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PCR試劑(ji)盒(he)
禽類(lei)PCR試劑(ji)盒(he)
50T雞(ji)馬(ma)立克病毒(MDV)PCR檢(jian)測試劑(ji)盒(he)
產品(pin)簡介
雞(ji)馬(ma)立克病毒(MDV)PCR檢(jian)測試劑(ji)盒(he)是(shi)我司實時熒(ying)光探針(zhen)法試劑(ji)盒(he),種類(lei)齊全(quan),精準高效,現(xian)貨供應,歡迎(ying)廣(guang)大新老(lao)客戶(hu)前(qian)來(lai)選(xuan)購。
產品(pin)分類
【產品(pin)名稱】
商品(pin)名稱:雞(ji)馬(ma)立克病毒(MDV)PCR檢(jian)測試劑(ji)盒(he)(熒光PCR 法)
【包(bao)裝(zhuang)規(gui)格(ge)】25T/盒(he)、50T/盒(he)
【檢(jian)驗(yan)原理】本試劑(ji)盒(he)采(cai)用(yong)TaqMan 探針(zhen)法實時熒(ying)光PCR 技術(shu),根據(ju) 雞(ji)馬(ma)立克病毒(MDV)基(ji)因設(she)計特異性引(yin)物和熒光探針(zhen),用熒(ying)光PCR技術(shu)對雞(ji)馬(ma)立克病毒(MDV)的核酸進(jin)行(xing)體(ti)外擴(kuo)增(zeng)檢(jian)測,用(yong)於(yu)臨(lin)床上(shang)對可疑(yi)感染(ran)病料的病原學(xue)診斷。
【試劑(ji)組成(cheng)】
包(bao)裝(zhuang)規(gui)格(ge) | 25T/盒(he) | 50T/盒(he) |
反應液 | 500μL×1 管 | 500μL×2 管 |
酶(mei)液 | 25μL×1 管 | 50μL×1 管 |
陽性質(zhi)控(kong)品(pin) | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
陰(yin)性質(zhi)控(kong)品(pin) | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
說明:不(bu)同(tong)批號的試劑(ji)盒(he)組分不可交互使用
【儲存(cun)條(tiao)件(jian)及有效期】
-20℃±5℃,避光保存(cun)、運輸(shu)、反復凍(dong)融(rong)次(ci)數(shu)不(bu)超過 5 次(ci),有效期 12 個(ge)月(yue)。
【適用儀(yi)器(qi)】 ABI7500、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系(xi)列(lie)熒(ying)光定量PCR 檢(jian)測儀(yi)。
【使用(yong)方法】
1.樣品(pin)處理(樣(yang)本處理區(qu))
核酸(suan)提(ti)取(qu) 推薦采(cai)用(yong)核(he)酸(suan)提(ti)取(qu)或純化試劑(ji)(磁(ci)珠法或離心柱(zhu)法)進(jin)行(xing)核酸(suan)提(ti)取(qu), 請按照(zhao)試劑(ji)說明書進(jin)行(xing)操作。
2.試劑(ji)配(pei)制(試劑(ji)準備區(qu))根據(ju)待檢(jian)測樣(yang)本總數(shu),設(she)所需要(yao)的PCR 反應管管(guan)數(shu)為(wei) N(N=樣本數(shu)+1 管陰(yin)性對照(zhao)+1 管陽性對照(zhao);反應管數(shu)每滿(man)10 份,多配制(zhi)1 份),每測試反應體(ti)系配(pei)制如(ru)下表(biao):
試劑(ji) | 反應液 | 酶(mei)液 |
用量(樣本數(shu)為(wei) N) | 19μL | 1μL |
將(jiang)混合(he)好(hao)的測試反應液分裝(zhuang)到(dao) PCR 反應管中(zhong),20μL/管。
3.加樣(yang)(樣本處理區(qu))將(jiang)步驟(zhou) 1 提(ti)取(qu)的核酸、陽性質(zhi)控(kong)品(pin)、陰(yin)性質(zhi)控(kong)品(pin)各取(qu)5μL,分別加入相(xiang)應的反應管中(zhong),蓋(gai)好(hao)管蓋(gai),混(hun)勻(yun),短暫(zan)離心。
4.PCR 擴增(zeng)(核酸擴增(zeng)區)
2.1 將(jiang)待檢(jian)測反應管置(zhi)於(yu)熒光定量 PCR 儀反應槽內(nei);
2.2 設(she)置(zhi)好(hao)通(tong)道(dao)、樣(yang)品(pin)信息,反應體(ti)系設(she)置(zhi)為(wei) 25μL;熒光通(tong)道(dao)選(xuan)擇(ze):檢(jian)測通(tong)道(dao)(Reporter Dye)FAM,淬滅(mie)通(tong)道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系列(lie)儀(yi)器(qi)請勿選(xuan)擇(ze) ROX 參(can)比(bi)熒(ying)光,選(xuan)擇(ze) None 即(ji)可。
2.3 推薦循環參(can)數(shu)設(she)置(zhi):
步驟(zhou) | 循環數(shu) | 溫度 | 時間(jian) | 收(shou)集熒(ying)光信號 |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否(fou) |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否(fou) |
60℃ | 30sec | 是(shi) |
5.結果(guo)分析判定
5.1結果(guo)分析條(tiao)件(jian)設(she)定(請參(can)照(zhao)各儀器(qi)使用(yong)說明書進(jin)行(xing)設(she)置(zhi),以(yi)分析 ABI7500 儀器(qi)為例(li)) 反應結束(shu)後自(zi)動(dong)保存(cun)結(jie)果(guo),根據(ju)分析後圖(tu)像調(tiao)節 Baseline 的 Start 值、End 值以(yi)及 Threshold 值(用(yong)戶(hu)可根(gen) 據實際(ji)情況自(zi)行(xing)調(tiao)整,Start 值可設(she)在 3~15、End 值可設(she)在 5~20,使閾(yu)值線(xian)位於(yu)擴增(zeng)曲線(xian)指數(shu)期,陰(yin)性質(zhi)控(kong) 品(pin)的擴增(zeng)曲線(xian)平(ping)直或低(di)於閾(yu)值線(xian)),點(dian)擊 Analyze 自(zi)動(dong)獲得分析結果(guo)。
5.2結果(guo)判斷(duan)
陽性:檢(jian)測通(tong)道(dao)Ct 值≤40,且(qie)曲線(xian)有明顯(xian)的指數(shu)增(zeng)長曲線(xian);
陰(yin)性:樣本檢(jian)測結(jie)果(guo)無(wu)Ct 值,且(qie)無(wu)特異性擴增(zeng)曲線(xian);
可疑(yi):樣本檢(jian)測結(jie)果(guo)40<Ct 值≤45,建議(yi)重(zhong)復檢(jian)測,如(ru)果(guo)檢(jian)測通(tong)道(dao)仍(reng)為40值≤45,且(qie)曲線(xian)有明顯(xian)的增(zeng)長 曲線(xian),判(pan)定(ding)為陽性,否(fou)則為(wei)陰(yin)性。
5.3 質(zhi)控(kong)標(biao)準 陰(yin)性質(zhi)控(kong)品(pin):無(wu)特異性擴增(zeng)曲線(xian)或(huo)無(wu)Ct 值顯(xian)示;陽性質(zhi)控(kong)品(pin):擴增(zeng)曲線(xian)有明顯(xian)指數(shu)增(zeng)長期,且(qie) Ct 值≤32;以上(shang)條(tiao)件(jian)應(ying)同(tong)時滿(man)足(zu),否(fou)則實驗視為無(wu)效。
3. 檢(jian)測方(fang)法的局限性
1. 樣本檢(jian)測結(jie)果(guo)與樣本收(shou)集、處(chu)理、運送以及保(bao)存(cun)質(zhi)量有關;
2. 樣本提(ti)取(qu)過程(cheng)中(zhong)沒(mei)有控制(zhi)好(hao)交叉汙染(ran),會出(chu)現(xian)假(jia)陽性結果(guo);
3. 陽性對照(zhao)、擴(kuo)增(zeng)產物泄漏,會導致(zhi)假(jia)陽性結果(guo);
4. 病原體(ti)在流(liu)行(xing)過程(cheng)中(zhong)基(ji)因突(tu)變(bian)、重(zhong)組,會導致(zhi)假(jia)陰(yin)性結果(guo);
5. 不同(tong)的提(ti)取(qu)方法存(cun)在(zai)提(ti)取(qu)效率(lv)差異(yi),會導致(zhi)假(jia)陰(yin)性結果(guo);
6. 試劑(ji)運輸(shu),保(bao)存(cun)不(bu)當或(huo)試劑(ji)配(pei)制不(bu)準確引(yin)起(qi)的試劑(ji)檢(jian)測效能(neng)下降(jiang),出(chu)現(xian)假(jia)陰(yin)性或定(ding)量檢(jian)測不(bu)準確的結果(guo);
7. 本檢(jian)測結(jie)果(guo)僅供(gong)參(can)考,如(ru)須確(que)診請結合(he)臨(lin)床癥(zheng)狀(zhuang)以及其(qi)他檢(jian)測手段。
【 雞(ji)馬(ma)立克病毒(MDV)PCR檢(jian)測試劑(ji)盒(he)註(zhu)意事(shi)項(xiang)】
1.所有操作嚴格(ge)按(an)照(zhao)說明書進(jin)行(xing);
2.試劑(ji)盒(he)內(nei)各種組分使用前(qian)應(ying)自(zi)然(ran)融化(hua),完quan混勻(yun)並(bing)短暫(zan)離心;
3.反應液應(ying)避光保存(cun);
4.反應中(zhong)盡(jin)量避免(mian)氣(qi)泡(pao)存(cun)在(zai),管(guan)蓋(gai)需(xu)蓋(gai)緊;
5.使用(yong)壹(yi)次(ci)性吸(xi)頭(tou)、壹(yi)次(ci)性手套(tao)和各區專(zhuan)用工(gong)作服;
6.樣本處理、試劑(ji)配(pei)制、加(jia)樣需在不同(tong)區進(jin)行(xing),以免(mian)交叉汙染(ran);
7.實驗完(wan)畢後用(yong) 10%次(ci)氯(lv)酸(suan)或(huo) 75%酒精或紫外燈(deng)處(chu)理工(gong)作臺(tai)和移(yi)液器(qi);
8.試劑(ji)盒(he)裏所有物品(pin)應視為汙(wu)染(ran)物對待,並(bing)按(an)照(zhao)《微生物生物醫學(xue)實驗室生物安全(quan)通(tong)則》進(jin)行(xing)處理。
我司的實時熒(ying)光探針(zhen)法試劑(ji)盒(he)種類(lei)齊全(quan)(涵蓋(gai)禽(qin)病(bing)、豬(zhu)病(bing)、馬(ma)牛(niu)羊(yang)病(bing)和水產動物病原體(ti)檢(jian)測),精準高效,多重檢(jian)測(壹(yi)重(zhong)、雙(shuang)重、三重),現(xian)貨供(gong)應歡迎(ying)廣(guang)大新老(lao)客戶(hu)前(qian)來(lai)選(xuan)購。
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