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PCR試(shi)劑(ji)盒
其(qi)他(ta)PCR試(shi)劑(ji)盒
50T沙(sha)門氏菌(jun)SPP-spy核酸(suan)試(shi)劑(ji)盒(熒(ying)光-PCR法(fa))





產品(pin)簡(jian)介
沙門氏菌(jun)SPP-spy核酸(suan)試(shi)劑(ji)盒(熒(ying)光-PCR法(fa))是(shi)我司(si)實時(shi)熒光探針法(fa)試(shi)劑(ji)盒,種(zhong)類齊(qi)全,精準高(gao)效,現(xian)貨供應,歡(huan)迎(ying)廣大(da)新(xin)老(lao)客(ke)戶(hu)前(qian)來咨(zi)詢和選(xuan)購。
【產品(pin)名(ming)稱】
商(shang)品(pin)名(ming)稱:沙門氏菌(jun)SPP-spy核酸試(shi)劑(ji)盒(熒(ying)光-PCR法(fa))
【包裝規(gui)格】25T/盒、50T/盒
【檢驗(yan)原理】本試(shi)劑(ji)盒采(cai)用(yong)TaqMan 探針法(fa)實(shi)時熒光PCR 技術,根(gen)據沙門氏菌(jun)SPP-spy基因(yin)設(she)計特(te)異(yi)性(xing)引物和熒(ying)光探針,用(yong)熒(ying)光PCR技術對(dui)沙門氏菌(jun)SPP-spy的核酸(suan)進(jin)行體外擴增(zeng)檢(jian)測,用(yong)於臨床上對可(ke)疑(yi)感染病料的病(bing)原學(xue)診(zhen)斷(duan)。
我司(si)的實(shi)時熒(ying)光探針法(fa)試(shi)劑(ji)盒種(zhong)類齊(qi)全(涵蓋禽(qin)病、豬(zhu)病、馬(ma)牛(niu)羊(yang)病(bing)和(he)水(shui)產動(dong)物病(bing)原體檢測),精(jing)準(zhun)高(gao)效,多(duo)重(zhong)檢(jian)測(壹(yi)重、雙重、三(san)重),現(xian)貨供應歡(huan)迎(ying)廣大(da)新(xin)老(lao)客(ke)戶(hu)前(qian)來咨(zi)詢和選(xuan)購。
【試(shi)劑(ji)組成】
包裝規(gui)格 | 25T/盒 | 50T/盒 |
反應液(ye) | 500μL×1 管 | 500μL×2 管 |
酶液(ye) | 25μL×1 管 | 50μL×1 管 |
陽性質控品(pin) | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
陰性(xing)質(zhi)控品(pin) | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
說(shuo)明:不(bu)同(tong)批(pi)號的試(shi)劑(ji)盒組分不(bu)可(ke)交(jiao)互(hu)使用(yong)
【儲存(cun)條件(jian)及有效期】
-20℃±5℃,避光保(bao)存(cun)、運輸(shu)、反(fan)復凍(dong)融次(ci)數(shu)不(bu)超(chao)過(guo) 5 次,有效(xiao)期(qi) 12 個(ge)月。
【適用(yong)儀(yi)器(qi)】 ABI7500、安捷(jie)倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系(xi)列熒(ying)光定量(liang)PCR 檢測儀(yi)。
【沙門氏菌(jun)SPP-spy核酸試(shi)劑(ji)盒(熒(ying)光-PCR法(fa))使用(yong)方(fang)法(fa)】
1.樣(yang)品(pin)處理(樣(yang)本處(chu)理區)
核酸提(ti)取 推薦采(cai)用(yong)核(he)酸(suan)提(ti)取或(huo)純(chun)化試(shi)劑(ji)(磁珠(zhu)法(fa)或(huo)離心柱法(fa))進(jin)行核(he)酸(suan)提取,請(qing)按照(zhao)試(shi)劑(ji)說(shuo)明書進(jin)行操作(zuo)。
2.試(shi)劑(ji)配制(zhi)(試(shi)劑(ji)準備(bei)區)根據待(dai)檢測(ce)樣(yang)本總(zong)數,設(she)所(suo)需要(yao)的PCR 反應管(guan)管(guan)數為 N(N=樣(yang)本數(shu)+1 管陰性(xing)對(dui)照+1 管陽性對照;反應管(guan)數(shu)每滿(man)10 份,多(duo)配制(zhi)1 份),每測試(shi)反應體系(xi)配制(zhi)如下表:
試(shi)劑(ji) | 反應液(ye) | 酶液(ye) |
用(yong)量(liang)(樣(yang)本數(shu)為 N) | 19μL | 1μL |
將混合(he)好(hao)的測(ce)試(shi)反應液(ye)分裝到 PCR 反應管(guan)中(zhong),20μL/管。
3.加樣(yang)(樣(yang)本處(chu)理區)將步(bu)驟(zhou) 1 提取的(de)核酸(suan)、陽性質控品(pin)、陰性(xing)質(zhi)控品(pin)各取5μL,分別(bie)加(jia)入(ru)相(xiang)應的(de)反(fan)應管(guan)中(zhong),蓋好(hao)管蓋,混(hun)勻,短暫(zan)離心(xin)。
4.PCR 擴增(核(he)酸(suan)擴增區)
2.1 將待(dai)檢測(ce)反應管(guan)置於熒光定量(liang) PCR 儀(yi)反(fan)應槽(cao)內(nei);
2.2 設(she)置好(hao)通(tong)道、樣(yang)品(pin)信(xin)息(xi),反應體系(xi)設(she)置為 25μL;熒光通(tong)道選(xuan)擇:檢(jian)測通(tong)道(Reporter Dye)FAM,淬(cui)滅(mie)通(tong)道(Quencher Dye)NONE,ABI 系(xi)列儀(yi)器(qi)請(qing)勿選(xuan)擇 ROX 參比熒(ying)光,選(xuan)擇 None 即(ji)可。
2.3 推薦循(xun)環(huan)參(can)數(shu)設(she)置:
步(bu)驟(zhou) | 循(xun)環(huan)數(shu) | 溫度(du) | 時間(jian) | 收集熒光信(xin)號 |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否 |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否 |
60℃ | 30sec | 是 |
5.結(jie)果(guo)分析判定(ding)
5.1結(jie)果(guo)分析條件(jian)設(she)定(ding)(請參照(zhao)各(ge)儀(yi)器(qi)使用(yong)說(shuo)明書進(jin)行設(she)置,以分析 ABI7500 儀(yi)器(qi)為例) 反應結(jie)束(shu)後(hou)自(zi)動(dong)保(bao)存(cun)結(jie)果(guo),根(gen)據分析後(hou)圖(tu)像(xiang)調節 Baseline 的 Start 值(zhi)、End 值(zhi)以及 Threshold 值(zhi)(用(yong)戶(hu)可(ke)根(gen) 據實際情(qing)況自(zi)行調整,Start 值(zhi)可(ke)設(she)在 3~15、End 值(zhi)可(ke)設(she)在 5~20,使閾值(zhi)線位(wei)於擴增(zeng)曲(qu)線指數期,陰性(xing)質(zhi)控 品(pin)的擴(kuo)增曲線平(ping)直或(huo)低於閾值(zhi)線),點(dian)擊 Analyze 自(zi)動(dong)獲得(de)分析結(jie)果(guo)。
5.2結(jie)果(guo)判(pan)斷(duan)
陽性:檢測通(tong)道Ct 值(zhi)≤40,且曲線有(you)明顯的(de)指數增長曲(qu)線;
陰性(xing):樣(yang)本檢(jian)測結(jie)果(guo)無Ct 值(zhi),且無特(te)異(yi)性(xing)擴增曲線;
可疑:樣(yang)本檢(jian)測結(jie)果(guo)40<Ct 值(zhi)≤45,建議重(zhong)復檢測(ce),如果(guo)檢(jian)測(ce)通(tong)道仍(reng)為40值(zhi)≤45,且曲線有(you)明顯的(de)增(zeng)長 曲線,判(pan)定為陽性,否則為陰性(xing)。
5.3 質控標(biao)準 陰性(xing)質(zhi)控品(pin):無特(te)異(yi)性(xing)擴增曲線或(huo)無Ct 值(zhi)顯示(shi);陽性質控品(pin):擴增(zeng)曲線有(you)明顯指數增長期(qi),且 Ct 值(zhi)≤32;以上條件(jian)應同(tong)時(shi)滿足(zu),否(fou)則實驗(yan)視為無效。
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