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50T嗜吞(tun)噬細(xi)胞(bao)無(wu)形體(ti)(AP)PCR檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)





產品(pin)簡(jian)介
嗜吞(tun)噬細(xi)胞(bao)無(wu)形體(ti)(AP)PCR檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)是我司(si)實(shi)時熒光探針法試劑(ji)盒(he),種類齊全(quan),精(jing)準(zhun)高效(xiao),現(xian)貨供應,歡迎廣(guang)大(da)新(xin)老(lao)客戶(hu)前(qian)來(lai)選(xuan)購(gou)。
產品(pin)分(fen)類(lei)
【產品(pin)名(ming)稱(cheng)】
商品(pin)名(ming)稱(cheng):嗜吞(tun)噬細(xi)胞(bao)無(wu)形體(ti)(AP)PCR檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)
【包裝(zhuang)規格(ge)】25T/盒(he)、50T/盒(he)
【檢(jian)驗(yan)原(yuan)理】本試劑(ji)盒(he)采用TaqMan 探針法實(shi)時熒光PCR 技術,根(gen)據(ju)嗜吞(tun)噬細(xi)胞(bao)無(wu)形體(ti)(AP)基(ji)因設計(ji)特(te)異(yi)性(xing)引物(wu)和(he)熒(ying)光探針,用熒(ying)光PCR技術對(dui)嗜吞(tun)噬細(xi)胞(bao)無(wu)形體(ti)(AP)的核(he)酸進(jin)行(xing)體(ti)外擴增(zeng)檢(jian)測(ce),用於臨床(chuang)上對可疑(yi)感(gan)染(ran)病(bing)料的病(bing)原(yuan)學診(zhen)斷(duan)。
我司(si)的實(shi)時熒光探針法試劑(ji)盒(he)種類齊全(quan)(涵蓋禽病(bing)、豬(zhu)病(bing)、馬(ma)牛(niu)羊病(bing)和(he)水產動(dong)物(wu)病(bing)原(yuan)體(ti)檢(jian)測(ce)),精(jing)準(zhun)高效(xiao),多重(zhong)檢(jian)測(ce)(壹(yi)重(zhong)、雙重(zhong)、三重(zhong)),現(xian)貨供應歡迎廣(guang)大(da)新(xin)老(lao)客戶(hu)前(qian)來(lai)咨詢和(he)選購(gou)。
【試劑(ji)組(zu)成】
包裝(zhuang)規格(ge) | 25T/盒(he) | 50T/盒(he) |
反應(ying)液 | 500μL×1 管(guan) | 500μL×2 管(guan) |
酶液 | 25μL×1 管(guan) | 50μL×1 管(guan) |
陽性(xing)質控品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
陰性(xing)質控品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
說明:不同(tong)批(pi)號的試劑(ji)盒(he)組分(fen)不(bu)可交互(hu)使用
【儲存(cun)條(tiao)件(jian)及有效(xiao)期】
-20℃±5℃,避(bi)光保存(cun)、運輸(shu)、反(fan)復(fu)凍融(rong)次(ci)數不(bu)超過 5 次(ci),有效(xiao)期 12 個月(yue)。
【適用儀(yi)器(qi)】 ABI7500、安捷(jie)倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系(xi)列熒光定(ding)量(liang)PCR 檢(jian)測(ce)儀(yi)。
【嗜吞(tun)噬細(xi)胞(bao)無(wu)形體(ti)(AP)PCR檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)(熒光-PCR法)使用方(fang)法】
1.樣品(pin)處理(li)(樣本處(chu)理(li)區)
核酸提取 推薦采(cai)用核(he)酸提取或(huo)純化(hua)試劑(ji)(磁(ci)珠(zhu)法或離(li)心柱(zhu)法)進(jin)行(xing)核(he)酸提取,請(qing)按(an)照(zhao)試劑(ji)說明書進(jin)行(xing)操作。
2.試劑(ji)配(pei)制(試劑(ji)準(zhun)備區)根(gen)據(ju)待檢(jian)測(ce)樣本總(zong)數(shu),設所(suo)需要(yao)的PCR 反應(ying)管(guan)管(guan)數為(wei) N(N=樣本數(shu)+1 管(guan)陰性(xing)對照(zhao)+1 管(guan)陽性(xing)對照(zhao);反應(ying)管(guan)數每(mei)滿(man)10 份,多(duo)配(pei)制1 份),每測(ce)試反(fan)應(ying)體(ti)系配(pei)制如(ru)下(xia)表(biao):
試劑(ji) | 反應(ying)液 | 酶液 |
用量(liang)(樣本數(shu)為(wei) N) | 19μL | 1μL |
將混(hun)合(he)好(hao)的測(ce)試反(fan)應(ying)液分(fen)裝(zhuang)到(dao) PCR 反應(ying)管(guan)中,20μL/管(guan)。
3.加樣(樣本處(chu)理(li)區)將步(bu)驟(zhou) 1 提取(qu)的核(he)酸、陽性(xing)質控品(pin)、陰性(xing)質控品(pin)各(ge)取(qu)5μL,分(fen)別(bie)加入相應的反(fan)應(ying)管(guan)中,蓋(gai)好(hao)管(guan)蓋,混(hun)勻,短(duan)暫(zan)離(li)心。
4.PCR 擴增(zeng)(核(he)酸擴增(zeng)區)
2.1 將待檢(jian)測(ce)反應(ying)管(guan)置於熒(ying)光定(ding)量(liang) PCR 儀(yi)反(fan)應(ying)槽內(nei);
2.2 設置(zhi)好(hao)通道(dao)、樣品(pin)信(xin)息(xi),反應體(ti)系設置(zhi)為 25μL;熒光通道(dao)選擇:檢(jian)測(ce)通道(dao)(Reporter Dye)FAM,淬滅(mie)通道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系列儀(yi)器(qi)請勿(wu)選擇 ROX 參比熒光,選擇 None 即可。
2.3 推薦循環參數設置(zhi):
步驟(zhou) | 循環數 | 溫度(du) | 時間 | 收集(ji)熒光信(xin)號(hao) |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否(fou) |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否(fou) |
60℃ | 30sec | 是 |
5.結果(guo)分(fen)析(xi)判(pan)定(ding)
5.1結果(guo)分(fen)析(xi)條(tiao)件(jian)設定(ding)(請參(can)照(zhao)各(ge)儀(yi)器(qi)使用說明書進(jin)行(xing)設置(zhi),以分(fen)析(xi) ABI7500 儀(yi)器(qi)為例(li)) 反應(ying)結(jie)束(shu)後自(zi)動(dong)保(bao)存(cun)結(jie)果(guo),根(gen)據(ju)分(fen)析(xi)後(hou)圖(tu)像調節 Baseline 的 Start 值、End 值以(yi)及 Threshold 值(用戶(hu)可根(gen) 據實(shi)際情(qing)況(kuang)自行(xing)調整(zheng),Start 值可設在 3~15、End 值可設在 5~20,使閾值線(xian)位於擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)指(zhi)數(shu)期(qi),陰(yin)性(xing)質控 品(pin)的擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)平(ping)直(zhi)或(huo)低於閾值線(xian)),點(dian)擊 Analyze 自動(dong)獲(huo)得(de)分(fen)析(xi)結(jie)果(guo)。
5.2結果(guo)判(pan)斷(duan)
陽性(xing):檢(jian)測(ce)通道(dao)Ct 值≤40,且(qie)曲線(xian)有(you)明顯的指(zhi)數(shu)增(zeng)長(chang)曲線(xian);
陰性(xing):樣本檢(jian)測(ce)結果(guo)無(wu)Ct 值,且(qie)無(wu)特(te)異(yi)性(xing)擴增(zeng)曲(qu)線(xian);
可疑(yi):樣本檢(jian)測(ce)結果(guo)40<Ct 值≤45,建議(yi)重(zhong)復(fu)檢(jian)測(ce),如(ru)果檢(jian)測(ce)通道(dao)仍為(wei)40值≤45,且(qie)曲線(xian)有(you)明顯的增(zeng)長(chang) 曲線(xian),判(pan)定(ding)為(wei)陽(yang)性(xing),否(fou)則(ze)為(wei)陰(yin)性(xing)。
5.3 質控標(biao)準(zhun) 陰性(xing)質控品(pin):無(wu)特(te)異(yi)性(xing)擴增(zeng)曲(qu)線(xian)或(huo)無(wu)Ct 值顯示;陽性(xing)質控品(pin):擴增(zeng)曲(qu)線(xian)有(you)明顯指數增(zeng)長(chang)期,且(qie) Ct 值≤32;以上條件(jian)應同時滿足,否(fou)則(ze)實(shi)驗(yan)視為無(wu)效(xiao)。
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