產品(pin)簡(jian)介

腸(chang)集聚(ju)性大腸(chang)桿菌(jun)(EAEC)PCR核酸(suan)試(shi)劑盒(he)是我司(si)實(shi)時(shi)熒(ying)光(guang)探(tan)針(zhen)法試(shi)劑盒(he),種類齊(qi)全,精(jing)準高(gao)效(xiao)，現貨供(gong)應(ying),歡(huan)迎(ying)廣(guang)大新(xin)老(lao)客(ke)戶(hu)前來(lai)咨詢(xun)和選購。

【產(chan)品(pin)名(ming)稱】

商(shang)品(pin)名(ming)稱：腸(chang)集(ji)聚(ju)性大腸(chang)桿菌(jun)(EAEC)PCR核(he)酸(suan)試(shi)劑盒(he)

【包裝(zhuang)規(gui)格】25T/盒(he)、50T/盒(he)

【檢(jian)驗(yan)原理(li)】本(ben)試(shi)劑盒(he)采(cai)用(yong)TaqMan 探(tan)針(zhen)法實(shi)時熒(ying)光(guang)PCR 技(ji)術，根據(ju)腸(chang)集(ji)聚(ju)性大腸(chang)桿菌(jun)(EAEC)基因設計(ji)特(te)異性引(yin)物和熒(ying)光(guang)探(tan)針(zhen)，用熒(ying)光(guang)PCR技(ji)術對(dui)腸(chang)集(ji)聚(ju)性大腸(chang)桿菌(jun)(EAEC)的(de)核(he)酸(suan)進行體(ti)外擴(kuo)增(zeng)檢(jian)測，用(yong)於臨(lin)床(chuang)上對(dui)可(ke)疑感染(ran)病(bing)料的(de)病(bing)原學(xue)診斷。

我(wo)司(si)的(de)實(shi)時(shi)熒(ying)光(guang)探(tan)針(zhen)法試(shi)劑盒(he)種類齊(qi)全（涵(han)蓋禽病(bing)、豬病(bing)、馬(ma)牛(niu)羊病(bing)和水(shui)產動物病(bing)原體(ti)檢(jian)測(ce)），精準高(gao)效(xiao)，多重檢(jian)測(ce)（壹重、雙重、三重），現貨(huo)供(gong)應歡(huan)迎(ying)廣(guang)大新(xin)老(lao)客(ke)戶(hu)前來(lai)咨詢(xun)和選購。

【試(shi)劑組(zu)成】

說(shuo)明：不同批號的試(shi)劑盒(he)組(zu)分不可(ke)交互使(shi)用(yong)

【儲存條件及(ji)有(you)效(xiao)期】

 -20℃±5℃，避光(guang)保存、運輸、反復凍(dong)融次數不超(chao)過(guo) 5 次，有效(xiao)期 12 個月(yue)。

【適用儀(yi)器(qi)】 ABI7500、安(an)捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系列(lie)熒(ying)光(guang)定量(liang)PCR 檢(jian)測(ce)儀。

【腸(chang)集(ji)聚(ju)性大腸(chang)桿菌(jun)(EAEC)PCR核(he)酸(suan)試(shi)劑盒(he)使(shi)用(yong)方法(fa)】

1.樣(yang)品(pin)處(chu)理(li)（樣本(ben)處(chu)理(li)區(qu)）

 核(he)酸(suan)提(ti)取 推(tui)薦(jian)采(cai)用(yong)核(he)酸(suan)提(ti)取或(huo)純化(hua)試劑（磁(ci)珠法或(huo)離心(xin)柱法）進行核(he)酸(suan)提(ti)取，請按照試劑說(shuo)明書進行操(cao)作。

2.試(shi)劑配(pei)制(zhi)（試(shi)劑準備(bei)區(qu)）根據(ju)待檢(jian)測(ce)樣本(ben)總數，設所需要的PCR 反(fan)應(ying)管(guan)管(guan)數為(wei) N(N=樣(yang)本(ben)數+1 管(guan)陰性對照(zhao)+1 管(guan)陽(yang)性對照(zhao)；反應(ying)管(guan)數每滿10 份(fen)，多配(pei)制(zhi)1 份(fen))，每(mei)測(ce)試反應體(ti)系配(pei)制(zhi)如(ru)下表(biao)：

將(jiang)混(hun)合好的測(ce)試(shi)反(fan)應液(ye)分裝(zhuang)到 PCR 反(fan)應(ying)管(guan)中(zhong)，20μL/管(guan)。

3.加樣（樣(yang)本(ben)處理(li)區(qu)）將(jiang)步(bu)驟 1 提(ti)取的(de)核(he)酸(suan)、陽(yang)性質(zhi)控品(pin)、陰性質(zhi)控品(pin)各(ge)取5μL，分別(bie)加入(ru)相應(ying)的反(fan)應管(guan)中(zhong)，蓋好(hao)管(guan)蓋(gai)，混勻(yun)，短(duan)暫離(li)心(xin)。

4.PCR 擴(kuo)增(zeng)（核酸(suan)擴(kuo)增(zeng)區(qu)）

2.1 將(jiang)待檢(jian)測(ce)反應(ying)管(guan)置(zhi)於熒(ying)光(guang)定量(liang) PCR 儀(yi)反(fan)應槽內(nei)；

2.2 設(she)置(zhi)好(hao)通(tong)道(dao)、樣品(pin)信(xin)息(xi)，反(fan)應(ying)體(ti)系設置(zhi)為(wei) 25μL；熒(ying)光(guang)通(tong)道(dao)選擇(ze)：檢(jian)測(ce)通(tong)道(dao)（Reporter Dye）FAM，淬(cui)滅通(tong)道(dao)（Quencher Dye）NONE，ABI 系列(lie)儀器(qi)請勿(wu)選擇(ze) ROX 參比(bi)熒(ying)光(guang)，選擇(ze) None 即可(ke)。

2.3 推(tui)薦(jian)循(xun)環(huan)參數設置(zhi)：

5.結(jie)果(guo)分析(xi)判定

5.1結(jie)果(guo)分析(xi)條件設(she)定（請參照各(ge)儀(yi)器(qi)使(shi)用(yong)說(shuo)明書進行設(she)置(zhi)，以(yi)分析(xi) ABI7500 儀(yi)器(qi)為(wei)例） 反(fan)應(ying)結(jie)束(shu)後自動(dong)保存結(jie)果(guo)，根據(ju)分析(xi)後圖(tu)像調(tiao)節(jie) Baseline 的(de) Start 值、End 值以及 Threshold 值（用戶(hu)可(ke)根 據(ju)實際(ji)情(qing)況(kuang)自行(xing)調(tiao)整(zheng)，Start 值可(ke)設在 3～15、End 值可(ke)設在 5～20，使(shi)閾(yu)值線位於擴增(zeng)曲線指數期，陰性質(zhi)控 品(pin)的(de)擴增(zeng)曲線平直(zhi)或(huo)低於閾值線），點擊(ji) Analyze 自動(dong)獲得分析(xi)結(jie)果(guo)。

5.2結(jie)果(guo)判斷

陽(yang)性：檢測(ce)通(tong)道(dao)Ct 值≤40，且曲線有明(ming)顯(xian)的指數增長曲線；

陰性：樣本(ben)檢測(ce)結(jie)果(guo)無Ct 值，且無特異性擴增(zeng)曲線；

可(ke)疑：樣本(ben)檢測結(jie)果(guo)40＜Ct 值≤45，建(jian)議(yi)重復檢(jian)測(ce)，如(ru)果(guo)檢(jian)測(ce)通(tong)道(dao)仍為(wei)40值≤45，且曲線有明(ming)顯(xian)的增(zeng)長 曲線，判定為(wei)陽(yang)性，否(fou)則(ze)為(wei)陰性。

5.3 質(zhi)控標準 陰性質(zhi)控品(pin)：無特異性擴增(zeng)曲線或(huo)無Ct 值顯(xian)示；陽(yang)性質(zhi)控品(pin)：擴(kuo)增曲線有明(ming)顯(xian)指數增長期(qi)，且 Ct 值≤32；以(yi)上條件應(ying)同時滿(man)足(zu)，否(fou)則(ze)實驗(yan)視(shi)為(wei)無效(xiao)。

【產(chan)品(pin)推(tui)薦(jian)】