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PCR試(shi)劑盒(he)
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50T布氏桿(gan)菌(jun)(BS)核酸(suan)檢測試(shi)劑盒(he)(熒(ying)光-PCR法(fa))





產(chan)品(pin)簡介
布氏桿(gan)菌(jun)(BS)核酸(suan)檢測試(shi)劑盒(he)(熒(ying)光-PCR法(fa))是(shi)我司(si)實(shi)時(shi)熒(ying)光探針(zhen)法(fa)試(shi)劑盒(he),種類齊(qi)全,精準高效(xiao),現貨供應,歡迎(ying)廣(guang)大(da)新(xin)老(lao)客(ke)戶(hu)前(qian)來(lai)選(xuan)購(gou)。
產(chan)品(pin)分(fen)類
【產品名(ming)稱】
商品名稱:布氏桿(gan)菌(jun)(BS)核酸(suan)試(shi)劑盒(he)(熒(ying)光-PCR法(fa))
【包(bao)裝規(gui)格】25T/盒、50T/盒
【檢驗原理】本試(shi)劑盒(he)采用TaqMan 探針(zhen)法(fa)實(shi)時(shi)熒(ying)光PCR 技術,根據 布氏桿(gan)菌(jun)(BS)基因設(she)計特異性引(yin)物(wu)和熒(ying)光探針(zhen),用(yong)熒(ying)光PCR技術對布氏桿(gan)菌(jun)(BS)的核酸(suan)進行(xing)體外擴增檢測,用於臨(lin)床(chuang)上對可(ke)疑感(gan)染(ran)病(bing)料的病(bing)原學診斷。
【試(shi)劑組成】
包(bao)裝規(gui)格 | 25T/盒 | 50T/盒 |
反應液 | 500μL×1 管 | 500μL×2 管 |
酶(mei)液 | 25μL×1 管 | 50μL×1 管 |
陽性質(zhi)控(kong)品(pin) | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
陰性質(zhi)控(kong)品(pin) | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
說明:不同(tong)批號(hao)的試(shi)劑盒(he)組分(fen)不可(ke)交(jiao)互(hu)使用(yong)
【儲存條件及有效(xiao)期】
-20℃±5℃,避光(guang)保(bao)存(cun)、運(yun)輸、反復凍(dong)融(rong)次(ci)數(shu)不超過(guo) 5 次,有效(xiao)期 12 個月。
【適用儀(yi)器(qi)】 ABI7500、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系(xi)列熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR 檢測儀。
【使用(yong)方(fang)法】
1.樣品處(chu)理(樣本(ben)處理區)
核酸(suan)提(ti)取 推薦(jian)采用(yong)核酸(suan)提(ti)取或(huo)純化試(shi)劑(磁(ci)珠法(fa)或離(li)心(xin)柱(zhu)法(fa))進行核酸(suan)提(ti)取, 請(qing)按照(zhao)試(shi)劑說(shuo)明書進(jin)行(xing)操作。
2.試(shi)劑配(pei)制(試(shi)劑準(zhun)備(bei)區)根據待檢測樣本(ben)總(zong)數(shu),設所(suo)需(xu)要的(de)PCR 反應管管數(shu)為 N(N=樣本數(shu)+1 管陰性對照(zhao)+1 管陽性對照(zhao);反應管數(shu)每滿(man)10 份(fen),多(duo)配(pei)制(zhi)1 份(fen)),每測試(shi)反應體系(xi)配制(zhi)如(ru)下(xia)表:
試(shi)劑 | 反應液 | 酶(mei)液 |
用量(樣(yang)本數(shu)為 N) | 19μL | 1μL |
將混(hun)合好的測試(shi)反應液分(fen)裝到(dao) PCR 反應管中,20μL/管。
3.加(jia)樣(yang)(樣本處理區)將步驟 1 提(ti)取的(de)核酸(suan)、陽性質(zhi)控(kong)品(pin)、陰(yin)性質(zhi)控(kong)品(pin)各(ge)取5μL,分(fen)別(bie)加(jia)入(ru)相應的反應管中,蓋(gai)好管蓋,混(hun)勻,短(duan)暫(zan)離(li)心(xin)。
4.PCR 擴增(核酸(suan)擴增區)
2.1 將待檢測反應管置於熒(ying)光定(ding)量(liang) PCR 儀反應槽內(nei);
2.2 設置好通道、樣(yang)品信(xin)息(xi),反應體系(xi)設置為 25μL;熒(ying)光通(tong)道選(xuan)擇:檢測通道(Reporter Dye)FAM,淬(cui)滅通道(Quencher Dye)NONE,ABI 系(xi)列儀(yi)器(qi)請(qing)勿選(xuan)擇 ROX 參比熒(ying)光,選(xuan)擇 None 即可。
2.3 推薦(jian)循環參數(shu)設置:
步驟 | 循環數(shu) | 溫度(du) | 時(shi)間 | 收集熒(ying)光信(xin)號(hao) |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否 |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否 |
60℃ | 30sec | 是(shi) |
5.結(jie)果(guo)分(fen)析判定
5.1結(jie)果(guo)分(fen)析條件設定(ding)(請(qing)參照(zhao)各(ge)儀器(qi)使用(yong)說(shuo)明書進(jin)行(xing)設置,以分(fen)析 ABI7500 儀器(qi)為(wei)例) 反應結(jie)束(shu)後自(zi)動(dong)保(bao)存(cun)結(jie)果(guo),根據分(fen)析後圖(tu)像(xiang)調節(jie) Baseline 的 Start 值、End 值以及 Threshold 值(用戶(hu)可根 據實(shi)際(ji)情況(kuang)自(zi)行(xing)調整(zheng),Start 值可設(she)在(zai) 3~15、End 值可設(she)在(zai) 5~20,使閾(yu)值線位於擴增曲線指(zhi)數(shu)期,陰(yin)性質(zhi)控(kong) 品的擴增曲線平(ping)直(zhi)或低於閾(yu)值線),點擊 Analyze 自(zi)動(dong)獲(huo)得分(fen)析結(jie)果(guo)。
5.2結(jie)果(guo)判斷
陽性:檢測通道Ct 值≤40,且(qie)曲線有明顯的指(zhi)數(shu)增長(chang)曲線;
陰性:樣(yang)本檢測結(jie)果(guo)無Ct 值,且(qie)無特(te)異(yi)性擴增曲線;
可疑:樣(yang)本檢測結(jie)果(guo)40<Ct 值≤45,建(jian)議重(zhong)復檢測,如(ru)果檢測通道仍(reng)為40值≤45,且(qie)曲線有明顯的增長(chang) 曲線,判定為陽性,否則(ze)為(wei)陰(yin)性。
5.3 質控(kong)標(biao)準(zhun) 陰性質(zhi)控(kong)品(pin):無特(te)異(yi)性擴增曲線或(huo)無Ct 值顯示;陽性質(zhi)控(kong)品(pin):擴增曲線有明顯指數(shu)增長(chang)期(qi),且(qie) Ct 值≤32;以上條件應同(tong)時(shi)滿足(zu),否則(ze)實(shi)驗視為(wei)無效(xiao)。
3. 檢測方法(fa)的局(ju)限(xian)性
1. 樣本檢測結(jie)果(guo)與樣本(ben)收集、處(chu)理、運(yun)送以及保(bao)存質量(liang)有關;
2. 樣本提(ti)取過(guo)程中沒有控(kong)制(zhi)好交(jiao)叉(cha)汙染,會出現假陽性結(jie)果(guo);
3. 陽性對照(zhao)、擴增產物(wu)泄漏(lou),會(hui)導(dao)致(zhi)假陽性結(jie)果(guo);
4. 病(bing)原體在(zai)流(liu)行(xing)過(guo)程(cheng)中基(ji)因突(tu)變、重(zhong)組,會導(dao)致(zhi)假陰(yin)性結(jie)果(guo);
5. 不同(tong)的提(ti)取方(fang)法存(cun)在(zai)提(ti)取效(xiao)率差異,會導(dao)致(zhi)假陰(yin)性結(jie)果(guo);
6. 試(shi)劑運(yun)輸,保(bao)存(cun)不當(dang)或試(shi)劑配(pei)制不準(zhun)確(que)引(yin)起的試(shi)劑檢測效(xiao)能下(xia)降(jiang),出現假陰(yin)性或(huo)定量檢測不準(zhun)確(que)的結(jie)果(guo);
7. 本檢測結(jie)果(guo)僅供(gong)參考(kao),如(ru)須確(que)診請(qing)結(jie)合臨(lin)床(chuang)癥(zheng)狀(zhuang)以(yi)及其他檢測手段(duan)。
【布氏桿(gan)菌(jun)(BS)核酸(suan)試(shi)劑盒(he)(熒(ying)光-PCR法(fa))註意事(shi)項(xiang)】
1.所(suo)有操(cao)作嚴(yan)格按照(zhao)說(shuo)明書進(jin)行(xing);
2.試(shi)劑盒(he)內(nei)各(ge)種組分(fen)使用(yong)前(qian)應自(zi)然(ran)融(rong)化,完quan混(hun)勻並短(duan)暫(zan)離(li)心(xin);
3.反應液應避光(guang)保(bao)存(cun);
4.反應中盡(jin)量避免(mian)氣(qi)泡(pao)存(cun)在(zai),管蓋需(xu)蓋(gai)緊(jin);
5.使用(yong)壹(yi)次(ci)性吸(xi)頭、壹(yi)次(ci)性手(shou)套和各(ge)區專用(yong)工(gong)作服;
6.樣本處(chu)理、試(shi)劑配(pei)制、加(jia)樣(yang)需在(zai)不同(tong)區進行(xing),以免(mian)交(jiao)叉(cha)汙染;
7.實(shi)驗完畢後用 10%次氯(lv)酸(suan)或 75%酒精或(huo)紫外(wai)燈(deng)處理工(gong)作臺和移液(ye)器(qi);
8.試(shi)劑盒(he)裏(li)所(suo)有物(wu)品應視為(wei)汙染物(wu)對待(dai),並按照(zhao)《微生物生物醫學實(shi)驗室(shi)生物安全通(tong)則(ze)》進行處(chu)理。
我司(si)的(de)實(shi)時(shi)熒(ying)光探針(zhen)法(fa)試(shi)劑盒(he)種類齊(qi)全(涵(han)蓋禽病(bing)、豬病(bing)、馬牛(niu)羊(yang)病(bing)和水產動(dong)物病(bing)原體檢測),精準(zhun)高效(xiao),多重檢測(壹(yi)重(zhong)、雙重(zhong)、三(san)重(zhong)),現(xian)貨供應歡迎(ying)廣(guang)大(da)新(xin)老(lao)客(ke)戶(hu)前(qian)來(lai)選(xuan)購(gou)。
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