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PCR試劑盒(he)
禽類PCR試劑盒(he)
50T禽流感病(bing)毒H5亞(ya)型(xing)(AIV-H5)PCR檢(jian)測(ce)試劑盒(he)
產品(pin)簡介(jie)
禽流感病(bing)毒H5亞(ya)型(xing)(AIV-H5)PCR檢(jian)測(ce)試劑盒(he)是(shi)我司(si)實(shi)時(shi)熒光(guang)探針法(fa)試劑盒(he),種(zhong)類齊全(quan),精(jing)準(zhun)高(gao)效(xiao),現(xian)貨供應(ying),歡迎(ying)廣(guang)大(da)新(xin)老(lao)客(ke)戶(hu)前(qian)來(lai)選購。
產品(pin)分類
相(xiang)關文章(zhang)
【產品(pin)名(ming)稱】
商品(pin)名稱:禽流感病(bing)毒H5亞型(xing)(AIV-H5)PCR檢測(ce)試劑盒(he)(熒光(guang)PCR 法(fa))
【包(bao)裝規格(ge)】25T/盒(he)、50T/盒(he)
【檢驗(yan)原(yuan)理(li)】本試劑盒(he)采(cai)用TaqMan 探針法(fa)實(shi)時(shi)熒光(guang)PCR 技術,根據禽流感病(bing)毒H5亞型(xing)(AIV-H5)基因設(she)計(ji)特(te)異(yi)性(xing)引物和(he)熒光(guang)探針,用熒光(guang)PCR技術對禽流感病(bing)毒H5亞型(xing)(AIV-H5)的(de)核酸進行體(ti)外擴(kuo)增(zeng)檢測(ce),用(yong)於(yu)臨床(chuang)上對(dui)可疑感染病料(liao)的(de)病(bing)原(yuan)學(xue)診斷。
【試劑組成】
包(bao)裝規格(ge) | 25T/盒(he) | 50T/盒(he) |
反應(ying)液 | 500μL×1 管 | 500μL×2 管 |
酶液 | 25μL×1 管 | 50μL×1 管 |
陽性(xing)質(zhi)控品 | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
陰性(xing)質(zhi)控品 | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
說(shuo)明(ming):不同(tong)批號(hao)的(de)試劑盒(he)組(zu)分不可交互(hu)使(shi)用
【儲存(cun)條(tiao)件及(ji)有(you)效期】
-20℃±5℃,避光(guang)保(bao)存、運輸、反復(fu)凍(dong)融(rong)次數不超過 5 次,有效期 12 個月(yue)。
【適(shi)用(yong)儀器】 ABI7500、安捷(jie)倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系(xi)列熒光(guang)定量(liang)PCR 檢測(ce)儀。
【使用(yong)方法(fa)】
1.樣(yang)品(pin)處理(樣(yang)本(ben)處理區)
核酸提取(qu) 推薦(jian)采(cai)用核酸提取(qu)或(huo)純化試劑(磁珠法(fa)或(huo)離心柱(zhu)法(fa))進行核酸提取(qu), 請按(an)照(zhao)試劑說(shuo)明(ming)書進行操作(zuo)。
2.試劑配(pei)制(試劑準(zhun)備區)根據待(dai)檢測(ce)樣(yang)本(ben)總(zong)數,設(she)所(suo)需(xu)要(yao)的(de)PCR 反應(ying)管管(guan)數為(wei) N(N=樣(yang)本(ben)數+1 管陰性(xing)對照(zhao)+1 管陽(yang)性(xing)對照(zhao);反應(ying)管數每滿10 份,多(duo)配(pei)制1 份),每測(ce)試反(fan)應(ying)體(ti)系配(pei)制如(ru)下(xia)表(biao):
試劑 | 反應(ying)液 | 酶液 |
用量(liang)(樣(yang)本(ben)數為(wei) N) | 19μL | 1μL |
將混(hun)合好(hao)的(de)測(ce)試反(fan)應(ying)液分裝到(dao) PCR 反應(ying)管中,20μL/管。
3.加樣(yang)(樣(yang)本(ben)處理區)將步(bu)驟 1 提取(qu)的(de)核酸、陽(yang)性(xing)質(zhi)控品、陰性(xing)質(zhi)控品各取(qu)5μL,分別加(jia)入相(xiang)應的(de)反(fan)應(ying)管中,蓋(gai)好(hao)管蓋(gai),混(hun)勻(yun),短暫離心。
4.PCR 擴(kuo)增(zeng)(核酸擴(kuo)增(zeng)區)
2.1 將待(dai)檢測(ce)反(fan)應(ying)管置於(yu)熒光(guang)定量(liang) PCR 儀反應(ying)槽內(nei);
2.2 設(she)置(zhi)好(hao)通道(dao)、樣(yang)品(pin)信(xin)息(xi),反應(ying)體(ti)系設(she)置(zhi)為(wei) 25μL;熒光(guang)通道(dao)選擇:檢測(ce)通道(dao)(Reporter Dye)FAM,淬滅通道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系列(lie)儀器請勿選(xuan)擇 ROX 參比(bi)熒光(guang),選擇 None 即可。
2.3 推薦(jian)循環參(can)數設(she)置(zhi):
步(bu)驟 | 循環數 | 溫度(du) | 時(shi)間(jian) | 收集(ji)熒光(guang)信(xin)號 |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否 |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否 |
60℃ | 30sec | 是 |
5.結果(guo)分析判(pan)定
5.1結果(guo)分析條(tiao)件設(she)定(ding)(請參照(zhao)各儀器使(shi)用說(shuo)明(ming)書進行設(she)置(zhi),以(yi)分析 ABI7500 儀器為(wei)例) 反應(ying)結束(shu)後(hou)自動保(bao)存結果(guo),根(gen)據分析後(hou)圖像(xiang)調(tiao)節 Baseline 的(de) Start 值(zhi)、End 值(zhi)以及(ji) Threshold 值(zhi)(用戶(hu)可根 據實(shi)際情(qing)況自行調(tiao)整(zheng),Start 值(zhi)可設(she)在(zai) 3~15、End 值(zhi)可設(she)在(zai) 5~20,使閾(yu)值(zhi)線位於(yu)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線指(zhi)數期,陰性(xing)質(zhi)控 品的(de)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線平(ping)直(zhi)或(huo)低於閾(yu)值(zhi)線),點(dian)擊 Analyze 自動獲得分析結(jie)果(guo)。
5.2結果(guo)判(pan)斷(duan)
陽性(xing):檢測(ce)通道(dao)Ct 值(zhi)≤40,且(qie)曲(qu)線有(you)明(ming)顯的(de)指(zhi)數增(zeng)長(chang)曲(qu)線;
陰性(xing):樣(yang)本(ben)檢(jian)測(ce)結果(guo)無(wu)Ct 值(zhi),且(qie)無(wu)特(te)異(yi)性(xing)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線;
可疑:樣(yang)本(ben)檢(jian)測(ce)結果(guo)40<Ct 值(zhi)≤45,建議重復(fu)檢(jian)測(ce),如(ru)果(guo)檢(jian)測(ce)通道(dao)仍(reng)為(wei)40值(zhi)≤45,且(qie)曲(qu)線有(you)明(ming)顯的(de)增(zeng)長(chang) 曲(qu)線,判(pan)定(ding)為(wei)陽性(xing),否則(ze)為(wei)陰性(xing)。
5.3 質(zhi)控標準(zhun) 陰性(xing)質(zhi)控品:無特(te)異(yi)性(xing)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線或(huo)無Ct 值(zhi)顯示(shi);陽(yang)性(xing)質(zhi)控品:擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線有(you)明(ming)顯指(zhi)數增(zeng)長(chang)期,且(qie) Ct 值(zhi)≤32;以上(shang)條(tiao)件應同時(shi)滿(man)足,否則(ze)實(shi)驗(yan)視(shi)為(wei)無效(xiao)。
3. 檢測(ce)方法(fa)的(de)局(ju)限(xian)性(xing)
1. 樣(yang)本(ben)檢(jian)測(ce)結果(guo)與(yu)樣(yang)本(ben)收集(ji)、處理、運送(song)以(yi)及(ji)保(bao)存質(zhi)量(liang)有(you)關;
2. 樣(yang)本(ben)提取(qu)過程中沒有(you)控制好(hao)交叉(cha)汙(wu)染,會(hui)出現(xian)假(jia)陽性(xing)結果(guo);
3. 陽性(xing)對照(zhao)、擴(kuo)增(zeng)產物泄(xie)漏(lou),會導(dao)致假(jia)陽(yang)性(xing)結果(guo);
4. 病原(yuan)體(ti)在流行過程中基因突(tu)變、重組,會(hui)導(dao)致假(jia)陰性(xing)結果(guo);
5. 不同(tong)的(de)提取(qu)方(fang)法(fa)存在(zai)提取(qu)效(xiao)率差異(yi),會導(dao)致假(jia)陰性(xing)結果(guo);
6. 試劑運輸,保(bao)存不當(dang)或(huo)試劑配(pei)制不(bu)準(zhun)確引起(qi)的(de)試劑檢測效能(neng)下(xia)降(jiang),出(chu)現(xian)假(jia)陰性(xing)或(huo)定量(liang)檢(jian)測不(bu)準(zhun)確的(de)結(jie)果(guo);
7. 本檢(jian)測結(jie)果(guo)僅(jin)供(gong)參(can)考(kao),如(ru)須(xu)確診請結合(he)臨床(chuang)癥(zheng)狀以及(ji)其(qi)他(ta)檢測(ce)手(shou)段(duan)。
【禽流感病(bing)毒H5亞型(xing)(AIV-H5)PCR檢測(ce)試劑盒(he)註意(yi)事項(xiang)】
1.所有(you)操作(zuo)嚴格(ge)按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書進行;
2.試劑盒(he)內(nei)各種(zhong)組(zu)分使用(yong)前應(ying)自然(ran)融(rong)化,完quan混(hun)勻(yun)並短暫(zan)離心;
3.反應(ying)液應(ying)避光保(bao)存;
4.反應(ying)中盡量(liang)避(bi)免氣(qi)泡(pao)存(cun)在(zai),管蓋(gai)需蓋(gai)緊;
5.使用(yong)壹次性(xing)吸頭、壹次性(xing)手(shou)套和(he)各區專用工作(zuo)服;
6.樣(yang)本(ben)處理、試劑配(pei)制、加(jia)樣(yang)需(xu)在(zai)不(bu)同區進行,以(yi)免交叉(cha)汙(wu)染;
7.實(shi)驗(yan)完畢(bi)後用(yong) 10%次氯(lv)酸或(huo) 75%酒精(jing)或(huo)紫(zi)外燈(deng)處理工(gong)作(zuo)臺和(he)移液(ye)器(qi);
8.試劑盒(he)裏(li)所有(you)物品(pin)應(ying)視為(wei)汙染(ran)物對(dui)待(dai),並按(an)照(zhao)《微生(sheng)物生(sheng)物醫(yi)學實(shi)驗(yan)室(shi)生(sheng)物安(an)全(quan)通則(ze)》進行處理。
我司(si)的(de)實(shi)時(shi)熒光(guang)探針法(fa)試劑盒(he)種(zhong)類齊全(quan)(涵(han)蓋(gai)禽病、豬(zhu)病、馬(ma)牛(niu)羊(yang)病(bing)和(he)水(shui)產動(dong)物病(bing)原(yuan)體(ti)檢測(ce)),精準(zhun)高(gao)效(xiao),多重檢測(ce)(壹重、雙重、三(san)重),現(xian)貨供應(ying)歡迎(ying)廣(guang)大(da)新(xin)老(lao)客(ke)戶(hu)前(qian)來(lai)選購。
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