產品(pin)簡介

單(dan)增(zeng)李(li)斯(si)特菌(jun)(LM)核酸(suan)試(shi)劑(ji)盒(熒(ying)光(guang)-PCR法)是(shi)我(wo)司實(shi)時(shi)熒光(guang)探針(zhen)法試(shi)劑(ji)盒,種(zhong)類(lei)齊全(quan),精(jing)準(zhun)高效(xiao)，現貨供(gong)應(ying),歡(huan)迎廣(guang)大新老(lao)客(ke)戶(hu)前來(lai)選(xuan)購。

【產品(pin)名(ming)稱】

商品(pin)名(ming)稱：單(dan)增李(li)斯(si)特菌(jun)(LM)核酸(suan)試(shi)劑(ji)盒(熒(ying)光(guang)-PCR法)

【包裝規格(ge)】25T/盒(he)、50T/盒(he)

【檢(jian)驗原理(li)】本(ben)試(shi)劑(ji)盒采(cai)用TaqMan 探(tan)針法(fa)實(shi)時(shi)熒光(guang)PCR 技術，根據(ju)單(dan)增李(li)斯(si)特菌(jun)(LM)基(ji)因設計特(te)異(yi)性(xing)引(yin)物(wu)和熒光(guang)探針(zhen)，用熒光(guang)PCR技術對(dui)單(dan)增李(li)斯(si)特菌(jun)(LM)的(de)核酸(suan)進行體外(wai)擴(kuo)增(zeng)檢測，用於臨床上對(dui)可疑感染病料的(de)病原學(xue)診(zhen)斷。

我(wo)司的(de)實(shi)時(shi)熒光(guang)探針(zhen)法試(shi)劑(ji)盒種(zhong)類(lei)齊全(quan)（涵蓋禽(qin)病(bing)、豬病、馬(ma)牛羊(yang)病和水產動(dong)物(wu)病(bing)原(yuan)體(ti)檢測），精(jing)準(zhun)高效(xiao)，多(duo)重(zhong)檢(jian)測（壹重、雙重、三重(zhong)），現(xian)貨供(gong)應(ying)歡(huan)迎廣(guang)大新老(lao)客(ke)戶(hu)前來(lai)咨詢和選(xuan)購。

【試(shi)劑(ji)組成】

說明(ming)：不(bu)同(tong)批號(hao)的(de)試(shi)劑(ji)盒組分不(bu)可(ke)交(jiao)互(hu)使用

【儲(chu)存條件(jian)及(ji)有(you)效(xiao)期(qi)】

 -20℃±5℃，避(bi)光(guang)保存(cun)、運輸(shu)、反(fan)復(fu)凍融次數(shu)不(bu)超過 5 次(ci)，有(you)效(xiao)期(qi) 12 個(ge)月。

【適(shi)用儀器】 ABI7500、安(an)捷(jie)倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系列熒光(guang)定量(liang)PCR 檢(jian)測儀。

【單(dan)增李(li)斯(si)特菌(jun)(LM)核酸(suan)試(shi)劑(ji)盒(熒(ying)光(guang)-PCR法)使(shi)用方法】

1.樣品(pin)處理(li)（樣本處(chu)理(li)區）

 核酸(suan)提(ti)取(qu) 推(tui)薦采用核酸(suan)提(ti)取(qu)或(huo)純化試(shi)劑(ji)（磁珠(zhu)法(fa)或(huo)離心柱法）進行核酸(suan)提(ti)取(qu)，請按照試(shi)劑(ji)說明(ming)書(shu)進行操(cao)作。

2.試(shi)劑(ji)配制（試(shi)劑(ji)準備(bei)區）根(gen)據待檢測樣本總數(shu)，設(she)所(suo)需(xu)要的(de)PCR 反(fan)應管(guan)管(guan)數(shu)為(wei) N(N=樣本數(shu)+1 管(guan)陰(yin)性(xing)對(dui)照+1 管(guan)陽(yang)性(xing)對(dui)照；反(fan)應管(guan)數(shu)每(mei)滿(man)10 份(fen)，多(duo)配制1 份(fen))，每(mei)測試(shi)反(fan)應體(ti)系配制如下表：

將(jiang)混(hun)合(he)好(hao)的(de)測試(shi)反(fan)應液(ye)分裝到 PCR 反(fan)應管(guan)中(zhong)，20μL/管(guan)。

3.加樣（樣本處(chu)理(li)區）將(jiang)步(bu)驟(zhou) 1 提(ti)取的(de)核酸(suan)、陽(yang)性(xing)質控(kong)品(pin)、陰(yin)性(xing)質控(kong)品(pin)各取(qu)5μL，分別(bie)加入相應的(de)反(fan)應管(guan)中(zhong)，蓋好(hao)管(guan)蓋，混(hun)勻(yun)，短暫(zan)離心。

4.PCR 擴(kuo)增（核酸(suan)擴(kuo)增(zeng)區）

2.1 將(jiang)待檢測反(fan)應管(guan)置(zhi)於(yu)熒光(guang)定量(liang) PCR 儀(yi)反(fan)應槽內(nei)；

2.2 設(she)置好(hao)通(tong)道(dao)、樣品(pin)信(xin)息(xi)，反(fan)應體(ti)系設置為(wei) 25μL；熒(ying)光(guang)通道(dao)選(xuan)擇：檢(jian)測通道（Reporter Dye）FAM，淬(cui)滅通道(dao)（Quencher Dye）NONE，ABI 系列儀器請勿(wu)選(xuan)擇 ROX 參(can)比熒(ying)光(guang)，選(xuan)擇 None 即(ji)可。

2.3 推(tui)薦循環參數(shu)設(she)置(zhi)：

5.結(jie)果(guo)分析(xi)判定(ding)

5.1結(jie)果(guo)分析(xi)條件(jian)設(she)定(ding)（請參照各(ge)儀器使用說明(ming)書(shu)進行設置(zhi)，以分析(xi) ABI7500 儀(yi)器為(wei)例） 反(fan)應結(jie)束後自(zi)動(dong)保(bao)存(cun)結(jie)果(guo)，根據(ju)分析(xi)後圖(tu)像(xiang)調節 Baseline 的(de) Start 值(zhi)、End 值(zhi)以及(ji) Threshold 值(zhi)（用戶(hu)可根(gen) 據(ju)實(shi)際(ji)情況自(zi)行調整(zheng)，Start 值(zhi)可設在 3～15、End 值(zhi)可設在 5～20，使(shi)閾(yu)值(zhi)線位(wei)於擴增曲線指(zhi)數(shu)期(qi)，陰(yin)性(xing)質控(kong) 品(pin)的(de)擴增曲線平(ping)直或(huo)低(di)於閾(yu)值(zhi)線），點擊(ji) Analyze 自(zi)動(dong)獲得(de)分析(xi)結(jie)果(guo)。

5.2結(jie)果(guo)判斷(duan)

陽(yang)性(xing)：檢(jian)測通道Ct 值(zhi)≤40，且(qie)曲線有(you)明(ming)顯(xian)的(de)指(zhi)數(shu)增(zeng)長(chang)曲線；

陰(yin)性(xing)：樣本檢(jian)測結(jie)果(guo)無(wu)Ct 值(zhi)，且(qie)無(wu)特異(yi)性(xing)擴(kuo)增曲線；

可(ke)疑：樣本檢(jian)測結(jie)果(guo)40＜Ct 值(zhi)≤45，建(jian)議重(zhong)復(fu)檢測，如果(guo)檢測通道仍(reng)為(wei)40值(zhi)≤45，且(qie)曲線有(you)明(ming)顯(xian)的(de)增長(chang) 曲線，判(pan)定(ding)為(wei)陽(yang)性(xing)，否(fou)則(ze)為(wei)陰(yin)性(xing)。

5.3 質控(kong)標準(zhun) 陰(yin)性(xing)質控(kong)品(pin)：無(wu)特異(yi)性(xing)擴(kuo)增曲線或(huo)無(wu)Ct 值(zhi)顯(xian)示；陽性(xing)質控(kong)品(pin)：擴增(zeng)曲線有(you)明(ming)顯(xian)指(zhi)數(shu)增(zeng)長(chang)期(qi)，且(qie) Ct 值(zhi)≤32；以上(shang)條件(jian)應(ying)同(tong)時(shi)滿足，否(fou)則(ze)實(shi)驗視(shi)為(wei)無(wu)效。

【產品(pin)推(tui)薦】