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PCR試(shi)劑盒
禽類(lei)PCR試劑(ji)盒
50T禽流感(gan)病毒(du)H7亞型(AIV-H7)PCR檢測試劑盒
產(chan)品(pin)簡介(jie)
禽流感(gan)病毒(du)H7亞型(AIV-H7)PCR檢測試劑盒是(shi)我司(si)實時(shi)熒(ying)光(guang)探(tan)針法(fa)試(shi)劑(ji)盒,種(zhong)類(lei)齊(qi)全(quan),精(jing)準(zhun)高(gao)效,現(xian)貨(huo)供(gong)應,歡(huan)迎(ying)廣大新(xin)老(lao)客戶(hu)前來選購。
產(chan)品(pin)分(fen)類(lei)
【產(chan)品(pin)名(ming)稱】
商品(pin)名(ming)稱:禽流感(gan)病毒(du)H7亞(ya)型(AIV-H7)PCR檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(熒(ying)光(guang)PCR 法)
【包(bao)裝(zhuang)規格】25T/盒、50T/盒
【檢(jian)驗(yan)原(yuan)理(li)】本試劑盒采(cai)用(yong)TaqMan 探(tan)針法(fa)實(shi)時(shi)熒(ying)光(guang)PCR 技術,根(gen)據(ju)禽流感(gan)病毒(du)H7亞(ya)型(AIV-H7)基因設計(ji)特異(yi)性引物(wu)和熒(ying)光(guang)探(tan)針,用(yong)熒(ying)光(guang)PCR技術對禽流感(gan)病毒(du)H7亞(ya)型(AIV-H7)的(de)核(he)酸進行(xing)體外擴(kuo)增(zeng)檢測,用於臨(lin)床(chuang)上對可(ke)疑(yi)感(gan)染病料(liao)的病原學(xue)診斷。
【試劑(ji)組(zu)成】
包裝(zhuang)規格 | 25T/盒 | 50T/盒 |
反(fan)應液 | 500μL×1 管 | 500μL×2 管 |
酶(mei)液(ye) | 25μL×1 管 | 50μL×1 管 |
陽(yang)性質控(kong)品(pin) | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
陰性質控(kong)品(pin) | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
說(shuo)明(ming):不(bu)同批號的(de)試劑(ji)盒組(zu)分(fen)不(bu)可(ke)交互使(shi)用(yong)
【儲存(cun)條(tiao)件及有效期】
-20℃±5℃,避(bi)光(guang)保存(cun)、運(yun)輸(shu)、反(fan)復(fu)凍融(rong)次數(shu)不(bu)超過(guo) 5 次,有(you)效期 12 個(ge)月。
【適(shi)用(yong)儀器】 ABI7500、安(an)捷(jie)倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系(xi)列(lie)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR 檢(jian)測儀。
【使(shi)用(yong)方(fang)法(fa)】
1.樣(yang)品(pin)處(chu)理(樣(yang)本(ben)處理區)
核(he)酸提取(qu) 推薦(jian)采(cai)用(yong)核(he)酸提取(qu)或純化(hua)試劑(磁(ci)珠法(fa)或(huo)離(li)心柱法)進(jin)行核(he)酸提取(qu), 請按照(zhao)試(shi)劑(ji)說(shuo)明(ming)書(shu)進(jin)行(xing)操(cao)作。
2.試(shi)劑(ji)配制(zhi)(試(shi)劑準(zhun)備(bei)區(qu))根據(ju)待(dai)檢(jian)測樣(yang)本(ben)總數(shu),設所(suo)需(xu)要(yao)的PCR 反(fan)應管管數(shu)為 N(N=樣(yang)本(ben)數(shu)+1 管陰性對照(zhao)+1 管陽(yang)性對照(zhao);反(fan)應管數(shu)每滿10 份,多配制(zhi)1 份),每測試反(fan)應體系(xi)配制(zhi)如(ru)下(xia)表:
試劑(ji) | 反(fan)應液 | 酶(mei)液(ye) |
用(yong)量(liang)(樣(yang)本(ben)數(shu)為 N) | 19μL | 1μL |
將(jiang)混合好的測試反(fan)應液分(fen)裝(zhuang)到(dao) PCR 反(fan)應管中,20μL/管。
3.加樣(yang)(樣(yang)本(ben)處理區)將(jiang)步驟(zhou) 1 提取(qu)的核(he)酸、陽(yang)性質控(kong)品(pin)、陰性質控(kong)品(pin)各(ge)取5μL,分(fen)別(bie)加(jia)入相(xiang)應的反(fan)應管中,蓋好(hao)管蓋,混(hun)勻,短(duan)暫(zan)離心。
4.PCR 擴增(核(he)酸擴增(zeng)區)
2.1 將(jiang)待(dai)檢測反(fan)應管置於熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang) PCR 儀反(fan)應槽內(nei);
2.2 設置好通(tong)道(dao)、樣(yang)品(pin)信息(xi),反(fan)應體系(xi)設置為 25μL;熒(ying)光(guang)通(tong)道(dao)選(xuan)擇:檢(jian)測通(tong)道(dao)(Reporter Dye)FAM,淬滅(mie)通(tong)道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系(xi)列(lie)儀器請勿(wu)選(xuan)擇 ROX 參(can)比(bi)熒(ying)光(guang),選(xuan)擇 None 即(ji)可(ke)。
2.3 推薦(jian)循(xun)環(huan)參(can)數(shu)設置:
步(bu)驟(zhou) | 循環(huan)數(shu) | 溫(wen)度 | 時(shi)間 | 收集(ji)熒(ying)光(guang)信號 |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否 |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否 |
60℃ | 30sec | 是 |
5.結果分(fen)析(xi)判(pan)定(ding)
5.1結果分(fen)析(xi)條(tiao)件設定(ding)(請參(can)照各(ge)儀器使(shi)用(yong)說(shuo)明(ming)書(shu)進(jin)行(xing)設置,以分(fen)析(xi) ABI7500 儀器為例) 反(fan)應結束後(hou)自(zi)動(dong)保存(cun)結果,根(gen)據(ju)分(fen)析(xi)後(hou)圖像調(tiao)節 Baseline 的(de) Start 值(zhi)、End 值以(yi)及 Threshold 值(用(yong)戶(hu)可(ke)根 據(ju)實(shi)際情況(kuang)自(zi)行調(tiao)整,Start 值(zhi)可(ke)設在 3~15、End 值可(ke)設在 5~20,使(shi)閾值線(xian)位於擴增曲線指數(shu)期,陰性質控(kong) 品(pin)的(de)擴增曲線平(ping)直或(huo)低(di)於閾值線(xian)),點擊(ji) Analyze 自(zi)動(dong)獲(huo)得分(fen)析(xi)結果。
5.2結果判(pan)斷
陽(yang)性:檢測通(tong)道(dao)Ct 值(zhi)≤40,且(qie)曲線有(you)明顯(xian)的(de)指數(shu)增長曲線;
陰性:樣(yang)本(ben)檢測結果無(wu)Ct 值,且(qie)無特異(yi)性擴增曲線;
可(ke)疑(yi):樣(yang)本(ben)檢測結果40<Ct 值(zhi)≤45,建議(yi)重(zhong)復(fu)檢(jian)測,如果檢(jian)測通(tong)道(dao)仍(reng)為40值≤45,且(qie)曲線有(you)明顯(xian)的(de)增(zeng)長 曲線,判(pan)定(ding)為陽(yang)性,否則(ze)為陰性。
5.3 質控(kong)標(biao)準(zhun) 陰性質控(kong)品(pin):無(wu)特異(yi)性擴增曲線或(huo)無Ct 值顯(xian)示;陽(yang)性質控(kong)品(pin):擴(kuo)增曲線有(you)明顯(xian)指數(shu)增長期,且(qie) Ct 值(zhi)≤32;以上條(tiao)件應同時(shi)滿足(zu),否則(ze)實驗(yan)視(shi)為無效。
3. 檢(jian)測方(fang)法(fa)的(de)局(ju)限(xian)性
1. 樣(yang)本(ben)檢測結果與(yu)樣(yang)本(ben)收集(ji)、處(chu)理(li)、運(yun)送(song)以及保存(cun)質量(liang)有關;
2. 樣(yang)本(ben)提取(qu)過(guo)程(cheng)中沒有控(kong)制好交叉(cha)汙染,會出現(xian)假陽(yang)性結果;
3. 陽(yang)性對照(zhao)、擴(kuo)增產(chan)物(wu)泄(xie)漏(lou),會導(dao)致(zhi)假陽(yang)性結果;
4. 病原體(ti)在流行(xing)過(guo)程(cheng)中基因突變、重(zhong)組(zu),會(hui)導(dao)致(zhi)假陰性結果;
5. 不(bu)同的提取(qu)方(fang)法(fa)存(cun)在提取(qu)效率差(cha)異(yi),會(hui)導(dao)致(zhi)假陰性結果;
6. 試劑運(yun)輸(shu),保存(cun)不(bu)當或試劑(ji)配制(zhi)不(bu)準(zhun)確(que)引(yin)起(qi)的(de)試劑(ji)檢測效能下(xia)降(jiang),出現(xian)假陰性或定量(liang)檢測不(bu)準(zhun)確(que)的(de)結果;
7. 本檢測結果僅供(gong)參(can)考,如(ru)須(xu)確診(zhen)請結合臨(lin)床(chuang)癥(zheng)狀(zhuang)以(yi)及其(qi)他(ta)檢(jian)測手(shou)段(duan)。
【 禽流感(gan)病毒(du)H7亞(ya)型(AIV-H7)PCR檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒註意事(shi)項】
1.所有操(cao)作嚴(yan)格按照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)進(jin)行(xing);
2.試劑(ji)盒內(nei)各(ge)種組(zu)分(fen)使(shi)用(yong)前應自(zi)然融(rong)化(hua),完quan混勻並(bing)短(duan)暫(zan)離心;
3.反(fan)應液應避(bi)光(guang)保存(cun);
4.反(fan)應中盡量(liang)避(bi)免(mian)氣(qi)泡(pao)存(cun)在,管蓋需(xu)蓋(gai)緊;
5.使(shi)用(yong)壹次性吸頭、壹次性手(shou)套(tao)和各(ge)區專用工(gong)作服;
6.樣(yang)本(ben)處理、試劑(ji)配制(zhi)、加(jia)樣(yang)需(xu)在不(bu)同區進(jin)行(xing),以(yi)免(mian)交叉(cha)汙染;
7.實(shi)驗(yan)完(wan)畢(bi)後(hou)用 10%次氯(lv)酸或 75%酒(jiu)精(jing)或紫(zi)外燈處理(li)工(gong)作臺(tai)和移液器;
8.試劑(ji)盒裏(li)所有(you)物(wu)品(pin)應視為汙染物(wu)對待(dai),並(bing)按照(zhao)《微生物(wu)生物(wu)醫(yi)學(xue)實驗(yan)室(shi)生物(wu)安(an)全通(tong)則(ze)》進行(xing)處(chu)理(li)。
我司(si)的實(shi)時熒(ying)光(guang)探(tan)針法(fa)試(shi)劑(ji)盒種(zhong)類(lei)齊(qi)全(quan)(涵蓋禽病、豬病、馬牛羊病和水(shui)產動(dong)物(wu)病原體(ti)檢測),精(jing)準(zhun)高(gao)效,多重(zhong)檢(jian)測(壹重(zhong)、雙(shuang)重(zhong)、三(san)重(zhong)),現(xian)貨(huo)供(gong)應歡(huan)迎(ying)廣大新(xin)老(lao)客戶(hu)前來選購。
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