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PCR試劑(ji)盒
禽(qin)類PCR試劑(ji)盒
50T雞毒(du)支(zhi)原(yuan)體(MG)PCR檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒
產品簡介(jie)
雞毒(du)支(zhi)原(yuan)體(MG)PCR檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒是我(wo)司(si)實時(shi)熒(ying)光探(tan)針(zhen)法試劑(ji)盒,種(zhong)類齊全,精準(zhun)高效(xiao),現(xian)貨(huo)供(gong)應,歡迎(ying)廣(guang)大(da)新老客(ke)戶(hu)前(qian)來(lai)選購(gou)。
產(chan)品分類
【產品名稱】
商品名稱:雞毒(du)支(zhi)原(yuan)體(MG)PCR檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(熒光(guang)PCR 法)
【包裝規(gui)格(ge)】25T/盒、50T/盒
【檢(jian)驗(yan)原(yuan)理(li)】本(ben)試劑(ji)盒采用(yong)TaqMan 探(tan)針(zhen)法實時(shi)熒(ying)光PCR 技術(shu),根據(ju) 雞毒(du)支(zhi)原(yuan)體(MG)基因設(she)計特(te)異(yi)性引物和熒(ying)光探(tan)針(zhen),用(yong)熒光PCR技術(shu)對(dui)雞毒(du)支(zhi)原(yuan)體(MG)的(de)核酸(suan)進行體外擴(kuo)增檢(jian)測(ce),用(yong)於臨(lin)床上對(dui)可疑(yi)感(gan)染病(bing)料的(de)病原(yuan)學診(zhen)斷。
【試劑(ji)組(zu)成(cheng)】
包裝規(gui)格(ge) | 25T/盒 | 50T/盒 |
反應液 | 500μL×1 管 | 500μL×2 管 |
酶液 | 25μL×1 管 | 50μL×1 管 |
陽性質(zhi)控品 | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
陰性質(zhi)控品 | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
說明:不同批(pi)號(hao)的(de)試劑(ji)盒組分(fen)不(bu)可(ke)交(jiao)互(hu)使(shi)用
【儲(chu)存(cun)條件及有(you)效(xiao)期】
-20℃±5℃,避光保(bao)存、運(yun)輸(shu)、反復(fu)凍融(rong)次數(shu)不超(chao)過 5 次,有(you)效期(qi) 12 個(ge)月(yue)。
【適用儀器】 ABI7500、安捷倫(lun) MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定(ding)量(liang)PCR 檢(jian)測(ce)儀(yi)。
【使(shi)用方法】
1.樣品處理(li)(樣本(ben)處理(li)區(qu))
核酸提取 推薦采(cai)用核酸提(ti)取或(huo)純化(hua)試劑(ji)(磁珠法或離(li)心(xin)柱法)進行核酸提(ti)取, 請按照(zhao)試劑(ji)說(shuo)明(ming)書(shu)進行操作。
2.試劑(ji)配制(zhi)(試劑(ji)準(zhun)備區(qu))根據(ju)待檢(jian)測(ce)樣(yang)本(ben)總(zong)數(shu),設所(suo)需要(yao)的(de)PCR 反應管管(guan)數(shu)為 N(N=樣本(ben)數(shu)+1 管陰性對照(zhao)+1 管陽性對照(zhao);反應管數(shu)每滿(man)10 份(fen),多配制(zhi)1 份(fen)),每測試反應體系配制(zhi)如下表:
試劑(ji) | 反應液 | 酶液 |
用量(liang)(樣(yang)本(ben)數(shu)為 N) | 19μL | 1μL |
將(jiang)混合(he)好(hao)的(de)測試反應液分(fen)裝到(dao) PCR 反應管中(zhong),20μL/管。
3.加樣(樣本(ben)處理(li)區(qu))將(jiang)步(bu)驟(zhou) 1 提取的(de)核酸(suan)、陽性質(zhi)控品、陰性質(zhi)控品各取5μL,分別加入相應的(de)反應管中(zhong),蓋好(hao)管蓋,混(hun)勻,短(duan)暫(zan)離心(xin)。
4.PCR 擴增(核酸(suan)擴增區(qu))
2.1 將(jiang)待檢(jian)測(ce)反應管置(zhi)於熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang) PCR 儀反應槽(cao)內;
2.2 設置(zhi)好通(tong)道(dao)、樣品信(xin)息,反應體系設置(zhi)為 25μL;熒光通(tong)道(dao)選擇(ze):檢(jian)測(ce)通(tong)道(dao)(Reporter Dye)FAM,淬(cui)滅通(tong)道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系列儀器請勿選擇(ze) ROX 參(can)比(bi)熒(ying)光(guang),選擇(ze) None 即可。
2.3 推薦循(xun)環參(can)數(shu)設置(zhi):
步(bu)驟(zhou) | 循(xun)環數(shu) | 溫度 | 時間 | 收集熒光(guang)信(xin)號(hao) |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否(fou) |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否(fou) |
60℃ | 30sec | 是 |
5.結(jie)果分析(xi)判定
5.1結(jie)果分析(xi)條件設(she)定(ding)(請參(can)照(zhao)各儀器使(shi)用說(shuo)明(ming)書(shu)進行設置(zhi),以分(fen)析(xi) ABI7500 儀器為例(li)) 反應結(jie)束(shu)後自(zi)動(dong)保(bao)存結(jie)果,根據(ju)分(fen)析(xi)後圖(tu)像調節 Baseline 的(de) Start 值、End 值以及 Threshold 值(用戶(hu)可根 據(ju)實際(ji)情(qing)況自(zi)行調整,Start 值可設在(zai) 3~15、End 值可設在(zai) 5~20,使(shi)閾值(zhi)線位於擴(kuo)增曲(qu)線指數(shu)期,陰(yin)性質(zhi)控 品的(de)擴增曲(qu)線平直(zhi)或低(di)於閾值(zhi)線),點(dian)擊 Analyze 自(zi)動(dong)獲(huo)得(de)分(fen)析(xi)結(jie)果。
5.2結(jie)果判斷
陽性:檢(jian)測(ce)通(tong)道(dao)Ct 值≤40,且曲(qu)線有明(ming)顯的(de)指數(shu)增長曲(qu)線;
陰性:樣本(ben)檢(jian)測(ce)結(jie)果無Ct 值,且無特(te)異(yi)性擴增曲(qu)線;
可疑:樣本(ben)檢(jian)測(ce)結(jie)果40<Ct 值≤45,建議(yi)重(zhong)復(fu)檢(jian)測(ce),如(ru)果檢(jian)測(ce)通(tong)道(dao)仍為40值≤45,且曲(qu)線有明(ming)顯的(de)增長 曲(qu)線,判定為(wei)陽性,否(fou)則(ze)為(wei)陰(yin)性。
5.3 質(zhi)控標準(zhun) 陰性質(zhi)控品:無特(te)異(yi)性擴增曲(qu)線或無(wu)Ct 值顯示(shi);陽性質(zhi)控品:擴增曲(qu)線有明(ming)顯指(zhi)數(shu)增長期(qi),且 Ct 值≤32;以上條(tiao)件應同時滿(man)足(zu),否(fou)則(ze)實驗(yan)視(shi)為(wei)無(wu)效。
3. 檢(jian)測(ce)方法的(de)局限(xian)性
1. 樣本(ben)檢(jian)測(ce)結(jie)果與(yu)樣(yang)本(ben)收(shou)集(ji)、處理(li)、運送(song)以及保(bao)存質(zhi)量(liang)有(you)關(guan);
2. 樣本(ben)提(ti)取過(guo)程(cheng)中(zhong)沒有控(kong)制好(hao)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染,會出(chu)現(xian)假(jia)陽性結(jie)果;
3. 陽性對照(zhao)、擴增產物泄漏(lou),會導(dao)致假(jia)陽性結(jie)果;
4. 病原體在流行過程(cheng)中(zhong)基因突變(bian)、重(zhong)組,會導(dao)致假(jia)陰性結(jie)果;
5. 不同的(de)提取方法存在(zai)提(ti)取效(xiao)率差(cha)異(yi),會導(dao)致假(jia)陰性結(jie)果;
6. 試劑(ji)運(yun)輸(shu),保(bao)存不(bu)當或試劑(ji)配制(zhi)不準(zhun)確(que)引起(qi)的(de)試劑(ji)檢(jian)測(ce)效(xiao)能下降,出(chu)現(xian)假(jia)陰性或定量(liang)檢(jian)測(ce)不(bu)準(zhun)確(que)的(de)結(jie)果;
7. 本(ben)檢(jian)測(ce)結(jie)果僅供(gong)參(can)考(kao),如(ru)須(xu)確(que)診請(qing)結(jie)合(he)臨(lin)床癥狀(zhuang)以(yi)及(ji)其他檢(jian)測(ce)手(shou)段(duan)。
【 雞毒(du)支(zhi)原(yuan)體(MG)PCR檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒註(zhu)意事項】
1.所有操作(zuo)嚴(yan)格(ge)按照(zhao)說明書進行;
2.試劑(ji)盒內各(ge)種(zhong)組(zu)分使(shi)用前(qian)應自(zi)然(ran)融(rong)化(hua),完quan混勻並短(duan)暫(zan)離心(xin);
3.反應液應避光保(bao)存;
4.反應中(zhong)盡(jin)量(liang)避免氣泡(pao)存在(zai),管(guan)蓋需蓋緊;
5.使(shi)用壹(yi)次性吸頭、壹次性手(shou)套(tao)和(he)各(ge)區(qu)專用工(gong)作服;
6.樣本(ben)處理(li)、試劑(ji)配制(zhi)、加樣(yang)需在(zai)不(bu)同區(qu)進行,以免交(jiao)叉(cha)汙(wu)染;
7.實驗(yan)完(wan)畢後用(yong) 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈(deng)處理(li)工(gong)作臺(tai)和移(yi)液器;
8.試劑(ji)盒裏所(suo)有(you)物品應視為(wei)汙(wu)染物對待,並按照(zhao)《微生物生物醫(yi)學實驗(yan)室(shi)生(sheng)物安全通(tong)則(ze)》進行處理(li)。
我(wo)司(si)的(de)實時(shi)熒(ying)光探(tan)針(zhen)法試劑(ji)盒種(zhong)類齊全(涵蓋禽(qin)病、豬(zhu)病、馬牛羊病(bing)和(he)水(shui)產動(dong)物病原(yuan)體檢(jian)測(ce)),精準(zhun)高效(xiao),多重(zhong)檢(jian)測(ce)(壹(yi)重(zhong)、雙(shuang)重(zhong)、三重(zhong)),現(xian)貨(huo)供(gong)應歡迎(ying)廣(guang)大(da)新老客(ke)戶(hu)前(qian)來(lai)選購(gou)。
上壹(yi)個(ge):50T雞馬立克病毒(du)(MDV)PCR檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒
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