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PCR試(shi)劑(ji)盒(he)
其(qi)他PCR試(shi)劑(ji)盒(he)
50T恙(yang)蟲(chong)病立(li)克次(ci)體(ti)核酸(suan)PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)
產品(pin)簡介
恙蟲(chong)病立(li)克次(ci)體(ti)核酸(suan)PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)是(shi)我司實(shi)時(shi)熒光探針(zhen)法試(shi)劑(ji)盒(he),種(zhong)類齊全,精(jing)準高(gao)效(xiao),現(xian)貨供應,歡迎廣(guang)大新(xin)老(lao)客戶(hu)前(qian)來(lai)選購。
【產品(pin)名稱】
商品(pin)名稱:恙蟲(chong)病立(li)克次(ci)體(ti)核酸(suan)PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)
【包裝規(gui)格(ge)】25T/盒(he)、50T/盒(he)
我司的(de)實(shi)時(shi)熒光探針(zhen)法試(shi)劑(ji)盒(he)種(zhong)類齊全(涵(han)蓋禽(qin)病、豬(zhu)病、馬牛(niu)羊(yang)病和(he)水(shui)產動(dong)物病原體(ti)檢(jian)測(ce)),精準高效(xiao),多(duo)重(zhong)檢(jian)測(ce)(壹重(zhong)、雙重(zhong)、三(san)重(zhong)),現貨供應歡迎廣(guang)大新(xin)老(lao)客戶(hu)前(qian)來(lai)選購。
【檢(jian)驗(yan)原理(li)】本試(shi)劑(ji)盒(he)采(cai)用(yong)TaqMan 探針(zhen)法實(shi)時(shi)熒光PCR 技術,根(gen)據(ju)恙蟲(chong)病立(li)克次(ci)體(ti)基因設計(ji)特異(yi)性(xing)引物和(he)熒光探針(zhen),用熒光PCR技術對(dui)恙蟲(chong)病立(li)克次(ci)體(ti)的核(he)酸(suan)進行(xing)體(ti)外(wai)擴增(zeng)檢(jian)測(ce),用於臨床(chuang)上(shang)對(dui)可(ke)疑(yi)感(gan)染病料(liao)的(de)病原學(xue)診斷(duan)。
【試(shi)劑(ji)組成】
包裝規(gui)格(ge) | 25T/盒(he) | 50T/盒(he) |
PCR反應液(ye) | 500 μL×1管(guan) | 1000 μL×1管(guan) |
陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao) | 40 μL×1管(guan) | 40 μL×1管(guan) |
陰性(xing)對(dui)照(zhao) | 40 μL×1管(guan) | 40 μL×1管(guan) |
說明書(shu) | 1份 | 1份 |
說明:不(bu)同(tong)批(pi)號(hao)的(de)試(shi)劑(ji)盒(he)組(zu)分不(bu)可(ke)交互使(shi)用(yong)
【儲存(cun)條件及(ji)有(you)效(xiao)期(qi)】
避光-20℃以(yi)下(xia)保(bao)存(cun),避免反復凍(dong)融(rong),有(you)效(xiao)期(qi)12個月。
【適(shi)用(yong)儀器(qi)】 ABI 系(xi)列、Bio-Rad系(xi)列、Agilent Stratagene MX系(xi)列、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系(xi)列、杭州(zhou)博(bo)日(ri)系(xi)列等多(duo)通(tong)道實(shi)時(shi)熒光定量PCR儀。
【恙蟲(chong)病立(li)克次(ci)體(ti)核酸(suan)PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)產品(pin)展(zhan)示】

【檢(jian)驗(yan)方法(fa)】
1. 試(shi)劑(ji)準備(試(shi)劑(ji)準備區(qu))
(1)從冰(bing)箱(xiang)中取出試(shi)劑(ji)盒(he), 從(cong)試(shi)劑(ji)盒(he)中取出實驗(yan)所(suo)需試(shi)劑(ji),充分融(rong)化(hua)混(hun)勻並(bing)瞬時(shi)離(li)心以(yi)去(qu)除管(guan)壁附(fu)著液(ye)體(ti)。
(2)核算(suan)當次(ci)實驗(yan)所(suo)需要(yao)的(de)反應數(n),並(bing)根據(ju)如(ru)下(xia)表(biao)所(suo)示反(fan)應體(ti)系(xi)計(ji)算當次(ci)實驗(yan)所(suo)需要(yao)的(de)各種試(shi)劑(ji)量。
n =陰性(xing)對(dui)照(zhao)數(shu)(1T)+陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)數(shu)(1T)+誤差(cha)預留(liu)量(liang)(1T)+樣(yang)本數
單(dan)反液(ye)配(pei)制(zhi)表(biao)(每份) | PCR反應液(ye)(UNG酶及(ji)Taq酶) | 20 μL |
(3)在無(wu)菌(jun)離(li)心管(guan)中加(jia)入(ru)上(shang)述(shu)試(shi)劑(ji),充分混(hun)勻後瞬時(shi)離(li)心。按(an)照(zhao)20μL/管(guan)分裝量(liang)將試(shi)劑(ji)分裝至(zhi)PCR反(fan)應管(guan)。
(4)蓋緊(jin)PCR反應管(guan)蓋後將PCR反應管(guan)轉(zhuan)移至樣(yang)本處(chu)理(li)區(qu)。剩余(yu)試(shi)劑(ji)放回(hui)-20℃以(yi)下(xia)冰(bing)箱(xiang)冷凍(dong)保(bao)存(cun)。
2.樣(yang)本準備(bei)(樣(yang)本處(chu)理(li)區(qu))
用DNA/RNA提取(qu)試(shi)劑(ji)盒(he)提(ti)取核(he)酸(suan)即可(ke),具體(ti)操作按(an)照(zhao)其(qi)試(shi)劑(ji)盒(he)說明書(shu)
3.加(jia)樣(yang)
在上述(shu)制(zhi)備好(hao)的(de)PCR反應樣(yang)本管(guan)中分別加(jia)入(ru)處(chu)理(li)好(hao)的(de)待測(ce)標本(ben)DNA各(ge)5 μl、終(zhong)體(ti)積25 μl/管(guan),蓋好(hao)PCR反(fan)應蓋混(hun)勻後瞬時(shi)低(di)速離(li)心,轉(zhuan)移到PCR儀器(qi)上(shang)。陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)和(he)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)管(guan)則(ze)各(ge)加(jia)5 μL試(shi)劑(ji)盒(he)自(zi)帶的(de)陰性(xing)對(dui)照(zhao)或(huo)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)品(pin),終(zhong)體(ti)積為(wei)25 μl/管(guan),蓋好(hao)PCR反(fan)應蓋混(hun)勻後瞬時(shi)低(di)速離(li)心,轉(zhuan)移到PCR儀器(qi)上(shang)。
4.PCR(PCR擴增(zeng)區(qu))
(1)取樣(yang)本處(chu)理(li)區(qu)準(zhun)備(bei)好(hao)的(de)PCR反應管(guan),放置在實時(shi)熒光定量PCR儀樣(yang)品(pin)槽相應位置,並(bing)記錄放置順(shun)序(xu)。
(2)按(an)下(xia)表(biao)設置儀器(qi)核(he)酸(suan)擴增(zeng)相關參(can)數(shu)進行(xing)PCR擴增。
反應體(ti)積 | 25 μL | 通(tong)道選(xuan)擇(ze) | FAM通(tong)道采(cai)集恙蟲(chong)病立(li)克次(ci)體(ti)熒光信號(hao) |
PCR 反應 條件 | 步(bu)驟 | 條件 | 循環數 |
UNG處(chu)理(li) | 37℃:2分鐘(zhong)(min) | 1 | |
預變(bian)性(xing) | 95℃:3分鐘(zhong)(min) | 1 | |
PCR擴增(zeng) | 95℃:5秒(s) | 40 | |
55℃:40秒(s) (此階(jie)段結(jie)束時(shi)采(cai)集熒光信號(hao)) |
註:ABI系(xi)列熒光PCR儀在設置時(shi)不(bu)選(xuan)ROX校(xiao)正(zheng),設(she)置淬(cui)滅(mie)基團選擇(ze)None。
【註意(yi)事項(xiang)】
1.使(shi)用(yong)本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)實驗(yan)室(shi),應嚴格按(an)照(zhao)國(guo)家(jia)有(you)關部(bu)分頒(ban)布(bu)的(de)有(you)關基因擴增(zeng)檢(jian)驗(yan)實驗(yan)室(shi)管(guan)理(li)規(gui)範(fan)進行(xing)管(guan)理(li);
2.為避免RNA降(jiang)解(jie),樣(yang)本處(chu)理(li)過程(cheng)應在0-4℃條件下(xia)操(cao)作,且完(wan)成實驗(yan)後立(li)即上(shang)機檢(jian)測(ce);樣(yang)本處(chu)理(li)過程(cheng)中使(shi)用(yong)的(de)器(qi)具耗(hao)材(cai)應經(jing)過無(wu)核(he)酶處(chu)理(li);
3.各區(qu)域物品(pin)均(jun)為專用,不(bu)得交叉(cha)使(shi)用(yong),以(yi)免汙(wu)染;檢(jian)測(ce)結(jie)束後,應立(li)即對(dui)工(gong)作臺清潔;
4.吸取(qu)反應液(ye)時(shi),應盡量避免產生氣泡;上 PCR 儀前(qian),應註意(yi)檢(jian)查(zha)各反應管(guan)是(shi)否(fou)蓋緊(jin),以(yi)免液(ye)體(ti)蒸(zheng)發(fa)造成結(jie)果(guo)不(bu)準(zhun)確(que);
5.試(shi)劑(ji)盒(he)所(suo)有(you)試(shi)劑(ji)在使(shi)用(yong)前(qian)應該(gai)在常(chang)溫下(xia)充分融(rong)化(hua)混(hun)勻,並(bing)應瞬時(shi)離(li)心;
6.試(shi)劑(ji)盒(he)內(nei)所(suo)配(pei)陰(yin)性(xing)和(he)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)在第(di)壹(yi)次(ci)使(shi)用(yong)前(qian)應全部(bu)轉(zhuan)移至標本(ben)準(zhun)備(bei)區(qu),並(bing)單(dan)獨存(cun)放;
7.為防止熒光幹擾(rao),應避免裸手直(zhi)接接(jie)觸(chu)PCR反應管(guan),並(bing)應避免在PCR反應管(guan)上(shang)進(jin)行(xing)任何標記;
8.檢(jian)測(ce)過程(cheng)中使(shi)用(yong)過的(de)吸(xi)頭,應直(zhi)接打(da)到(dao)盛有(you) 10%次(ci)氯酸(suan)的廢(fei)物缸內(nei),檢(jian)測(ce)結(jie)束的(de)PCR 反應管(guan),切(qie)忌(ji)開(kai)蓋,並(bing)與其(qi)他廢(fei)棄物品(pin)壹(yi)同滅(mie)菌(jun)後丟棄(qi);工(gong)作臺及(ji)各種實驗(yan)用品(pin)應定期用(yong) 10%次(ci)氯酸(suan)、75%酒精(jing)或(huo)紫(zi)外(wai)燈進(jin)行(xing)消毒;
9.儀器(qi)擴(kuo)增(zeng)相(xiang)關參(can)數(shu)應按(an)照(zhao)本(ben)說明書(shu)相關要(yao)求(qiu)進行(xing)設置;不(bu)同(tong)批(pi)號(hao)試(shi)劑(ji)不(bu)能混(hun)用;並(bing)在有(you)效(xiao)期(qi)內(nei)使(shi)用(yong).
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