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產品中(zhong)心(xin)
PCR試劑盒(he)
禽(qin)類PCR試劑盒(he)
50T***病(bing)毒H7亞型 (AIV-H7)PCR檢測試劑盒(he)
產(chan)品簡(jian)介
***病毒H7亞型 (AIV-H7)PCR檢測試劑盒(he)是我司實(shi)時(shi)熒(ying)光(guang)探(tan)針(zhen)法(fa)試劑盒(he),種(zhong)類齊(qi)全(quan),精(jing)準(zhun)高(gao)效(xiao),現貨(huo)供應(ying),歡迎(ying)廣(guang)大新(xin)老客戶前(qian)來選購(gou)。
產品分(fen)類
【產(chan)品名稱】
商(shang)品名稱:***病(bing)毒H7亞型 (AIV-H7)PCR檢測試劑盒(he)(熒(ying)光(guang)PCR 法(fa))
【包(bao)裝規(gui)格】25T/盒(he)、50T/盒(he)
【檢驗(yan)原(yuan)理】本(ben)試劑盒(he)采(cai)用TaqMan 探(tan)針(zhen)法(fa)實(shi)時(shi)熒(ying)光(guang)PCR 技(ji)術(shu),根(gen)據***病(bing)毒H7亞(ya)型(xing)(AIV-H7)基(ji)因設計特(te)異性引(yin)物(wu)和熒光探(tan)針(zhen),用熒光(guang)PCR技(ji)術(shu)對(dui)***病(bing)毒H7亞(ya)型(xing)(AIV-H7)的(de)核酸(suan)進(jin)行體(ti)外(wai)擴增檢測,用於臨(lin)床上對(dui)可疑感(gan)染(ran)病(bing)料(liao)的(de)病原(yuan)學(xue)診(zhen)斷(duan)。
【試劑組成】
包(bao)裝規(gui)格 | 25T/盒(he) | 50T/盒(he) |
反(fan)應(ying)液 | 500μL×1 管 | 500μL×2 管 |
酶(mei)液 | 25μL×1 管 | 50μL×1 管 |
陽(yang)性質(zhi)控品 | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
陰(yin)性質(zhi)控品 | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
說(shuo)明:不(bu)同批號(hao)的(de)試劑盒(he)組分不可交(jiao)互(hu)使用
【儲存(cun)條件及(ji)有效(xiao)期(qi)】
-20℃±5℃,避光(guang)保(bao)存(cun)、運(yun)輸(shu)、反(fan)復(fu)凍融(rong)次(ci)數(shu)不(bu)超(chao)過(guo) 5 次(ci),有(you)效(xiao)期(qi) 12 個月(yue)。
【適(shi)用儀(yi)器(qi)】 ABI7500、安捷倫(lun) MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系(xi)列熒光定量PCR 檢測儀(yi)。
【使用方法(fa)】
1.樣(yang)品處(chu)理(樣本處(chu)理區)
核(he)酸(suan)提取(qu) 推(tui)薦(jian)采(cai)用核酸(suan)提取(qu)或(huo)純(chun)化(hua)試劑(磁珠法(fa)或(huo)離(li)心(xin)柱(zhu)法(fa))進(jin)行核(he)酸提取(qu), 請(qing)按照試劑說明書(shu)進(jin)行操作。
2.試劑配(pei)制(zhi)(試劑準備區)根(gen)據待檢測樣(yang)本總數(shu),設(she)所(suo)需(xu)要的(de)PCR 反(fan)應(ying)管管數(shu)為(wei) N(N=樣(yang)本(ben)數(shu)+1 管陰(yin)性對(dui)照+1 管陽(yang)性對(dui)照;反(fan)應(ying)管數(shu)每(mei)滿(man)10 份(fen),多配(pei)制(zhi)1 份(fen)),每(mei)測(ce)試反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)配(pei)制(zhi)如(ru)下(xia)表(biao):
試劑 | 反(fan)應(ying)液 | 酶(mei)液 |
用量(樣(yang)本(ben)數為(wei) N) | 19μL | 1μL |
將(jiang)混(hun)合好(hao)的(de)測試反(fan)應(ying)液分(fen)裝(zhuang)到 PCR 反(fan)應(ying)管中(zhong),20μL/管。
3.加(jia)樣(yang)(樣(yang)本(ben)處(chu)理區)將(jiang)步驟(zhou) 1 提取(qu)的(de)核酸(suan)、陽(yang)性質(zhi)控品、陰(yin)性質(zhi)控品各(ge)取(qu)5μL,分(fen)別(bie)加入(ru)相應(ying)的(de)反(fan)應(ying)管中(zhong),蓋(gai)好(hao)管蓋(gai),混(hun)勻,短(duan)暫(zan)離心(xin)。
4.PCR 擴增(核(he)酸擴增區)
2.1 將(jiang)待檢測反(fan)應(ying)管置(zhi)於熒光(guang)定量 PCR 儀(yi)反(fan)應(ying)槽內;
2.2 設(she)置(zhi)好(hao)通(tong)道、樣(yang)品信息(xi),反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)設置為(wei) 25μL;熒(ying)光(guang)通(tong)道選擇(ze):檢測通(tong)道(Reporter Dye)FAM,淬(cui)滅通(tong)道(Quencher Dye)NONE,ABI 系(xi)列儀(yi)器(qi)請勿選擇(ze) ROX 參(can)比熒光(guang),選擇(ze) None 即可(ke)。
2.3 推(tui)薦(jian)循環參(can)數設置(zhi):
步驟(zhou) | 循環數 | 溫度 | 時(shi)間(jian) | 收集熒光信號(hao) |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否 |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否 |
60℃ | 30sec | 是 |
5.結(jie)果(guo)分析判定
5.1結(jie)果(guo)分析條件設(she)定(請(qing)參(can)照各(ge)儀(yi)器(qi)使用說明書(shu)進(jin)行設(she)置,以(yi)分(fen)析 ABI7500 儀(yi)器(qi)為(wei)例(li)) 反(fan)應(ying)結(jie)束(shu)後(hou)自動(dong)保存結(jie)果(guo),根(gen)據分(fen)析後(hou)圖(tu)像(xiang)調(tiao)節 Baseline 的(de) Start 值(zhi)、End 值(zhi)以(yi)及(ji) Threshold 值(zhi)(用戶可根(gen) 據實(shi)際(ji)情(qing)況(kuang)自(zi)行(xing)調(tiao)整(zheng),Start 值(zhi)可(ke)設(she)在(zai) 3~15、End 值(zhi)可(ke)設(she)在(zai) 5~20,使閾值線(xian)位(wei)於擴增曲(qu)線指(zhi)數期(qi),陰(yin)性質(zhi)控 品的(de)擴增曲(qu)線平直(zhi)或(huo)低(di)於閾值(zhi)線(xian)),點擊 Analyze 自(zi)動(dong)獲(huo)得分析結(jie)果(guo)。
5.2結(jie)果(guo)判斷(duan)
陽(yang)性:檢測通(tong)道Ct 值(zhi)≤40,且(qie)曲(qu)線有(you)明顯的(de)指(zhi)數增長(chang)曲(qu)線;
陰(yin)性:樣(yang)本(ben)檢測結(jie)果(guo)無Ct 值(zhi),且(qie)無特(te)異性擴增曲(qu)線;
可(ke)疑:樣(yang)本檢測結(jie)果(guo)40<Ct 值(zhi)≤45,建(jian)議(yi)重復(fu)檢測,如(ru)果(guo)檢測通(tong)道仍(reng)為(wei)40值(zhi)≤45,且(qie)曲(qu)線有(you)明顯的(de)增長(chang) 曲(qu)線,判定為(wei)陽(yang)性,否則為(wei)陰(yin)性。
5.3 質(zhi)控標準 陰(yin)性質(zhi)控品:無特(te)異性擴增曲(qu)線或(huo)無Ct 值(zhi)顯示(shi);陽(yang)性質(zhi)控品:擴增曲(qu)線有(you)明顯指(zhi)數增長(chang)期(qi),且(qie) Ct 值(zhi)≤32;以(yi)上條件應(ying)同時(shi)滿(man)足,否則實(shi)驗(yan)視(shi)為(wei)無效(xiao)。
3. 檢測方(fang)法的(de)局限(xian)性
1. 樣(yang)本(ben)檢測結(jie)果(guo)與樣本收集、處(chu)理、運(yun)送以及(ji)保存(cun)質(zhi)量有關(guan);
2. 樣(yang)本(ben)提取(qu)過(guo)程(cheng)中沒有控(kong)制(zhi)好(hao)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran),會(hui)出現假陽(yang)性結(jie)果(guo);
3. 陽(yang)性對(dui)照、擴增產(chan)物泄漏(lou),會(hui)導致假陽(yang)性結(jie)果(guo);
4. 病(bing)原(yuan)體(ti)在(zai)流(liu)行過(guo)程(cheng)中基(ji)因突變(bian)、重組,會(hui)導致假陰(yin)性結(jie)果(guo);
5. 不(bu)同的(de)提取(qu)方法(fa)存(cun)在(zai)提取(qu)效(xiao)率(lv)差異(yi),會(hui)導致假陰(yin)性結(jie)果(guo);
6. 試劑運(yun)輸(shu),保存(cun)不(bu)當(dang)或(huo)試劑配(pei)制(zhi)不準確(que)引起的(de)試劑檢測效(xiao)能(neng)下降(jiang),出(chu)現假陰(yin)性或(huo)定量檢測不(bu)準確(que)的(de)結(jie)果(guo);
7. 本(ben)檢測結(jie)果(guo)僅供參(can)考,如(ru)須(xu)確(que)診請結(jie)合臨(lin)床癥(zheng)狀以(yi)及(ji)其(qi)他(ta)檢測手(shou)段。
【***病(bing)毒H7亞型 (AIV-H7)PCR檢測試劑盒(he)註(zhu)意(yi)事項】
1.所(suo)有操作嚴格按照說(shuo)明書(shu)進(jin)行;
2.試劑盒(he)內(nei)各(ge)種(zhong)組分使用前(qian)應(ying)自然融(rong)化(hua),完quan混(hun)勻(yun)並(bing)短(duan)暫(zan)離心(xin);
3.反(fan)應(ying)液應(ying)避光(guang)保(bao)存(cun);
4.反(fan)應(ying)中盡(jin)量(liang)避免氣泡存在(zai),管蓋(gai)需(xu)蓋(gai)緊(jin);
5.使用壹次(ci)性吸(xi)頭(tou)、壹次(ci)性手(shou)套和(he)各(ge)區專用工作(zuo)服;
6.樣(yang)本(ben)處(chu)理、試劑配(pei)制(zhi)、加樣需(xu)在(zai)不(bu)同區進(jin)行,以(yi)免交叉(cha)汙染(ran);
7.實(shi)驗(yan)完畢(bi)後(hou)用 10%次(ci)氯(lv)酸(suan)或(huo) 75%酒(jiu)精或(huo)紫(zi)外燈處(chu)理工作臺(tai)和(he)移(yi)液器(qi);
8.試劑盒(he)裏(li)所(suo)有物(wu)品應(ying)視(shi)為(wei)汙染(ran)物(wu)對(dui)待,並按照《微生物生物醫學實(shi)驗(yan)室(shi)生物安全(quan)通(tong)則》進(jin)行處(chu)理。
我司的(de)實(shi)時(shi)熒(ying)光(guang)探(tan)針(zhen)法(fa)試劑盒(he)種(zhong)類齊(qi)全(quan)(涵(han)蓋(gai)禽(qin)病(bing)、豬(zhu)病(bing)、馬牛羊病(bing)和水產(chan)動(dong)物病(bing)原(yuan)體(ti)檢測),精(jing)準高(gao)效(xiao),多(duo)重檢測(壹(yi)重、雙(shuang)重、三重),現貨(huo)供應(ying)歡迎(ying)廣(guang)大新(xin)老客戶前(qian)來選購(gou)。
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