產(chan)品(pin)簡介(jie)

牛副結(jie)核分(fen)歧桿(gan)菌(jun)(MPB)核酸(suan)試劑(ji)盒(he)是我司(si)實時(shi)熒(ying)光探(tan)針(zhen)法試劑(ji)盒(he),種(zhong)類(lei)齊(qi)全,精(jing)準高效，現(xian)貨(huo)供應(ying),歡(huan)迎廣大新老(lao)客戶前來選(xuan)購(gou)。

【產(chan)品(pin)名稱】

商品(pin)名稱：牛副結(jie)核分(fen)歧桿(gan)菌(jun)(MPB)核酸(suan)試劑(ji)盒(he)(熒(ying)光-PCR法)

【包裝(zhuang)規格(ge)】25T/盒(he)、50T/盒(he)

【檢驗(yan)原(yuan)理(li)】本試(shi)劑(ji)盒(he)采(cai)用(yong)TaqMan 探(tan)針(zhen)法實時(shi)熒(ying)光PCR 技(ji)術，根據(ju) 牛副結(jie)核分(fen)歧桿(gan)菌(jun)(MPB)基因設計(ji)特異性(xing)引物(wu)和熒(ying)光探(tan)針(zhen)，用(yong)熒(ying)光PCR技(ji)術對(dui)牛副結(jie)核分(fen)歧桿(gan)菌(jun)(MPB)的核酸(suan)進行(xing)體(ti)外(wai)擴(kuo)增(zeng)檢測，用(yong)於臨床(chuang)上對(dui)可疑(yi)感染病(bing)料的病(bing)原(yuan)學(xue)診(zhen)斷。

【試劑(ji)組(zu)成(cheng)】

說明(ming)：不(bu)同批(pi)號(hao)的試劑(ji)盒(he)組(zu)分(fen)不(bu)可(ke)交互使(shi)用(yong)

【儲(chu)存(cun)條(tiao)件及(ji)有效期(qi)】

 -20℃±5℃，避(bi)光(guang)保(bao)存、運輸、反(fan)復凍(dong)融次數(shu)不超(chao)過 5 次，有效期(qi) 12 個月(yue)。

【適用(yong)儀(yi)器(qi)】 ABI7500、安捷(jie)倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR 檢測儀(yi)。

【使用(yong)方(fang)法】

1.樣品(pin)處(chu)理(li)（樣(yang)本處理(li)區(qu)）

 核酸(suan)提取(qu) 推薦(jian)采(cai)用(yong)核酸(suan)提取(qu)或(huo)純(chun)化(hua)試(shi)劑(ji)（磁(ci)珠法或(huo)離(li)心柱(zhu)法）進行(xing)核酸(suan)提取(qu)， 請按(an)照試劑(ji)說明(ming)書(shu)進行(xing)操作(zuo)。

2.試劑(ji)配制(zhi)（試(shi)劑(ji)準備區(qu)）根據(ju)待檢測樣(yang)本(ben)總數(shu)，設所需要的PCR 反(fan)應(ying)管管(guan)數(shu)為(wei) N(N=樣本(ben)數(shu)+1 管陰(yin)性(xing)對(dui)照+1 管陽(yang)性(xing)對(dui)照；反(fan)應(ying)管數(shu)每(mei)滿(man)10 份，多(duo)配制(zhi)1 份)，每(mei)測試(shi)反(fan)應(ying)體(ti)系配制(zhi)如(ru)下表：

將(jiang)混(hun)合(he)好(hao)的測試(shi)反(fan)應(ying)液(ye)分(fen)裝(zhuang)到 PCR 反(fan)應(ying)管中，20μL/管。

3.加樣(yang)（樣(yang)本(ben)處理區(qu)）將(jiang)步(bu)驟(zhou) 1 提取(qu)的核酸(suan)、陽性(xing)質控品(pin)、陰(yin)性(xing)質控品(pin)各取5μL，分別(bie)加(jia)入(ru)相應(ying)的反(fan)應(ying)管中，蓋(gai)好(hao)管(guan)蓋(gai)，混(hun)勻，短(duan)暫離(li)心。

4.PCR 擴(kuo)增(zeng)（核酸(suan)擴(kuo)增(zeng)區(qu)）

2.1 將(jiang)待檢測反(fan)應(ying)管置於熒(ying)光定(ding)量(liang) PCR 儀(yi)反(fan)應(ying)槽(cao)內；

2.2 設置好(hao)通(tong)道、樣(yang)品(pin)信(xin)息(xi)，反(fan)應(ying)體(ti)系設置為(wei) 25μL；熒(ying)光通(tong)道選(xuan)擇(ze)：檢測通(tong)道（Reporter Dye）FAM，淬(cui)滅通(tong)道（Quencher Dye）NONE，ABI 系列儀(yi)器(qi)請勿選(xuan)擇(ze) ROX 參(can)比熒(ying)光，選(xuan)擇(ze) None 即可。

2.3 推薦(jian)循(xun)環參(can)數(shu)設置：

5.結(jie)果分(fen)析判定

5.1結(jie)果分(fen)析條(tiao)件設(she)定（請參(can)照各儀(yi)器(qi)使用(yong)說明(ming)書(shu)進行(xing)設(she)置，以分析 ABI7500 儀(yi)器(qi)為(wei)例） 反(fan)應(ying)結(jie)束後(hou)自(zi)動保(bao)存結(jie)果，根據(ju)分(fen)析(xi)後(hou)圖(tu)像(xiang)調(tiao)節(jie) Baseline 的 Start 值、End 值以(yi)及(ji) Threshold 值（用(yong)戶可(ke)根 據(ju)實(shi)際(ji)情(qing)況自(zi)行(xing)調(tiao)整(zheng)，Start 值可(ke)設(she)在(zai) 3～15、End 值可(ke)設(she)在(zai) 5～20，使閾值線(xian)位於(yu)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線指(zhi)數(shu)期(qi)，陰性(xing)質控 品(pin)的擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線平(ping)直或(huo)低於閾值線(xian)），點(dian)擊(ji) Analyze 自(zi)動獲得分析結(jie)果。

5.2結(jie)果判斷

陽性(xing)：檢測通(tong)道Ct 值≤40，且曲(qu)線(xian)有明(ming)顯(xian)的指(zhi)數(shu)增長(chang)曲線；

陰性(xing)：樣(yang)本(ben)檢測結(jie)果無(wu)Ct 值，且(qie)無(wu)特異性(xing)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線；

可疑(yi)：樣(yang)本(ben)檢測結(jie)果40＜Ct 值≤45，建(jian)議(yi)重復檢測，如(ru)果檢測通(tong)道仍(reng)為(wei)40值≤45，且曲(qu)線(xian)有明(ming)顯(xian)的增長 曲線(xian)，判定為(wei)陽性，否(fou)則(ze)為(wei)陰性。

5.3 質控標準 陰性(xing)質控品(pin)：無(wu)特異性(xing)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線或(huo)無(wu)Ct 值顯(xian)示；陽性(xing)質控品(pin)：擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線有明(ming)顯(xian)指(zhi)數(shu)增長(chang)期(qi)，且 Ct 值≤32；以上(shang)條(tiao)件應(ying)同時(shi)滿(man)足(zu)，否(fou)則(ze)實驗(yan)視為(wei)無(wu)效。

3. 檢測方(fang)法的局(ju)限(xian)性(xing)

1. 樣本(ben)檢測結(jie)果與(yu)樣本(ben)收(shou)集(ji)、處(chu)理(li)、運(yun)送(song)以(yi)及(ji)保(bao)存質量(liang)有關(guan)；

2. 樣本(ben)提(ti)取(qu)過程中沒(mei)有控制好(hao)交叉汙(wu)染，會出(chu)現假(jia)陽性(xing)結(jie)果；

3. 陽性(xing)對(dui)照、擴(kuo)增(zeng)產(chan)物(wu)泄漏，會導(dao)致(zhi)假(jia)陽性(xing)結(jie)果；

4. 病(bing)原(yuan)體(ti)在流(liu)行(xing)過(guo)程(cheng)中基因突(tu)變(bian)、重組(zu)，會導(dao)致(zhi)假(jia)陰性(xing)結(jie)果；

5. 不同的提取方(fang)法存在(zai)提取(qu)效率差(cha)異，會導(dao)致(zhi)假(jia)陰性(xing)結(jie)果；

6. 試劑(ji)運輸(shu)，保(bao)存不當或(huo)試(shi)劑(ji)配制(zhi)不(bu)準確(que)引起的試劑(ji)檢測效能(neng)下降(jiang)，出(chu)現假(jia)陰性(xing)或(huo)定(ding)量(liang)檢測不(bu)準確(que)的結(jie)果；

7. 本檢測結(jie)果僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，如(ru)須確(que)診(zhen)請結(jie)合(he)臨床(chuang)癥狀以(yi)及(ji)其(qi)他檢測手(shou)段(duan)。

【牛副結(jie)核分(fen)歧桿(gan)菌(jun)(MPB)核酸(suan)試劑(ji)盒(he)(熒(ying)光-PCR法)註意(yi)事(shi)項】

1.所有操作(zuo)嚴(yan)格(ge)按(an)照說明(ming)書(shu)進行(xing)；

2.試劑(ji)盒(he)內各種(zhong)組(zu)分(fen)使(shi)用(yong)前應(ying)自(zi)然融化(hua)，完(wan)quan混(hun)勻並短(duan)暫離(li)心；

3.反(fan)應(ying)液(ye)應(ying)避(bi)光(guang)保(bao)存；

4.反(fan)應(ying)中盡量避(bi)免(mian)氣(qi)泡(pao)存(cun)在(zai)，管(guan)蓋(gai)需蓋(gai)緊(jin)；

5.使用(yong)壹(yi)次性(xing)吸(xi)頭、壹(yi)次性(xing)手(shou)套(tao)和(he)各區(qu)專(zhuan)用(yong)工(gong)作(zuo)服；

6.樣本(ben)處(chu)理(li)、試劑(ji)配制(zhi)、加(jia)樣需在(zai)不(bu)同區(qu)進行(xing)，以(yi)免(mian)交叉汙(wu)染；

7.實驗(yan)完(wan)畢後(hou)用(yong) 10%次氯酸(suan)或(huo) 75%酒精(jing)或(huo)紫(zi)外(wai)燈處(chu)理(li)工(gong)作(zuo)臺和移液(ye)器(qi)；

8.試劑(ji)盒(he)裏所有物(wu)品(pin)應(ying)視為(wei)汙(wu)染物(wu)對(dui)待，並按(an)照《微(wei)生物(wu)生物(wu)醫(yi)學(xue)實驗(yan)室生(sheng)物(wu)安全(quan)通(tong)則(ze)》進行(xing)處(chu)理(li)。

我司(si)的實時熒(ying)光探(tan)針(zhen)法試劑(ji)盒(he)種(zhong)類(lei)齊(qi)全（涵(han)蓋(gai)禽(qin)病(bing)、豬病(bing)、馬牛羊(yang)病(bing)和水(shui)產(chan)動物(wu)病(bing)原(yuan)體(ti)檢測），精(jing)準高效，多(duo)重檢測（壹(yi)重、雙重、三(san)重），現(xian)貨供(gong)應(ying)歡(huan)迎廣大新老(lao)客戶前來選(xuan)購(gou)。