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PCR試(shi)劑盒
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50T甲(jia)型(xing)流(liu)感(gan)病(bing)毒N6亞(ya)型(xing)(IAV-N6)PCR檢測試(shi)劑盒
產(chan)品(pin)簡介
甲(jia)型(xing)流(liu)感(gan)病(bing)毒N6亞(ya)型(xing)(IAV-N6)PCR檢測試(shi)劑盒是我司(si)實(shi)時(shi)熒(ying)光探針(zhen)法(fa)試(shi)劑盒,種(zhong)類齊全(quan),精(jing)準(zhun)高效,現貨(huo)供(gong)應,歡迎廣大(da)新(xin)老(lao)客(ke)戶(hu)前(qian)來選購(gou)。
產品(pin)分類
相(xiang)關(guan)文(wen)章
【產品(pin)名稱】
商品(pin)名稱:甲(jia)型(xing)流(liu)感(gan)病(bing)毒N6亞型(xing)(IAV-N6)PCR檢測試(shi)劑盒(熒(ying)光PCR 法)
【包(bao)裝(zhuang)規格(ge)】25T/盒、50T/盒
【檢驗原理】本試(shi)劑盒采用(yong)TaqMan 探針(zhen)法(fa)實(shi)時(shi)熒(ying)光PCR 技(ji)術,根據(ju) 甲(jia)型(xing)流(liu)感(gan)病(bing)毒N6亞型(xing)(IAV-N6)基(ji)因設計(ji)特異(yi)性引(yin)物(wu)和(he)熒(ying)光探針(zhen),用(yong)熒(ying)光PCR技(ji)術對甲(jia)型(xing)流(liu)感(gan)病(bing)毒N6亞型(xing)(IAV-N6)的(de)核(he)酸(suan)進(jin)行(xing)體(ti)外(wai)擴(kuo)增(zeng)檢測,用(yong)於(yu)臨床(chuang)上(shang)對(dui)可(ke)疑感(gan)染(ran)病料(liao)的(de)病(bing)原學診斷(duan)。
【試(shi)劑組(zu)成】
包(bao)裝(zhuang)規格(ge) | 25T/盒 | 50T/盒 |
反(fan)應液 | 500μL×1 管(guan) | 500μL×2 管(guan) |
酶液 | 25μL×1 管(guan) | 50μL×1 管(guan) |
陽性質控(kong)品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
陰性質控(kong)品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
說明:不(bu)同(tong)批(pi)號(hao)的(de)試(shi)劑盒組(zu)分不可(ke)交(jiao)互使(shi)用(yong)
【儲(chu)存(cun)條件(jian)及有(you)效期】
-20℃±5℃,避(bi)光(guang)保存(cun)、運(yun)輸、反(fan)復(fu)凍融次(ci)數(shu)不(bu)超(chao)過 5 次(ci),有(you)效期 12 個(ge)月(yue)。
【適(shi)用(yong)儀(yi)器】 ABI7500、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系(xi)列(lie)熒(ying)光定(ding)量PCR 檢測儀。
【使(shi)用(yong)方(fang)法】
1.樣(yang)品(pin)處理(li)(樣(yang)本(ben)處理(li)區(qu))
核酸(suan)提(ti)取(qu) 推薦(jian)采用(yong)核(he)酸(suan)提(ti)取(qu)或(huo)純(chun)化試(shi)劑(磁珠法(fa)或(huo)離心柱(zhu)法(fa))進(jin)行(xing)核(he)酸(suan)提(ti)取(qu), 請按(an)照(zhao)試(shi)劑說明書(shu)進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)。
2.試(shi)劑配制(試(shi)劑準(zhun)備(bei)區(qu))根據(ju)待檢測樣(yang)本(ben)總(zong)數(shu),設(she)所(suo)需(xu)要的(de)PCR 反(fan)應管(guan)管(guan)數(shu)為 N(N=樣(yang)本(ben)數(shu)+1 管(guan)陰(yin)性對照(zhao)+1 管(guan)陽(yang)性對照(zhao);反(fan)應管(guan)數(shu)每(mei)滿(man)10 份(fen),多(duo)配制1 份(fen)),每測試(shi)反(fan)應體系(xi)配制如(ru)下表:
試(shi)劑 | 反(fan)應液 | 酶液 |
用(yong)量(樣(yang)本(ben)數(shu)為 N) | 19μL | 1μL |
將混合(he)好的(de)測(ce)試(shi)反(fan)應液分(fen)裝(zhuang)到 PCR 反(fan)應管(guan)中,20μL/管(guan)。
3.加樣(yang)(樣(yang)本(ben)處理(li)區(qu))將步(bu)驟(zhou) 1 提(ti)取(qu)的(de)核(he)酸(suan)、陽(yang)性質控(kong)品(pin)、陰性質控(kong)品(pin)各取(qu)5μL,分別加入相(xiang)應的(de)反(fan)應管(guan)中,蓋好管(guan)蓋,混勻(yun),短(duan)暫離心。
4.PCR 擴增(zeng)(核酸(suan)擴(kuo)增(zeng)區)
2.1 將待檢測反(fan)應管(guan)置於(yu)熒(ying)光定(ding)量 PCR 儀反(fan)應槽內(nei);
2.2 設置好(hao)通道(dao)、樣(yang)品(pin)信息(xi),反(fan)應體系(xi)設(she)置為 25μL;熒(ying)光通道(dao)選擇:檢測通道(dao)(Reporter Dye)FAM,淬滅通道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系(xi)列(lie)儀(yi)器(qi)請勿選擇 ROX 參比熒(ying)光,選擇 None 即(ji)可(ke)。
2.3 推薦(jian)循(xun)環參(can)數(shu)設(she)置:
步(bu)驟(zhou) | 循環數(shu) | 溫度 | 時間 | 收集(ji)熒(ying)光信號(hao) |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否 |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否 |
60℃ | 30sec | 是 |
5.結果分(fen)析(xi)判定(ding)
5.1結果分(fen)析(xi)條件(jian)設定(ding)(請參照(zhao)各(ge)儀器(qi)使(shi)用(yong)說明書(shu)進(jin)行(xing)設(she)置,以分(fen)析(xi) ABI7500 儀器為例) 反(fan)應結束(shu)後自動(dong)保存(cun)結(jie)果,根(gen)據(ju)分析後圖(tu)像調(tiao)節(jie) Baseline 的(de) Start 值、End 值以及(ji) Threshold 值(用(yong)戶(hu)可(ke)根 據(ju)實(shi)際(ji)情況(kuang)自行(xing)調(tiao)整,Start 值可(ke)設在 3~15、End 值可(ke)設在 5~20,使(shi)閾值線位於(yu)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線指(zhi)數(shu)期,陰(yin)性質控(kong) 品(pin)的(de)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線平(ping)直(zhi)或(huo)低(di)於(yu)閾(yu)值線),點擊(ji) Analyze 自動(dong)獲(huo)得(de)分(fen)析結果。
5.2結果判斷(duan)
陽性:檢測通道(dao)Ct 值≤40,且曲(qu)線有(you)明(ming)顯的(de)指(zhi)數(shu)增(zeng)長曲(qu)線;
陰性:樣(yang)本(ben)檢測結果無(wu)Ct 值,且無(wu)特異(yi)性擴增(zeng)曲(qu)線;
可(ke)疑:樣(yang)本(ben)檢測結果40<Ct 值≤45,建(jian)議(yi)重復(fu)檢測,如果檢測通道(dao)仍(reng)為40值≤45,且曲(qu)線有(you)明(ming)顯的(de)增(zeng)長 曲(qu)線,判定(ding)為陽性,否則(ze)為陰性。
5.3 質控(kong)標(biao)準(zhun) 陰性質控(kong)品(pin):無(wu)特異(yi)性擴增(zeng)曲(qu)線或(huo)無(wu)Ct 值顯示(shi);陽(yang)性質控(kong)品(pin):擴增(zeng)曲(qu)線有(you)明(ming)顯指(zhi)數(shu)增(zeng)長期,且(qie) Ct 值≤32;以上(shang)條件(jian)應同時(shi)滿足(zu),否則(ze)實(shi)驗(yan)視(shi)為無(wu)效。
3. 檢測方法的(de)局(ju)限性
1. 樣(yang)本(ben)檢測結果與(yu)樣(yang)本(ben)收集(ji)、處理(li)、運(yun)送(song)以及(ji)保存(cun)質(zhi)量有(you)關(guan);
2. 樣(yang)本(ben)提(ti)取(qu)過程(cheng)中沒有(you)控(kong)制好(hao)交(jiao)叉汙染(ran),會出(chu)現假陽性結果;
3. 陽性對照(zhao)、擴(kuo)增(zeng)產物(wu)泄(xie)漏,會導致(zhi)假陽性結果;
4. 病原體(ti)在流(liu)行(xing)過程(cheng)中基(ji)因突變(bian)、重組(zu),會導致(zhi)假陰性結果;
5. 不同的(de)提(ti)取(qu)方(fang)法(fa)存(cun)在提(ti)取(qu)效率(lv)差(cha)異(yi),會(hui)導致(zhi)假陰性結果;
6. 試(shi)劑運輸,保存(cun)不(bu)當或(huo)試(shi)劑配制不(bu)準(zhun)確引(yin)起(qi)的(de)試(shi)劑檢測效能(neng)下降(jiang),出現假陰性或(huo)定(ding)量檢測不準(zhun)確的(de)結(jie)果;
7. 本檢測結果僅(jin)供(gong)參(can)考(kao),如(ru)須(xu)確(que)診(zhen)請結合臨床(chuang)癥狀(zhuang)以及(ji)其他檢測手(shou)段(duan)。
【 甲(jia)型(xing)流(liu)感(gan)病(bing)毒N6亞型(xing)(IAV-N6)PCR檢測試(shi)劑盒註意事(shi)項(xiang)】
1.所(suo)有(you)操(cao)作(zuo)嚴格(ge)按(an)照(zhao)說明書(shu)進(jin)行(xing);
2.試(shi)劑盒內(nei)各種(zhong)組(zu)分使(shi)用(yong)前(qian)應自然(ran)融化,完(wan)quan混勻(yun)並短(duan)暫離心;
3.反(fan)應液應避(bi)光(guang)保存(cun);
4.反(fan)應中盡(jin)量避(bi)免氣(qi)泡存在,管(guan)蓋需蓋緊;
5.使(shi)用(yong)壹次(ci)性吸頭、壹次(ci)性手(shou)套和(he)各(ge)區(qu)專(zhuan)用(yong)工(gong)作服;
6.樣(yang)本(ben)處理(li)、試(shi)劑配制、加樣(yang)需(xu)在不(bu)同(tong)區進(jin)行(xing),以免交(jiao)叉汙染(ran);
7.實(shi)驗(yan)完(wan)畢(bi)後(hou)用(yong) 10%次(ci)氯酸(suan)或(huo) 75%酒精(jing)或(huo)紫(zi)外燈(deng)處理(li)工(gong)作(zuo)臺和(he)移液(ye)器;
8.試(shi)劑盒裏(li)所(suo)有(you)物(wu)品(pin)應視為汙染(ran)物對(dui)待,並按(an)照(zhao)《微生(sheng)物(wu)生(sheng)物(wu)醫學實(shi)驗(yan)室(shi)生物(wu)安全通則(ze)》進(jin)行(xing)處理(li)。
我司的(de)實(shi)時(shi)熒(ying)光探針(zhen)法(fa)試(shi)劑盒種(zhong)類齊全(quan)(涵蓋禽病、豬病、馬(ma)牛羊病和(he)水(shui)產(chan)動(dong)物(wu)病(bing)原(yuan)體檢測),精(jing)準(zhun)高效,多(duo)重檢測(壹重、雙重、三(san)重),現貨(huo)供(gong)應歡迎廣大(da)新(xin)老(lao)客(ke)戶(hu)前(qian)來選購(gou)。
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