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PCR試(shi)劑盒
其(qi)他PCR試(shi)劑盒
50TQ熱立克次體(ti)(CB)核(he)酸試(shi)劑盒(熒(ying)光(guang)PCR法)





產品簡(jian)介
Q熱立克次體(ti)(CB)核(he)酸試(shi)劑盒(熒(ying)光(guang)PCR法)是我(wo)司(si)實時(shi)熒光探針法試(shi)劑盒,種(zhong)類(lei)齊(qi)全(quan),精(jing)準高效(xiao),現(xian)貨(huo)供應(ying),歡(huan)迎(ying)廣(guang)大新(xin)老(lao)客(ke)戶前來(lai)選購。
產品分(fen)類(lei)
【產品名(ming)稱(cheng)】
商品名(ming)稱(cheng):Q熱立克次體(ti)(CB)核(he)酸試(shi)劑盒(熒(ying)光(guang)PCR法)
【包裝規格】25T/盒、50T/盒
【檢驗(yan)原(yuan)理】本試(shi)劑盒采(cai)用(yong)TaqMan 探針法實(shi)時熒(ying)光PCR 技(ji)術(shu),根(gen)據(ju)Q熱立克次體(ti)(CB)基因(yin)設計(ji)特異(yi)性引(yin)物和熒(ying)光(guang)探針,用熒(ying)光PCR技(ji)術(shu)對Q熱立克次體(ti)(CB)的核(he)酸進行(xing)體(ti)外擴(kuo)增檢(jian)測,用於臨(lin)床(chuang)上(shang)對可(ke)疑感染(ran)病(bing)料的病(bing)原(yuan)學(xue)診斷。
我司(si)的實時熒光探(tan)針法試(shi)劑盒種(zhong)類(lei)齊(qi)全(quan)(涵(han)蓋禽病(bing)、豬病(bing)、馬牛羊(yang)病(bing)和水(shui)產動(dong)物病(bing)原(yuan)體(ti)檢測),精(jing)準高效(xiao),多(duo)重(zhong)檢(jian)測(壹重、雙重、三重),現貨(huo)供應(ying)歡(huan)迎(ying)廣(guang)大新(xin)老(lao)客(ke)戶前來(lai)咨(zi)詢(xun)和選購。
【試(shi)劑組成(cheng)】
包裝規格 | 25T/盒 | 50T/盒 |
反(fan)應(ying)液(ye) | 500μL×1 管 | 500μL×2 管 |
酶液(ye) | 25μL×1 管 | 50μL×1 管 |
陽性質(zhi)控品 | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
陰性質(zhi)控品 | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
說(shuo)明:不同(tong)批號(hao)的試(shi)劑盒組(zu)分(fen)不可交互(hu)使(shi)用(yong)
【儲(chu)存(cun)條件及有效期(qi)】
-20℃±5℃,避光(guang)保(bao)存、運(yun)輸(shu)、反(fan)復凍(dong)融(rong)次數不(bu)超(chao)過(guo) 5 次,有(you)效期 12 個(ge)月。
【適用(yong)儀器(qi)】 ABI7500、安(an)捷(jie)倫(lun) MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系(xi)列(lie)熒(ying)光定量PCR 檢測儀。
【Q熱立克次體(ti)(CB)核(he)酸試(shi)劑盒(熒(ying)光(guang)PCR法)使(shi)用(yong)方(fang)法】
1.樣品處理(樣本(ben)處理區)
核(he)酸提取 推薦采(cai)用(yong)核(he)酸提取或純(chun)化試(shi)劑(磁(ci)珠(zhu)法(fa)或離(li)心(xin)柱法)進行核(he)酸提取,請(qing)按照試(shi)劑說(shuo)明書進(jin)行操作。
2.試(shi)劑配(pei)制(zhi)(試(shi)劑準備(bei)區(qu))根(gen)據(ju)待(dai)檢(jian)測樣本總數,設(she)所(suo)需(xu)要的PCR 反(fan)應(ying)管(guan)管(guan)數為 N(N=樣本(ben)數+1 管陰性對(dui)照(zhao)+1 管陽(yang)性對(dui)照(zhao);反(fan)應(ying)管(guan)數每(mei)滿(man)10 份(fen),多(duo)配(pei)制(zhi)1 份(fen)),每(mei)測試(shi)反(fan)應(ying)體(ti)系配(pei)制(zhi)如(ru)下(xia)表:
試(shi)劑 | 反(fan)應(ying)液(ye) | 酶液(ye) |
用量(樣本數為 N) | 19μL | 1μL |
將混合(he)好(hao)的測試(shi)反(fan)應(ying)液(ye)分(fen)裝到 PCR 反(fan)應(ying)管(guan)中,20μL/管。
3.加(jia)樣(yang)(樣本處理區)將步(bu)驟 1 提取的核(he)酸、陽性質(zhi)控品、陰性質(zhi)控品各(ge)取(qu)5μL,分(fen)別加(jia)入(ru)相(xiang)應(ying)的反(fan)應(ying)管(guan)中,蓋好管(guan)蓋,混勻,短(duan)暫(zan)離(li)心(xin)。
4.PCR 擴(kuo)增(核(he)酸擴(kuo)增區(qu))
2.1 將待(dai)檢(jian)測反(fan)應(ying)管(guan)置(zhi)於熒(ying)光定(ding)量 PCR 儀反(fan)應(ying)槽內(nei);
2.2 設置(zhi)好通道、樣(yang)品信(xin)息(xi),反(fan)應(ying)體(ti)系設(she)置(zhi)為 25μL;熒光(guang)通道選(xuan)擇(ze):檢測通道(Reporter Dye)FAM,淬滅(mie)通道(Quencher Dye)NONE,ABI 系列(lie)儀(yi)器(qi)請(qing)勿選擇 ROX 參比(bi)熒(ying)光,選擇(ze) None 即(ji)可(ke)。
2.3 推薦循環(huan)參數設(she)置(zhi):
步驟(zhou) | 循環(huan)數 | 溫度(du) | 時間(jian) | 收集熒光信(xin)號(hao) |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否 |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否 |
60℃ | 30sec | 是 |
5.結(jie)果分(fen)析判定
5.1結(jie)果分(fen)析條件設定(請(qing)參照各儀(yi)器(qi)使(shi)用(yong)說(shuo)明書進(jin)行設置(zhi),以(yi)分(fen)析 ABI7500 儀器(qi)為例(li)) 反(fan)應(ying)結(jie)束(shu)後(hou)自動(dong)保(bao)存結(jie)果,根(gen)據(ju)分(fen)析後圖像調(tiao)節(jie) Baseline 的 Start 值、End 值以(yi)及 Threshold 值(用(yong)戶可(ke)根(gen) 據(ju)實際情(qing)況自行調(tiao)整(zheng),Start 值可(ke)設在 3~15、End 值可(ke)設在 5~20,使(shi)閾(yu)值(zhi)線(xian)位於(yu)擴(kuo)增曲(qu)線(xian)指數期(qi),陰性質(zhi)控 品的擴(kuo)增曲(qu)線(xian)平(ping)直(zhi)或低(di)於閾值線(xian)),點擊 Analyze 自動(dong)獲(huo)得分(fen)析結(jie)果。
5.2結(jie)果判(pan)斷
陽性:檢(jian)測通道Ct 值≤40,且曲(qu)線(xian)有明顯的指數增(zeng)長曲(qu)線(xian);
陰性:樣(yang)本(ben)檢測結(jie)果無(wu)Ct 值,且無(wu)特異(yi)性擴(kuo)增曲(qu)線(xian);
可疑(yi):樣本(ben)檢測結(jie)果40<Ct 值≤45,建(jian)議(yi)重(zhong)復檢(jian)測,如果檢(jian)測通道仍(reng)為40值≤45,且曲(qu)線(xian)有明顯的增長 曲(qu)線(xian),判定(ding)為陽(yang)性,否則(ze)為陰性。
5.3 質(zhi)控標(biao)準 陰性質(zhi)控品:無(wu)特異(yi)性擴(kuo)增曲(qu)線(xian)或無(wu)Ct 值顯(xian)示;陽(yang)性質(zhi)控品:擴(kuo)增曲(qu)線(xian)有明顯指數增(zeng)長期,且 Ct 值≤32;以(yi)上(shang)條件應(ying)同(tong)時(shi)滿(man)足,否則(ze)實(shi)驗(yan)視為無(wu)效(xiao)。
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