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PCR試(shi)劑(ji)盒(he)
其他(ta)PCR試劑盒
50TA 族鏈(lian)球(qiu)菌(GAS)核(he)酸(suan)試(shi)劑盒(熒光(guang)-PCR法(fa))





產品簡(jian)介(jie)
A 族鏈(lian)球(qiu)菌(GAS)核(he)酸(suan)試(shi)劑盒(熒光(guang)-PCR法(fa))是我司(si)實(shi)時(shi)熒光(guang)探(tan)針法(fa)試劑(ji)盒,種(zhong)類(lei)齊(qi)全(quan),精(jing)準高效(xiao),現貨供(gong)應,歡迎(ying)廣大(da)新(xin)老客(ke)戶(hu)前(qian)來選購(gou)。
產(chan)品分(fen)類(lei)
【產(chan)品名稱】
商(shang)品名稱:A 族鏈(lian)球(qiu)菌(GAS)核(he)酸(suan)試(shi)劑盒(熒光(guang)-PCR法(fa))
【包(bao)裝規(gui)格(ge)】25T/盒(he)、50T/盒(he)
【檢驗(yan)原(yuan)理(li)】本(ben)試劑(ji)盒采(cai)用(yong)TaqMan 探(tan)針法(fa)實時(shi)熒光(guang)PCR 技(ji)術(shu),根(gen)據(ju)A 族鏈(lian)球(qiu)菌(GAS)基因(yin)設(she)計特異(yi)性引(yin)物(wu)和(he)熒(ying)光(guang)探(tan)針,用(yong)熒(ying)光(guang)PCR技(ji)術(shu)對(dui)A 族鏈(lian)球(qiu)菌(GAS)的(de)核(he)酸(suan)進(jin)行體外擴增(zeng)檢測(ce),用(yong)於(yu)臨(lin)床上對(dui)可(ke)疑感染病料的病原(yuan)學診斷(duan)。
我司(si)的(de)實(shi)時熒(ying)光(guang)探(tan)針法(fa)試劑(ji)盒種(zhong)類(lei)齊(qi)全(quan)(涵(han)蓋(gai)禽(qin)病、豬病、馬(ma)牛羊(yang)病和(he)水(shui)產(chan)動(dong)物(wu)病原(yuan)體檢測(ce)),精(jing)準高效(xiao),多(duo)重檢測(ce)(壹(yi)重、雙重、三(san)重),現貨(huo)供(gong)應歡迎(ying)廣大(da)新(xin)老客(ke)戶(hu)前(qian)來咨(zi)詢和(he)選購(gou)。
【試(shi)劑組成(cheng)】
包(bao)裝規(gui)格(ge) | 25T/盒(he) | 50T/盒(he) |
反(fan)應液(ye) | 500μL×1 管(guan) | 500μL×2 管(guan) |
酶液(ye) | 25μL×1 管(guan) | 50μL×1 管(guan) |
陽(yang)性質(zhi)控(kong)品 | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
陰性質(zhi)控(kong)品 | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
說(shuo)明:不同批號(hao)的(de)試(shi)劑盒(he)組分(fen)不(bu)可(ke)交互使(shi)用(yong)
【儲(chu)存(cun)條件(jian)及(ji)有(you)效(xiao)期】
-20℃±5℃,避(bi)光(guang)保存、運輸(shu)、反(fan)復(fu)凍融次數(shu)不超過(guo) 5 次,有(you)效(xiao)期 12 個(ge)月。
【適用(yong)儀(yi)器(qi)】 ABI7500、安(an)捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒(ying)光(guang)定(ding)量PCR 檢測(ce)儀(yi)。
【A 族鏈(lian)球(qiu)菌(GAS)核(he)酸(suan)試(shi)劑盒(熒光(guang)-PCR法(fa))使(shi)用(yong)方法(fa)】
1.樣品處理(li)(樣本(ben)處理(li)區(qu))
核(he)酸(suan)提(ti)取(qu) 推(tui)薦采(cai)用(yong)核(he)酸(suan)提(ti)取(qu)或純(chun)化(hua)試劑(磁(ci)珠(zhu)法(fa)或離心(xin)柱法(fa))進行(xing)核(he)酸(suan)提(ti)取(qu),請(qing)按照(zhao)試劑說(shuo)明書(shu)進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)。
2.試(shi)劑配制(zhi)(試劑(ji)準備區(qu))根(gen)據(ju)待(dai)檢測(ce)樣本(ben)總(zong)數(shu),設所(suo)需(xu)要的PCR 反(fan)應管(guan)管(guan)數(shu)為 N(N=樣本(ben)數(shu)+1 管(guan)陰性對(dui)照(zhao)+1 管(guan)陽(yang)性對(dui)照(zhao);反應管(guan)數(shu)每滿10 份(fen),多(duo)配制(zhi)1 份(fen)),每測(ce)試(shi)反(fan)應體系配制(zhi)如(ru)下表(biao):
試(shi)劑 | 反(fan)應液(ye) | 酶液(ye) |
用(yong)量(liang)(樣本(ben)數(shu)為 N) | 19μL | 1μL |
將(jiang)混(hun)合(he)好的(de)測(ce)試(shi)反(fan)應液(ye)分(fen)裝到 PCR 反(fan)應管(guan)中(zhong),20μL/管(guan)。
3.加樣(樣本(ben)處理(li)區(qu))將(jiang)步驟 1 提(ti)取(qu)的核(he)酸(suan)、陽(yang)性質(zhi)控(kong)品、陰性質(zhi)控(kong)品各取(qu)5μL,分(fen)別(bie)加入(ru)相應的(de)反(fan)應管(guan)中(zhong),蓋(gai)好管(guan)蓋(gai),混(hun)勻(yun),短(duan)暫(zan)離心(xin)。
4.PCR 擴增(zeng)(核(he)酸(suan)擴增(zeng)區(qu))
2.1 將(jiang)待檢測(ce)反(fan)應管(guan)置(zhi)於熒(ying)光(guang)定(ding)量 PCR 儀(yi)反(fan)應槽(cao)內;
2.2 設(she)置(zhi)好通(tong)道(dao)、樣品信息(xi),反(fan)應體系設置(zhi)為 25μL;熒(ying)光(guang)通(tong)道(dao)選擇(ze):檢測(ce)通(tong)道(dao)(Reporter Dye)FAM,淬(cui)滅(mie)通(tong)道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系列儀(yi)器(qi)請(qing)勿選擇(ze) ROX 參比(bi)熒光(guang),選擇(ze) None 即可。
2.3 推(tui)薦循環參數(shu)設置(zhi):
步(bu)驟 | 循環數(shu) | 溫(wen)度(du) | 時(shi)間 | 收集熒光(guang)信號(hao) |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否(fou) |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否(fou) |
60℃ | 30sec | 是 |
5.結(jie)果(guo)分(fen)析(xi)判(pan)定(ding)
5.1結(jie)果(guo)分(fen)析(xi)條件(jian)設定(ding)(請(qing)參照(zhao)各儀(yi)器(qi)使(shi)用(yong)說(shuo)明書(shu)進(jin)行(xing)設(she)置(zhi),以(yi)分(fen)析(xi) ABI7500 儀(yi)器(qi)為例(li)) 反(fan)應結(jie)束(shu)後自動(dong)保存結(jie)果(guo),根(gen)據(ju)分(fen)析(xi)後(hou)圖(tu)像(xiang)調(tiao)節(jie) Baseline 的(de) Start 值、End 值以(yi)及(ji) Threshold 值(用(yong)戶(hu)可(ke)根(gen) 據(ju)實(shi)際(ji)情況自(zi)行(xing)調(tiao)整(zheng),Start 值可設(she)在 3~15、End 值可設(she)在 5~20,使(shi)閾值線位於(yu)擴增(zeng)曲線指(zhi)數(shu)期,陰性質(zhi)控(kong) 品的擴增(zeng)曲線平(ping)直或(huo)低(di)於(yu)閾值線),點(dian)擊 Analyze 自(zi)動(dong)獲(huo)得(de)分(fen)析(xi)結(jie)果(guo)。
5.2結(jie)果(guo)判斷(duan)
陽(yang)性:檢測(ce)通(tong)道(dao)Ct 值≤40,且(qie)曲線有(you)明顯的(de)指(zhi)數(shu)增(zeng)長曲(qu)線;
陰性:樣本(ben)檢測(ce)結(jie)果(guo)無(wu)Ct 值,且(qie)無(wu)特(te)異(yi)性擴增(zeng)曲線;
可(ke)疑:樣本(ben)檢測(ce)結(jie)果(guo)40<Ct 值≤45,建(jian)議重復(fu)檢測(ce),如(ru)果(guo)檢測(ce)通(tong)道(dao)仍為40值≤45,且(qie)曲線有(you)明顯的(de)增(zeng)長 曲(qu)線,判(pan)定(ding)為陽(yang)性,否(fou)則(ze)為陰性。
5.3 質(zhi)控(kong)標準 陰性質(zhi)控(kong)品:無(wu)特(te)異(yi)性擴增(zeng)曲線或(huo)無(wu)Ct 值顯示(shi);陽(yang)性質(zhi)控(kong)品:擴增(zeng)曲線有(you)明顯指(zhi)數(shu)增(zeng)長期(qi),且(qie) Ct 值≤32;以(yi)上條件(jian)應同(tong)時(shi)滿足,否(fou)則(ze)實驗(yan)視(shi)為無(wu)效(xiao)。
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