shu)不超過(guo) 5 次(ci),有效期 12 個(ge)月。
【適(shi)用儀器(qi)】 ABI7500、安捷(jie)倫(lun) MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系列熒光定量(liang)PCR 檢(jian)測儀。
【使(shi)用(yong)方(fang)法】
1.樣(yang)品處理(li)(樣(yang)本(ben)處理(li)區(qu))
核(he)酸提(ti)取(qu) 推(tui)薦采(cai)用(yong)核(he)酸提(ti)取(qu)或純(chun)化(hua)試劑(磁珠法(fa)或(huo)離(li)心柱法(fa))進行核(he)酸提(ti)取(qu), 請按照(zhao)試劑說明(ming)書(shu)進(jin)行(xing)操作。
2.試劑配(pei)制(試劑準備(bei)區(qu))根(gen)據待檢測樣(yang)本(ben)總(zong)數,設所(suo)需(xu)要的(de)PCR 反(fan)應管(guan)管(guan)數為 N(N=樣(yang)本(ben)數(shu)+1 管(guan)陰性(xing)對照(zhao)+1 管(guan)陽性(xing)對照(zhao);反應(ying)管(guan)數每(mei)滿(man)10 份(fen),多配(pei)制1 份(fen)),每(mei)測試反(fan)應(ying)體(ti)系配(pei)制如下(xia)表(biao):
| 試劑 | 反(fan)應液(ye) | 酶(mei)液(ye) |
| 用(yong)量(liang)(樣(yang)本(ben)數(shu)為 N) | 19μL | 1μL |
將混合好(hao)的(de)測試反(fan)應(ying)液(ye)分(fen)裝(zhuang)到(dao) PCR 反(fan)應管(guan)中,20μL/管(guan)。
3.加(jia)樣(yang)(樣(yang)本(ben)處理(li)區(qu))將步(bu)驟 1 提(ti)取(qu)的(de)核(he)酸、陽(yang)性(xing)質(zhi)控品、陰(yin)性質(zhi)控品各(ge)取(qu)5μL,分(fen)別加入(ru)相應的(de)反應(ying)管(guan)中,蓋好(hao)管(guan)蓋,混勻,短(duan)暫離(li)心。
4.PCR 擴(kuo)增(zeng)(核(he)酸擴(kuo)增(zeng)區(qu))
2.1 將待(dai)檢測反(fan)應(ying)管(guan)置於(yu)熒光定量(liang) PCR 儀反應槽(cao)內(nei);
2.2 設置好通道(dao)、樣(yang)品信息(xi),反(fan)應(ying)體(ti)系設置為 25μL;熒光通(tong)道(dao)選(xuan)擇(ze):檢測通道(dao)(Reporter Dye)FAM,淬(cui)滅(mie)通道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系列儀器(qi)請勿選(xuan)擇(ze) ROX 參(can)比熒光,選(xuan)擇(ze) None 即(ji)可(ke)。
2.3 推(tui)薦循(xun)環參數設置:
| 步(bu)驟 | 循(xun)環數 | 溫(wen)度 | 時(shi)間 | 收(shou)集(ji)熒光信號(hao) |
| 1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否 |
| 2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否 |
| 60℃ | 30sec | 是 |
5.結(jie)果(guo)分析(xi)判(pan)定
5.1結(jie)果(guo)分析(xi)條件(jian)設定(請參(can)照(zhao)各(ge)儀器(qi)使(shi)用(yong)說(shuo)明書(shu)進(jin)行(xing)設置,以分(fen)析 ABI7500 儀器(qi)為例) 反(fan)應結束(shu)後自動(dong)保(bao)存(cun)結(jie)果(guo),根據分析後圖像調(tiao)節(jie) Baseline 的(de) Start 值(zhi)、End 值(zhi)以及(ji) Threshold 值(zhi)(用戶可(ke)根 據實(shi)際(ji)情(qing)況(kuang)自行(xing)調(tiao)整,Start 值(zhi)可(ke)設在 3~15、End 值(zhi)可(ke)設在 5~20,使(shi)閾(yu)值(zhi)線位於擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)指數(shu)期,陰(yin)性質(zhi)控 品的(de)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)平(ping)直(zhi)或(huo)低(di)於(yu)閾(yu)值(zhi)線),點擊 Analyze 自動(dong)獲(huo)得分(fen)析(xi)結果(guo)。
5.2結(jie)果(guo)判(pan)斷
陽(yang)性:檢測(ce)通道(dao)Ct 值(zhi)≤40,且曲線有明顯的(de)指數(shu)增(zeng)長(chang)曲(qu)線(xian);
陰(yin)性:樣(yang)本(ben)檢(jian)測(ce)結果(guo)無Ct 值(zhi),且無特異性(xing)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian);
可(ke)疑:樣(yang)本(ben)檢(jian)測(ce)結果(guo)40<Ct 值(zhi)≤45,建議重復檢測,如果(guo)檢測(ce)通道(dao)仍為40值(zhi)≤45,且曲線有明顯的(de)增(zeng)長(chang) 曲(qu)線,判(pan)定為陽性,否則為陰性。
5.3 質(zhi)控標(biao)準 陰(yin)性質(zhi)控品:無特異性(xing)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)或(huo)無Ct 值(zhi)顯示(shi);陽性質(zhi)控品:擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)有明顯指數(shu)增(zeng)長(chang)期(qi),且 Ct 值(zhi)≤32;以上(shang)條件(jian)應同時(shi)滿(man)足(zu),否則實(shi)驗(yan)視(shi)為無效(xiao)。
3. 檢(jian)測方法(fa)的(de)局限(xian)性
1. 樣(yang)本(ben)檢(jian)測(ce)結果(guo)與樣(yang)本(ben)收(shou)集(ji)、處理(li)、運(yun)送(song)以及(ji)保(bao)存(cun)質(zhi)量(liang)有關;
2. 樣(yang)本(ben)提(ti)取(qu)過(guo)程中(zhong)沒有控制好交叉汙染,會出(chu)現(xian)假(jia)陽性結果(guo);
3. 陽(yang)性對照(zhao)、擴(kuo)增(zeng)產(chan)物(wu)泄漏(lou),會導致(zhi)假陽(yang)性結(jie)果(guo);
4. 病(bing)原體(ti)在流行過(guo)程中(zhong)基因(yin)突變、重組(zu),會(hui)導致(zhi)假陰(yin)性結(jie)果(guo);
5. 不同的(de)提取(qu)方法(fa)存(cun)在提取(qu)效率(lv)差(cha)異,會(hui)導致(zhi)假陰(yin)性結(jie)果(guo);
6. 試劑運輸,保(bao)存(cun)不當或(huo)試劑配(pei)制不準確(que)引起(qi)的(de)試劑檢測(ce)效(xiao)能(neng)下降,出(chu)現(xian)假(jia)陰性或定量(liang)檢測(ce)不準確(que)的(de)結果(guo);
7. 本(ben)檢測結(jie)果(guo)僅供(gong)參考,如須確診(zhen)請結(jie)合(he)臨(lin)床癥(zheng)狀以及(ji)其他(ta)檢測(ce)手段(duan)。
【 禽(qin)流感病(bing)毒(du)H10亞(ya)型(AIV-H10)PCR試劑盒(he)註(zhu)意(yi)事項】
1.所(suo)有操作嚴格(ge)按照(zhao)說明(ming)書(shu)進(jin)行(xing);
2.試劑盒(he)內各(ge)種(zhong)組(zu)分(fen)使(shi)用(yong)前(qian)應自然融化,完(wan)quan混勻並(bing)短(duan)暫離(li)心;
3.反(fan)應液(ye)應(ying)避(bi)光(guang)保(bao)存(cun);
4.反(fan)應中盡(jin)量(liang)避免(mian)氣(qi)泡(pao)存(cun)在,管(guan)蓋需(xu)蓋緊(jin);
5.使(shi)用(yong)壹(yi)次(ci)性(xing)吸(xi)頭、壹(yi)次(ci)性(xing)手(shou)套(tao)和各(ge)區(qu)專(zhuan)用工(gong)作(zuo)服;
6.樣(yang)本(ben)處理(li)、試劑配(pei)制、加樣(yang)需(xu)在不同區(qu)進(jin)行,以免(mian)交叉汙染;
7.實(shi)驗(yan)完(wan)畢(bi)後用(yong) 10%次(ci)氯(lv)酸或(huo) 75%酒精或(huo)紫(zi)外燈(deng)處理(li)工(gong)作(zuo)臺(tai)和移(yi)液(ye)器(qi);
8.試劑盒(he)裏所(suo)有物(wu)品應(ying)視(shi)為汙染物(wu)對(dui)待(dai),並(bing)按照(zhao)《微生(sheng)物(wu)生(sheng)物(wu)醫(yi)學(xue)實(shi)驗(yan)室生(sheng)物(wu)安全通(tong)則》進(jin)行(xing)處理(li)。
我(wo)司的(de)實(shi)時(shi)熒光探(tan)針法試劑盒(he)種類齊全(涵(han)蓋禽(qin)病、豬病、馬(ma)牛(niu)羊病(bing)和水(shui)產(chan)動(dong)物(wu)病(bing)原體(ti)檢(jian)測),精準(zhun)高效(xiao),多重(zhong)檢(jian)測(壹(yi)重、雙重(zhong)、三(san)重),現(xian)貨(huo)供(gong)應歡(huan)迎(ying)廣大(da)新(xin)老客(ke)戶(hu)前(qian)來選(xuan)購。
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