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PCR試劑(ji)盒(he)
其(qi)他(ta)PCR試劑(ji)盒(he)
50T霍(huo)亂弧(hu)菌O1(VC O1)核(he)酸(suan)試劑(ji)盒(he)(熒光-PCR法(fa))





產(chan)品(pin)簡介(jie)
霍(huo)亂弧(hu)菌O1(VC O1)核(he)酸(suan)試劑(ji)盒(he)(熒光-PCR法(fa))是(shi)我(wo)司(si)實時(shi)熒光探(tan)針法(fa)試劑(ji)盒(he),種類(lei)齊全(quan),精(jing)準(zhun)高(gao)效(xiao),現貨(huo)供應(ying),歡(huan)迎廣大新老客(ke)戶(hu)前(qian)來(lai)選(xuan)購。
產(chan)品(pin)分(fen)類(lei)
【產(chan)品(pin)名稱(cheng)】
商(shang)品(pin)名稱(cheng):霍(huo)亂弧(hu)菌O1(VC O1)核(he)酸(suan)試劑(ji)盒(he)(熒光-PCR法(fa))
【包裝規(gui)格】25T/盒(he)、50T/盒(he)
【檢(jian)驗原理】本(ben)試劑(ji)盒(he)采用TaqMan 探(tan)針法(fa)實時(shi)熒光PCR 技術,根(gen)據(ju)霍(huo)亂弧(hu)菌O1(VC O1)基(ji)因設計特異(yi)性(xing)引(yin)物(wu)和熒光探(tan)針,用熒光PCR技術對霍(huo)亂弧(hu)菌O1(VC O1)的(de)核酸(suan)進(jin)行體外(wai)擴(kuo)增(zeng)檢(jian)測(ce),用於臨(lin)床(chuang)上對(dui)可(ke)疑感染病料(liao)的(de)病原(yuan)學診(zhen)斷(duan)。
我(wo)司的實時(shi)熒光探(tan)針法(fa)試劑(ji)盒(he)種類(lei)齊全(quan)(涵蓋禽病、豬(zhu)病、馬(ma)牛羊病和(he)水(shui)產(chan)動物病原(yuan)體檢(jian)測(ce)),精(jing)準(zhun)高(gao)效(xiao),多(duo)重檢(jian)測(ce)(壹(yi)重、雙重、三(san)重(zhong)),現貨(huo)供應(ying)歡(huan)迎廣大新老客(ke)戶(hu)前(qian)來(lai)咨(zi)詢(xun)和(he)選(xuan)購。
【試劑(ji)組(zu)成】
包裝規(gui)格 | 25T/盒(he) | 50T/盒(he) |
反應(ying)液(ye) | 500μL×1 管(guan) | 500μL×2 管(guan) |
酶(mei)液 | 25μL×1 管(guan) | 50μL×1 管(guan) |
陽性質(zhi)控(kong)品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
陰(yin)性質(zhi)控(kong)品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
說(shuo)明:不同批(pi)號(hao)的(de)試劑(ji)盒(he)組分(fen)不(bu)可(ke)交(jiao)互(hu)使(shi)用
【儲(chu)存條(tiao)件及(ji)有效(xiao)期】
-20℃±5℃,避光保存、運輸、反復(fu)凍融(rong)次數(shu)不超(chao)過 5 次,有效(xiao)期 12 個(ge)月。
【適(shi)用儀器】 ABI7500、安捷倫(lun) MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列(lie)熒光定量(liang)PCR 檢(jian)測(ce)儀(yi)。
【霍(huo)亂弧(hu)菌O1(VC O1)核(he)酸(suan)試劑(ji)盒(he)(熒光-PCR法(fa))使(shi)用方法(fa)】
1.樣品(pin)處理(樣本處理區(qu))
核(he)酸(suan)提取 推(tui)薦采用核酸(suan)提取或純化試劑(ji)(磁珠(zhu)法(fa)或(huo)離(li)心(xin)柱(zhu)法(fa))進(jin)行(xing)核(he)酸(suan)提取,請按照試劑(ji)說(shuo)明書進行(xing)操(cao)作(zuo)。
2.試劑(ji)配(pei)制(試劑(ji)準(zhun)備(bei)區(qu))根(gen)據(ju)待檢(jian)測(ce)樣本總數(shu),設所(suo)需要(yao)的(de)PCR 反應(ying)管(guan)管(guan)數(shu)為 N(N=樣本數(shu)+1 管(guan)陰性(xing)對照(zhao)+1 管(guan)陽性對(dui)照(zhao);反應(ying)管(guan)數(shu)每滿(man)10 份(fen),多(duo)配制1 份(fen)),每(mei)測(ce)試反應(ying)體系(xi)配制如下(xia)表(biao):
試劑(ji) | 反應(ying)液(ye) | 酶(mei)液 |
用量(樣本數(shu)為 N) | 19μL | 1μL |
將(jiang)混(hun)合(he)好的(de)測(ce)試反應(ying)液(ye)分(fen)裝(zhuang)到(dao) PCR 反應(ying)管(guan)中,20μL/管(guan)。
3.加樣(樣本處理區(qu))將(jiang)步驟 1 提取的核(he)酸(suan)、陽性質(zhi)控(kong)品(pin)、陰性質(zhi)控(kong)品(pin)各取5μL,分(fen)別(bie)加入相(xiang)應(ying)的(de)反應(ying)管(guan)中,蓋好管(guan)蓋,混勻,短(duan)暫(zan)離(li)心(xin)。
4.PCR 擴(kuo)增(zeng)(核酸(suan)擴(kuo)增(zeng)區)
2.1 將(jiang)待檢(jian)測(ce)反應(ying)管(guan)置(zhi)於熒光定量(liang) PCR 儀(yi)反應(ying)槽(cao)內;
2.2 設(she)置(zhi)好通(tong)道、樣品(pin)信息,反應(ying)體系(xi)設置(zhi)為 25μL;熒光通(tong)道選(xuan)擇:檢(jian)測(ce)通(tong)道(Reporter Dye)FAM,淬(cui)滅(mie)通(tong)道(Quencher Dye)NONE,ABI 系(xi)列儀器請勿選(xuan)擇 ROX 參比熒光,選(xuan)擇 None 即(ji)可(ke)。
2.3 推(tui)薦循(xun)環參數(shu)設置(zhi):
步驟 | 循(xun)環數(shu) | 溫(wen)度(du) | 時(shi)間(jian) | 收(shou)集熒光信(xin)號(hao) |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否 |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否 |
60℃ | 30sec | 是(shi) |
5.結(jie)果(guo)分(fen)析(xi)判(pan)定
5.1結(jie)果(guo)分(fen)析(xi)條(tiao)件設定(請(qing)參照各(ge)儀器(qi)使(shi)用說明書進(jin)行(xing)設(she)置(zhi),以(yi)分(fen)析(xi) ABI7500 儀(yi)器為例) 反應(ying)結(jie)束(shu)後(hou)自(zi)動保存結(jie)果(guo),根(gen)據(ju)分(fen)析(xi)後(hou)圖(tu)像(xiang)調(tiao)節 Baseline 的(de) Start 值(zhi)、End 值(zhi)以(yi)及(ji) Threshold 值(zhi)(用戶可(ke)根(gen) 據(ju)實際(ji)情(qing)況自(zi)行調(tiao)整,Start 值(zhi)可(ke)設(she)在 3~15、End 值(zhi)可(ke)設(she)在 5~20,使(shi)閾(yu)值(zhi)線位於擴(kuo)增(zeng)曲線(xian)指(zhi)數(shu)期,陰性質(zhi)控(kong) 品(pin)的擴(kuo)增(zeng)曲線(xian)平(ping)直(zhi)或(huo)低(di)於閾(yu)值(zhi)線),點擊 Analyze 自(zi)動獲(huo)得分(fen)析(xi)結(jie)果(guo)。
5.2結(jie)果(guo)判斷(duan)
陽性:檢(jian)測(ce)通(tong)道Ct 值(zhi)≤40,且(qie)曲(qu)線(xian)有明顯的(de)指數(shu)增(zeng)長(chang)曲(qu)線(xian);
陰(yin)性:樣本檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)無(wu)Ct 值(zhi),且(qie)無(wu)特(te)異性擴(kuo)增(zeng)曲線(xian);
可(ke)疑:樣本檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)40<Ct 值(zhi)≤45,建(jian)議(yi)重復(fu)檢(jian)測(ce),如(ru)果(guo)檢(jian)測(ce)通(tong)道仍(reng)為40值(zhi)≤45,且(qie)曲(qu)線(xian)有明顯的(de)增(zeng)長(chang) 曲(qu)線,判定為陽性,否則(ze)為陰性(xing)。
5.3 質(zhi)控(kong)標準(zhun) 陰(yin)性質(zhi)控(kong)品(pin):無(wu)特(te)異性擴(kuo)增(zeng)曲線(xian)或(huo)無(wu)Ct 值(zhi)顯示(shi);陽性質(zhi)控(kong)品(pin):擴(kuo)增(zeng)曲線(xian)有明顯指(zhi)數(shu)增(zeng)長(chang)期,且(qie) Ct 值(zhi)≤32;以(yi)上條(tiao)件應(ying)同時(shi)滿(man)足(zu),否則(ze)實驗視為無(wu)效(xiao)。
【產(chan)品(pin)推薦】
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| ZK-D-0293 | 白(bai)色(se)念(nian)珠(zhu)菌(CAN)核(he)酸(suan)試劑(ji)盒(he)(熒光-PCR法(fa)) |
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| ZK-D-0295 | 艱難梭(suo)菌(TCD-A)核(he)酸(suan)試劑(ji)盒(he)(熒光-PCR法(fa)) |
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| ZK-D-0297 | 肺(fei)炎(yan)鏈(lian)球菌(SP)/肺(fei)炎(yan)雙球(qiu)菌核(he)酸(suan)試劑(ji)盒(he)(熒光-PCR法(fa)) |
| ZK-D-0298 | 單(dan)增(zeng)李(li)斯(si)特(te)菌(LM)核(he)酸(suan)試劑(ji)盒(he)(熒光-PCR法(fa)) |
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