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PCR試劑(ji)盒
禽(qin)類(lei)PCR試劑(ji)盒
50T雞(ji)滑(hua)液囊(nang)支(zhi)原(yuan)體(ti)(MS)PCR檢(jian)測試劑盒
產品(pin)簡介
雞(ji)滑(hua)液囊(nang)支(zhi)原(yuan)體(ti)(MS)PCR檢(jian)測試劑盒是我(wo)司實時熒光(guang)探(tan)針(zhen)法試劑(ji)盒,種類(lei)齊全(quan),精(jing)準高效(xiao),現(xian)貨供(gong)應(ying),歡(huan)迎廣(guang)大新(xin)老(lao)客戶前來(lai)選購(gou)。
產品(pin)分(fen)類(lei)
【產(chan)品(pin)名(ming)稱】
商(shang)品(pin)名(ming)稱:雞(ji)滑(hua)液囊(nang)支(zhi)原(yuan)體(ti)(MS)PCR檢(jian)測試(shi)劑盒(熒光(guang)PCR 法)
【包(bao)裝(zhuang)規(gui)格(ge)】25T/盒、50T/盒
【檢(jian)驗原(yuan)理】本(ben)試劑盒采(cai)用(yong)TaqMan 探(tan)針(zhen)法實時(shi)熒光(guang)PCR 技(ji)術,根據(ju) 雞(ji)滑(hua)液囊(nang)支(zhi)原(yuan)體(ti)(MS)基(ji)因設(she)計(ji)特異(yi)性(xing)引(yin)物(wu)和熒光(guang)探(tan)針(zhen),用(yong)熒光(guang)PCR技(ji)術對雞(ji)滑(hua)液囊(nang)支(zhi)原(yuan)體(ti)(MS)的核(he)酸(suan)進(jin)行(xing)體(ti)外擴(kuo)增檢(jian)測,用(yong)於臨(lin)床(chuang)上(shang)對可(ke)疑感(gan)染(ran)病(bing)料(liao)的病(bing)原(yuan)學診(zhen)斷。
【試(shi)劑組成(cheng)】
包(bao)裝(zhuang)規(gui)格(ge) | 25T/盒 | 50T/盒 |
反(fan)應(ying)液 | 500μL×1 管(guan) | 500μL×2 管(guan) |
酶(mei)液 | 25μL×1 管(guan) | 50μL×1 管(guan) |
陽(yang)性(xing)質控品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
陰(yin)性(xing)質控品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
說(shuo)明(ming):不同批號的試劑盒組分(fen)不可(ke)交互使(shi)用(yong)
【儲存條件及(ji)有效(xiao)期(qi)】
-20℃±5℃,避光保(bao)存、運(yun)輸(shu)、反(fan)復(fu)凍融(rong)次(ci)數(shu)不超(chao)過(guo) 5 次(ci),有效(xiao)期(qi) 12 個月(yue)。
【適用(yong)儀器(qi)】 ABI7500、安(an)捷(jie)倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系(xi)列熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR 檢(jian)測儀。
【使(shi)用(yong)方法】
1.樣品(pin)處(chu)理(樣本(ben)處(chu)理區(qu))
核(he)酸(suan)提取(qu) 推薦采(cai)用(yong)核(he)酸(suan)提取(qu)或(huo)純(chun)化(hua)試劑(磁(ci)珠(zhu)法或(huo)離心柱(zhu)法)進(jin)行(xing)核(he)酸(suan)提取(qu), 請按照(zhao)試劑說(shuo)明(ming)書(shu)進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)。
2.試(shi)劑配(pei)制(試(shi)劑準備區(qu))根據(ju)待檢(jian)測樣本(ben)總(zong)數(shu),設所(suo)需(xu)要(yao)的PCR 反(fan)應(ying)管(guan)管數(shu)為 N(N=樣本(ben)數(shu)+1 管(guan)陰性(xing)對照(zhao)+1 管(guan)陽性(xing)對照(zhao);反應(ying)管(guan)數每(mei)滿(man)10 份,多(duo)配(pei)制1 份),每(mei)測試反應(ying)體(ti)系(xi)配(pei)制如(ru)下(xia)表:
試(shi)劑 | 反(fan)應(ying)液 | 酶(mei)液 |
用(yong)量(liang)(樣本(ben)數(shu)為(wei) N) | 19μL | 1μL |
將混(hun)合(he)好(hao)的測試反應(ying)液分(fen)裝(zhuang)到(dao) PCR 反(fan)應(ying)管(guan)中,20μL/管(guan)。
3.加樣(樣本(ben)處(chu)理區(qu))將步(bu)驟(zhou) 1 提取(qu)的核(he)酸(suan)、陽(yang)性(xing)質控品(pin)、陰性(xing)質控品(pin)各(ge)取(qu)5μL,分(fen)別(bie)加入相(xiang)應(ying)的反應(ying)管(guan)中,蓋好(hao)管(guan)蓋(gai),混勻(yun),短(duan)暫(zan)離心。
4.PCR 擴(kuo)增(核(he)酸(suan)擴(kuo)增區(qu))
2.1 將待檢(jian)測反應(ying)管(guan)置於(yu)熒光(guang)定(ding)量(liang) PCR 儀(yi)反應(ying)槽(cao)內;
2.2 設(she)置好(hao)通道、樣品(pin)信(xin)息(xi),反應(ying)體(ti)系(xi)設置為(wei) 25μL;熒光(guang)通道選擇:檢(jian)測通道(Reporter Dye)FAM,淬滅(mie)通道(Quencher Dye)NONE,ABI 系(xi)列儀器(qi)請勿(wu)選擇 ROX 參(can)比熒光(guang),選擇 None 即(ji)可(ke)。
2.3 推薦循環(huan)參(can)數(shu)設置:
步(bu)驟(zhou) | 循(xun)環數 | 溫度 | 時(shi)間 | 收(shou)集(ji)熒光(guang)信(xin)號 |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否(fou) |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否(fou) |
60℃ | 30sec | 是 |
5.結(jie)果(guo)分(fen)析(xi)判(pan)定(ding)
5.1結(jie)果(guo)分(fen)析(xi)條(tiao)件設(she)定(ding)(請參(can)照(zhao)各(ge)儀器(qi)使(shi)用(yong)說(shuo)明(ming)書(shu)進(jin)行(xing)設(she)置(zhi),以(yi)分(fen)析(xi) ABI7500 儀(yi)器(qi)為(wei)例) 反(fan)應(ying)結(jie)束(shu)後(hou)自動(dong)保(bao)存結(jie)果(guo),根據(ju)分(fen)析(xi)後(hou)圖像(xiang)調節 Baseline 的 Start 值、End 值以及(ji) Threshold 值(用(yong)戶可(ke)根 據(ju)實際情況(kuang)自行調整,Start 值可(ke)設在 3~15、End 值可(ke)設在 5~20,使(shi)閾值線(xian)位於(yu)擴增曲線(xian)指數(shu)期,陰(yin)性(xing)質控 品(pin)的擴增曲線(xian)平直或(huo)低(di)於閾值線(xian)),點擊 Analyze 自動(dong)獲(huo)得(de)分(fen)析(xi)結(jie)果(guo)。
5.2結(jie)果(guo)判(pan)斷(duan)
陽(yang)性(xing):檢(jian)測通道Ct 值≤40,且曲線(xian)有明(ming)顯(xian)的指數增長曲線(xian);
陰(yin)性(xing):樣本(ben)檢(jian)測結(jie)果(guo)無(wu)Ct 值,且無特(te)異(yi)性(xing)擴(kuo)增曲線(xian);
可(ke)疑:樣本(ben)檢(jian)測結(jie)果(guo)40<Ct 值≤45,建(jian)議重復(fu)檢(jian)測,如果(guo)檢(jian)測通道仍(reng)為40值≤45,且曲線(xian)有明(ming)顯(xian)的增長 曲(qu)線(xian),判定(ding)為陽(yang)性(xing),否(fou)則為陰性(xing)。
5.3 質控標準 陰(yin)性(xing)質控品(pin):無特(te)異性(xing)擴(kuo)增曲線(xian)或(huo)無(wu)Ct 值顯示(shi);陽(yang)性(xing)質控品(pin):擴增曲線(xian)有明(ming)顯(xian)指(zhi)數(shu)增長期,且 Ct 值≤32;以(yi)上(shang)條(tiao)件應(ying)同(tong)時滿(man)足(zu),否(fou)則實驗視(shi)為無效(xiao)。
3. 檢(jian)測方法的局限性(xing)
1. 樣本(ben)檢(jian)測結(jie)果(guo)與(yu)樣本(ben)收(shou)集(ji)、處(chu)理、運(yun)送(song)以(yi)及保(bao)存質量(liang)有關;
2. 樣本(ben)提取(qu)過(guo)程中沒有控制好(hao)交叉(cha)汙染(ran),會(hui)出(chu)現(xian)假(jia)陽(yang)性(xing)結(jie)果(guo);
3. 陽(yang)性(xing)對照(zhao)、擴增產物(wu)泄漏(lou),會導致(zhi)假陽(yang)性(xing)結(jie)果(guo);
4. 病(bing)原(yuan)體(ti)在流(liu)行(xing)過(guo)程中基因突(tu)變、重組,會導(dao)致(zhi)假陰(yin)性(xing)結(jie)果(guo);
5. 不同的提取(qu)方法存在提取(qu)效(xiao)率差異(yi),會(hui)導致(zhi)假陰(yin)性(xing)結(jie)果(guo);
6. 試(shi)劑運(yun)輸(shu),保(bao)存不當(dang)或(huo)試(shi)劑配(pei)制不準確引(yin)起(qi)的試劑檢(jian)測效(xiao)能(neng)下(xia)降(jiang),出(chu)現(xian)假(jia)陰(yin)性(xing)或(huo)定(ding)量(liang)檢(jian)測不準確的結(jie)果(guo);
7. 本(ben)檢(jian)測結(jie)果(guo)僅(jin)供(gong)參(can)考(kao),如須確診(zhen)請結(jie)合(he)臨(lin)床(chuang)癥(zheng)狀(zhuang)以及(ji)其他(ta)檢(jian)測手(shou)段(duan)。
【 雞(ji)滑(hua)液囊(nang)支(zhi)原(yuan)體(ti)(MS)PCR檢(jian)測試(shi)劑盒註(zhu)意事項】
1.所(suo)有操(cao)作(zuo)嚴格(ge)按照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)進(jin)行(xing);
2.試(shi)劑盒內各(ge)種組分(fen)使(shi)用(yong)前應(ying)自然融(rong)化(hua),完quan混(hun)勻並(bing)短(duan)暫(zan)離心;
3.反(fan)應(ying)液應(ying)避光保(bao)存;
4.反(fan)應(ying)中盡量(liang)避免氣泡(pao)存在,管蓋需(xu)蓋緊(jin);
5.使(shi)用(yong)壹(yi)次(ci)性(xing)吸(xi)頭(tou)、壹(yi)次(ci)性(xing)手(shou)套(tao)和(he)各(ge)區(qu)專(zhuan)用(yong)工(gong)作服(fu);
6.樣本(ben)處(chu)理、試(shi)劑(ji)配(pei)制、加樣需(xu)在不同區(qu)進(jin)行(xing),以(yi)免交叉(cha)汙染(ran);
7.實(shi)驗完畢後(hou)用(yong) 10%次(ci)氯(lv)酸(suan)或(huo) 75%酒(jiu)精或(huo)紫外燈(deng)處(chu)理工(gong)作臺和(he)移液器(qi);
8.試(shi)劑盒裏(li)所(suo)有物(wu)品(pin)應(ying)視(shi)為汙染(ran)物(wu)對待,並(bing)按照(zhao)《微(wei)生物(wu)生物(wu)醫學實(shi)驗(yan)室(shi)生(sheng)物(wu)安全(quan)通則》進(jin)行(xing)處(chu)理。
我(wo)司的實時熒光(guang)探(tan)針(zhen)法試劑(ji)盒種類(lei)齊全(quan)(涵(han)蓋禽(qin)病(bing)、豬病(bing)、馬牛(niu)羊(yang)病(bing)和(he)水(shui)產動(dong)物(wu)病(bing)原(yuan)體(ti)檢(jian)測),精準高效(xiao),多(duo)重檢(jian)測(壹(yi)重、雙(shuang)重、三重(zhong)),現(xian)貨供(gong)應(ying)歡(huan)迎廣(guang)大新(xin)老(lao)客戶前來(lai)選購(gou)。
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