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PCR試劑(ji)盒(he)
其(qi)他PCR試劑(ji)盒(he)
50T百(bai)日(ri)咳(ke)桿(gan)菌(jun)(BP)核酸試劑(ji)盒(he)(熒光-PCR法(fa))





產品簡介
百(bai)日(ri)咳(ke)桿(gan)菌(jun)(BP)核酸試劑(ji)盒(he)(熒光-PCR法(fa))是我(wo)司(si)實(shi)時(shi)熒光探針法(fa)試劑(ji)盒(he),種(zhong)類(lei)齊全,精準高(gao)效,現貨(huo)供(gong)應,歡迎廣(guang)大新老(lao)客(ke)戶前來(lai)咨詢和(he)選購(gou)。
產品分類(lei)
【產品名稱(cheng)】
商(shang)品名稱(cheng):百(bai)日(ri)咳(ke)桿(gan)菌(jun)(BP)核酸試劑(ji)盒(he)(熒光-PCR法(fa))
【包裝規(gui)格(ge)】25T/盒(he)、50T/盒(he)
【檢(jian)驗原(yuan)理(li)】本(ben)試劑(ji)盒(he)采用TaqMan 探(tan)針法(fa)實時(shi)熒光PCR 技(ji)術(shu),根(gen)據百(bai)日(ri)咳(ke)桿(gan)菌(jun)(BP)基(ji)因(yin)設(she)計(ji)特異(yi)性(xing)引物和(he)熒光探針,用熒光PCR技(ji)術(shu)對(dui)百(bai)日(ri)咳(ke)桿(gan)菌(jun)(BP)的核酸進(jin)行(xing)體(ti)外(wai)擴增檢(jian)測(ce),用(yong)於臨(lin)床(chuang)上(shang)對(dui)可(ke)疑(yi)感染(ran)病(bing)料的病(bing)原(yuan)學(xue)診斷。
我司(si)的實(shi)時(shi)熒光探針法(fa)試劑(ji)盒(he)種(zhong)類(lei)齊全(涵(han)蓋禽病、豬(zhu)病(bing)、馬牛羊病和(he)水產動物病原(yuan)體(ti)檢(jian)測(ce)),精準高(gao)效,多重(zhong)檢測(ce)(壹(yi)重(zhong)、雙重(zhong)、三(san)重(zhong)),現貨供應歡迎廣(guang)大新老(lao)客(ke)戶前來(lai)咨詢和(he)選購(gou)。
【試劑(ji)組成(cheng)】
包裝規(gui)格(ge) | 25T/盒(he) | 50T/盒(he) |
反(fan)應液(ye) | 500μL×1 管 | 500μL×2 管 |
酶液(ye) | 25μL×1 管 | 50μL×1 管 |
陽性(xing)質控品 | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
陰性(xing)質控品 | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
說(shuo)明:不(bu)同批(pi)號(hao)的試劑(ji)盒(he)組分(fen)不(bu)可交互使(shi)用
【儲(chu)存條件(jian)及有(you)效期(qi)】
-20℃±5℃,避(bi)光保存、運(yun)輸(shu)、反(fan)復凍(dong)融次數不超過 5 次,有效期(qi) 12 個月。
【適(shi)用儀器】 ABI7500、安(an)捷(jie)倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR 檢測(ce)儀(yi)。
【百(bai)日(ri)咳(ke)桿(gan)菌(jun)(BP)核酸試劑(ji)盒(he)(熒光-PCR法(fa))使(shi)用方法(fa)】
1.樣品處(chu)理(li)(樣本(ben)處(chu)理(li)區(qu))
核酸提取 推薦(jian)采用核酸提取或純(chun)化試劑(ji)(磁(ci)珠(zhu)法(fa)或離(li)心(xin)柱(zhu)法(fa))進(jin)行(xing)核酸提取,請按(an)照(zhao)試劑(ji)說(shuo)明書(shu)進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)。
2.試劑(ji)配(pei)制(試劑(ji)準備(bei)區(qu))根據待檢測(ce)樣本(ben)總(zong)數,設(she)所(suo)需要的PCR 反(fan)應管管數為(wei) N(N=樣本(ben)數(shu)+1 管陰性(xing)對照(zhao)+1 管陽性(xing)對照(zhao);反(fan)應管數每(mei)滿(man)10 份,多配制1 份),每(mei)測(ce)試反(fan)應體系配制(zhi)如(ru)下表:
試劑(ji) | 反(fan)應液(ye) | 酶(mei)液(ye) |
用量(liang)(樣本(ben)數(shu)為(wei) N) | 19μL | 1μL |
將混(hun)合好的測(ce)試反(fan)應液(ye)分裝到 PCR 反(fan)應管中,20μL/管。
3.加(jia)樣(樣本(ben)處(chu)理(li)區(qu))將步(bu)驟(zhou) 1 提取的核酸、陽性(xing)質控品、陰性(xing)質控品各取5μL,分(fen)別(bie)加(jia)入相應的反(fan)應管中,蓋好管蓋,混(hun)勻(yun),短暫離(li)心(xin)。
4.PCR 擴增(核酸擴增區(qu))
2.1 將待(dai)檢(jian)測(ce)反(fan)應管置(zhi)於熒光定(ding)量(liang) PCR 儀反(fan)應槽(cao)內(nei);
2.2 設(she)置(zhi)好(hao)通(tong)道(dao)、樣品信息,反(fan)應體系設(she)置(zhi)為(wei) 25μL;熒(ying)光通(tong)道(dao)選(xuan)擇:檢測(ce)通(tong)道(dao)(Reporter Dye)FAM,淬(cui)滅(mie)通(tong)道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系列儀(yi)器(qi)請(qing)勿(wu)選擇 ROX 參(can)比(bi)熒(ying)光,選擇 None 即(ji)可。
2.3 推(tui)薦(jian)循環參(can)數(shu)設(she)置(zhi):
步(bu)驟 | 循環數(shu) | 溫(wen)度(du) | 時(shi)間(jian) | 收集(ji)熒(ying)光信號(hao) |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否(fou) |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否(fou) |
60℃ | 30sec | 是 |
5.結(jie)果(guo)分析(xi)判(pan)定(ding)
5.1結(jie)果(guo)分析(xi)條(tiao)件(jian)設(she)定(ding)(請參(can)照(zhao)各儀器使(shi)用說(shuo)明書(shu)進(jin)行(xing)設(she)置(zhi),以(yi)分(fen)析(xi) ABI7500 儀器為(wei)例) 反(fan)應結(jie)束後自(zi)動保存結(jie)果(guo),根據(ju)分(fen)析(xi)後圖像調(tiao)節(jie) Baseline 的 Start 值、End 值以(yi)及 Threshold 值(用(yong)戶可根(gen) 據(ju)實(shi)際(ji)情況(kuang)自(zi)行(xing)調整(zheng),Start 值(zhi)可(ke)設(she)在(zai) 3~15、End 值(zhi)可(ke)設(she)在(zai) 5~20,使(shi)閾(yu)值(zhi)線位於擴增曲(qu)線(xian)指數(shu)期,陰性(xing)質控 品的擴(kuo)增曲(qu)線(xian)平直(zhi)或低(di)於閾(yu)值(zhi)線),點(dian)擊 Analyze 自(zi)動獲得(de)分析(xi)結(jie)果(guo)。
5.2結(jie)果(guo)判(pan)斷
陽性(xing):檢測(ce)通(tong)道(dao)Ct 值≤40,且(qie)曲線有(you)明顯(xian)的指(zhi)數增長曲線;
陰(yin)性(xing):樣本(ben)檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)無Ct 值,且(qie)無特異(yi)性(xing)擴增曲(qu)線(xian);
可疑:樣本(ben)檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)40<Ct 值(zhi)≤45,建(jian)議(yi)重(zhong)復檢(jian)測(ce),如(ru)果(guo)檢測(ce)通(tong)道(dao)仍(reng)為(wei)40值(zhi)≤45,且(qie)曲線有(you)明顯(xian)的增長 曲(qu)線,判(pan)定(ding)為(wei)陽性(xing),否(fou)則為(wei)陰(yin)性(xing)。
5.3 質控標(biao)準 陰性(xing)質控品:無特異(yi)性(xing)擴增曲(qu)線(xian)或無Ct 值(zhi)顯(xian)示;陽性(xing)質控品:擴增曲(qu)線(xian)有明(ming)顯(xian)指數增長期,且(qie) Ct 值(zhi)≤32;以上條件應同時(shi)滿足,否(fou)則實(shi)驗(yan)視為(wei)無效。
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