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PCR試(shi)劑(ji)盒
其(qi)他(ta)PCR試(shi)劑(ji)盒
50T甲(jia)型(xing)流(liu)感病(bing)毒H1亞(ya)型(xing)(IAV-H1)PCR檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒
產(chan)品(pin)簡(jian)介(jie)
甲(jia)型(xing)流(liu)感病(bing)毒H1亞(ya)型(xing)(IAV-H1)PCR檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒是我司(si)實(shi)時熒(ying)光(guang)探針(zhen)法試(shi)劑(ji)盒,種(zhong)類齊(qi)全,精準(zhun)高(gao)效,現貨供應(ying),歡(huan)迎(ying)廣大新老(lao)客(ke)戶前(qian)來選(xuan)購(gou)。
【產(chan)品名(ming)稱(cheng)】
商品名(ming)稱(cheng):甲(jia)型(xing)流(liu)感病(bing)毒H1亞型(xing)(IAV-H1)PCR檢測試(shi)劑(ji)盒(熒(ying)光(guang)PCR 法)
【包裝規(gui)格】25T/盒、50T/盒
【檢(jian)驗(yan)原(yuan)理(li)】本(ben)試(shi)劑(ji)盒采(cai)用TaqMan 探針(zhen)法實(shi)時熒(ying)光(guang)PCR 技(ji)術(shu),根(gen)據(ju)甲型流(liu)感病(bing)毒H1亞型(xing)(IAV-H1)基(ji)因(yin)設計特(te)異性引物和(he)熒(ying)光(guang)探針(zhen),用熒(ying)光(guang)PCR技(ji)術(shu)對(dui)甲型流(liu)感病(bing)毒H1亞型(xing)(IAV-H1)的核酸進行(xing)體外(wai)擴增(zeng)檢測(ce),用於(yu)臨床上(shang)對(dui)可疑(yi)感染(ran)病(bing)料的病(bing)原(yuan)學(xue)診斷(duan)。
【試(shi)劑(ji)組(zu)成(cheng)】
包裝規(gui)格 | 25T/盒 | 50T/盒 |
反(fan)應(ying)液 | 500μL×1 管 | 500μL×2 管 |
酶液 | 25μL×1 管 | 50μL×1 管 |
陽性質(zhi)控品(pin) | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管(guan) |
陰性(xing)質(zhi)控品(pin) | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管(guan) |
說(shuo)明:不同(tong)批號(hao)的試(shi)劑(ji)盒組(zu)分不可(ke)交(jiao)互(hu)使用
【儲(chu)存(cun)條(tiao)件及(ji)有效(xiao)期】
-20℃±5℃,避光(guang)保存(cun)、運(yun)輸、反(fan)復(fu)凍融次數不超(chao)過(guo) 5 次,有效(xiao)期 12 個(ge)月(yue)。
【適用儀器(qi)】 ABI7500、安(an)捷倫(lun) MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系(xi)列熒(ying)光(guang)定量(liang)PCR 檢(jian)測(ce)儀。
【使用方(fang)法】
1.樣品(pin)處(chu)理(li)(樣本(ben)處(chu)理(li)區(qu))
核(he)酸提取(qu) 推薦采(cai)用核(he)酸提取(qu)或(huo)純(chun)化試(shi)劑(ji)(磁(ci)珠法或離(li)心柱(zhu)法)進行(xing)核(he)酸提取(qu), 請按照試(shi)劑(ji)說(shuo)明書(shu)進(jin)行操作(zuo)。
2.試(shi)劑(ji)配(pei)制(試(shi)劑(ji)準(zhun)備區)根(gen)據(ju)待(dai)檢(jian)測(ce)樣本(ben)總數,設所(suo)需要的PCR 反應(ying)管管(guan)數為(wei) N(N=樣本(ben)數+1 管(guan)陰性(xing)對(dui)照+1 管陽性對(dui)照;反應(ying)管數(shu)每滿(man)10 份(fen),多配(pei)制1 份(fen)),每測(ce)試(shi)反(fan)應(ying)體系(xi)配制(zhi)如下(xia)表(biao):
試(shi)劑(ji) | 反應(ying)液 | 酶液 |
用量(liang)(樣本(ben)數為(wei) N) | 19μL | 1μL |
將混合(he)好的測試(shi)反(fan)應(ying)液分裝到(dao) PCR 反應(ying)管中,20μL/管。
3.加樣(樣本(ben)處(chu)理(li)區(qu))將步驟 1 提取(qu)的核酸、陽性質(zhi)控品(pin)、陰性質(zhi)控品(pin)各(ge)取(qu)5μL,分(fen)別(bie)加(jia)入相應(ying)的反應(ying)管中,蓋好管蓋,混勻,短暫(zan)離(li)心。
4.PCR 擴增(zeng)(核酸擴增(zeng)區)
2.1 將待(dai)檢(jian)測(ce)反(fan)應(ying)管置(zhi)於(yu)熒(ying)光(guang)定量(liang) PCR 儀反應(ying)槽內(nei);
2.2 設置(zhi)好通道(dao)、樣品(pin)信(xin)息,反(fan)應(ying)體系(xi)設置(zhi)為(wei) 25μL;熒(ying)光(guang)通道(dao)選(xuan)擇(ze):檢測(ce)通(tong)道(dao)(Reporter Dye)FAM,淬滅(mie)通(tong)道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系(xi)列儀器(qi)請勿選(xuan)擇(ze) ROX 參比熒(ying)光(guang),選(xuan)擇(ze) None 即可。
2.3 推薦循(xun)環(huan)參數設置(zhi):
步驟 | 循(xun)環(huan)數(shu) | 溫度 | 時間 | 收(shou)集熒(ying)光(guang)信(xin)號 |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否(fou) |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否(fou) |
60℃ | 30sec | 是 |
5.結果(guo)分(fen)析判(pan)定
5.1結果(guo)分(fen)析條(tiao)件設定(請參照各(ge)儀器(qi)使(shi)用說(shuo)明書(shu)進(jin)行設置(zhi),以分(fen)析 ABI7500 儀器(qi)為(wei)例(li)) 反應(ying)結束(shu)後(hou)自(zi)動(dong)保存(cun)結果(guo),根(gen)據(ju)分(fen)析後圖(tu)像調(tiao)節 Baseline 的 Start 值、End 值以及(ji) Threshold 值(用戶(hu)可根(gen) 據(ju)實(shi)際(ji)情(qing)況(kuang)自(zi)行(xing)調(tiao)整,Start 值(zhi)可(ke)設在 3~15、End 值(zhi)可設在 5~20,使閾(yu)值(zhi)線位(wei)於擴增(zeng)曲線(xian)指(zhi)數期,陰性質(zhi)控 品的擴增(zeng)曲線(xian)平(ping)直(zhi)或(huo)低(di)於(yu)閾值線),點(dian)擊(ji) Analyze 自(zi)動(dong)獲得(de)分析結果(guo)。
5.2結果(guo)判(pan)斷(duan)
陽性:檢(jian)測(ce)通道(dao)Ct 值≤40,且(qie)曲線(xian)有(you)明(ming)顯(xian)的指(zhi)數增(zeng)長(chang)曲線(xian);
陰性:樣本(ben)檢測(ce)結果(guo)無Ct 值,且(qie)無特(te)異性擴增(zeng)曲線(xian);
可疑:樣本(ben)檢測(ce)結果(guo)40<Ct 值≤45,建議重復檢(jian)測(ce),如果(guo)檢(jian)測(ce)通道(dao)仍為(wei)40值≤45,且(qie)曲線(xian)有(you)明(ming)顯(xian)的增(zeng)長(chang) 曲線(xian),判(pan)定為(wei)陽性,否(fou)則為(wei)陰(yin)性(xing)。
5.3 質(zhi)控標(biao)準(zhun) 陰性(xing)質(zhi)控品(pin):無特(te)異性擴增(zeng)曲線(xian)或(huo)無Ct 值顯(xian)示(shi);陽性質(zhi)控品(pin):擴增(zeng)曲線(xian)有(you)明(ming)顯(xian)指(zhi)數增(zeng)長(chang)期,且(qie) Ct 值(zhi)≤32;以上(shang)條(tiao)件應(ying)同時(shi)滿足(zu),否(fou)則實(shi)驗(yan)視為(wei)無效(xiao)。
3. 檢(jian)測方(fang)法的局限(xian)性
1. 樣本(ben)檢測(ce)結果(guo)與(yu)樣本(ben)收集、處(chu)理(li)、運(yun)送(song)以及(ji)保存(cun)質(zhi)量(liang)有關(guan);
2. 樣本(ben)提取(qu)過(guo)程(cheng)中沒(mei)有(you)控制(zhi)好交叉(cha)汙染(ran),會(hui)出(chu)現假陽性結果(guo);
3. 陽性對(dui)照、擴增(zeng)產物(wu)泄漏(lou),會(hui)導致假陽性結果(guo);
4. 病(bing)原(yuan)體在流(liu)行過(guo)程(cheng)中基(ji)因(yin)突(tu)變(bian)、重組(zu),會(hui)導致假陰(yin)性結果(guo);
5. 不同(tong)的提取(qu)方(fang)法存(cun)在提(ti)取(qu)效(xiao)率(lv)差(cha)異,會(hui)導致假陰(yin)性結果(guo);
6. 試(shi)劑(ji)運(yun)輸,保存(cun)不當(dang)或(huo)試(shi)劑(ji)配(pei)制不準(zhun)確引(yin)起的試(shi)劑(ji)檢(jian)測效能(neng)下(xia)降(jiang),出(chu)現假陰性或(huo)定量(liang)檢測(ce)不準(zhun)確的結果(guo);
7. 本(ben)檢測(ce)結果(guo)僅(jin)供參考,如須(xu)確診請結合(he)臨床癥(zheng)狀(zhuang)以及(ji)其他(ta)檢測(ce)手(shou)段。
【 甲(jia)型流(liu)感病(bing)毒H1亞型(xing)(IAV-H1)PCR檢測試(shi)劑(ji)盒註(zhu)意事項(xiang)】
1.所(suo)有(you)操作(zuo)嚴(yan)格按(an)照說(shuo)明書(shu)進(jin)行;
2.試(shi)劑(ji)盒內(nei)各(ge)種(zhong)組(zu)分使(shi)用前(qian)應(ying)自(zi)然(ran)融化,完(wan)quan混(hun)勻並(bing)短(duan)暫(zan)離(li)心;
3.反應(ying)液應(ying)避光(guang)保存(cun);
4.反應(ying)中盡量(liang)避免(mian)氣泡(pao)存(cun)在,管(guan)蓋需蓋緊;
5.使(shi)用壹(yi)次性吸(xi)頭、壹(yi)次性手(shou)套和各(ge)區(qu)專(zhuan)用工(gong)作(zuo)服(fu);
6.樣本(ben)處(chu)理(li)、試(shi)劑(ji)配(pei)制、加樣需在不同(tong)區(qu)進行(xing),以免(mian)交叉(cha)汙染(ran);
7.實(shi)驗(yan)完(wan)畢後用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外(wai)燈處(chu)理(li)工(gong)作(zuo)臺和移液器(qi);
8.試(shi)劑(ji)盒裏(li)所(suo)有(you)物(wu)品(pin)應(ying)視為(wei)汙(wu)染(ran)物(wu)對待(dai),並(bing)按(an)照《微生物生物醫學(xue)實(shi)驗(yan)室生物安(an)全通則(ze)》進行處(chu)理(li)。
我司(si)的實(shi)時熒(ying)光(guang)探針(zhen)法試(shi)劑(ji)盒種(zhong)類齊(qi)全(涵(han)蓋禽病(bing)、豬(zhu)病(bing)、馬牛(niu)羊病(bing)和(he)水(shui)產(chan)動(dong)物病(bing)原(yuan)體檢(jian)測(ce)),精準(zhun)高(gao)效,多(duo)重檢測(ce)(壹(yi)重、雙(shuang)重、三重),現貨(huo)供應(ying)歡(huan)迎(ying)廣大新老(lao)客(ke)戶前(qian)來選(xuan)購(gou)。
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