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PCR試(shi)劑(ji)盒
禽(qin)類(lei)PCR試(shi)劑盒
50T禽(qin)流感病毒N3亞(ya)型(xing)(AIV-N3)PCR檢(jian)測試(shi)劑盒
產品簡介(jie)
禽(qin)流感病毒N3亞(ya)型(xing)(AIV-N3)PCR檢(jian)測試(shi)劑盒是我司實(shi)時(shi)熒(ying)光(guang)探針(zhen)法試(shi)劑盒,種類(lei)齊(qi)全(quan),精準高(gao)效(xiao),現貨(huo)供應(ying),歡(huan)迎廣(guang)大新老(lao)客(ke)戶前(qian)來(lai)選(xuan)購(gou)。
產(chan)品分類(lei)
【產(chan)品名(ming)稱】
商品名(ming)稱(cheng):禽(qin)流感病毒N3亞(ya)型(xing)(AIV-N3)PCR檢(jian)測試(shi)劑盒(he)(熒(ying)光(guang)PCR 法)
【包裝(zhuang)規格(ge)】25T/盒(he)、50T/盒(he)
【檢(jian)驗(yan)原理】本(ben)試劑(ji)盒采用TaqMan 探針(zhen)法實(shi)時(shi)熒(ying)光(guang)PCR 技術,根(gen)據(ju) 禽(qin)流感病毒N3亞(ya)型(xing)(AIV-N3)基(ji)因設計(ji)特(te)異(yi)性(xing)引物(wu)和熒(ying)光(guang)探針(zhen),用熒(ying)光(guang)PCR技術對(dui)禽(qin)流感病毒N3亞(ya)型(xing)(AIV-N3)的(de)核酸進行(xing)體(ti)外(wai)擴(kuo)增(zeng)檢(jian)測,用於臨(lin)床(chuang)上(shang)對可疑(yi)感染(ran)病(bing)料(liao)的(de)病原學診斷(duan)。
【試(shi)劑組(zu)成(cheng)】
| 包裝(zhuang)規格(ge) | 25T/盒(he) | 50T/盒(he) |
| 反應(ying)液 | 500μL×1 管(guan) | 500μL×2 管(guan) |
| 酶液(ye) | 25μL×1 管(guan) | 50μL×1 管(guan) |
| 陽(yang)性(xing)質控(kong)品 | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
| 陰(yin)性(xing)質控(kong)品 | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
說明:不同批號的(de)試劑(ji)盒組分不可交互(hu)使用
【儲(chu)存條(tiao)件及(ji)有(you)效(xiao)期(qi)】
-20℃±5℃,避(bi)光(guang)保存(cun)、運輸(shu)、反復凍融次數不超過(guo) 5 次,有(you)效(xiao)期(qi) 12 個(ge)月。
【適用儀(yi)器(qi)】 ABI7500、安(an)捷倫(lun) MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系列熒(ying)光(guang)定(ding)量PCR 檢(jian)測儀(yi)。
【使(shi)用方法】
1.樣(yang)品處(chu)理(li)(樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)區(qu))
核酸提取(qu) 推(tui)薦(jian)采用核酸提取(qu)或純(chun)化試(shi)劑(ji)(磁(ci)珠法或(huo)離(li)心柱法)進(jin)行(xing)核酸提取(qu), 請按照試劑說明書進行(xing)操作(zuo)。
2.試(shi)劑配(pei)制(zhi)(試劑準(zhun)備區(qu))根(gen)據(ju)待(dai)檢(jian)測樣(yang)本總數,設所(suo)需要(yao)的(de)PCR 反應(ying)管(guan)管(guan)數為 N(N=樣(yang)本數+1 管(guan)陰性(xing)對照(zhao)+1 管(guan)陽性(xing)對照(zhao);反應(ying)管(guan)數每滿(man)10 份(fen),多配(pei)制(zhi)1 份(fen)),每測試(shi)反應(ying)體(ti)系配(pei)制(zhi)如(ru)下表(biao):
| 試(shi)劑 | 反應(ying)液 | 酶液(ye) |
| 用量(樣本數為 N) | 19μL | 1μL |
將混合好(hao)的(de)測試(shi)反應(ying)液分裝(zhuang)到 PCR 反應(ying)管(guan)中(zhong),20μL/管(guan)。
3.加(jia)樣(樣(yang)本處(chu)理(li)區(qu))將步驟 1 提(ti)取(qu)的(de)核酸、陽性(xing)質控(kong)品、陰(yin)性(xing)質控(kong)品各(ge)取(qu)5μL,分(fen)別加(jia)入相應(ying)的(de)反應(ying)管(guan)中(zhong),蓋好(hao)管(guan)蓋,混勻,短暫離(li)心。
4.PCR 擴(kuo)增(核酸擴增(zeng)區(qu))
2.1 將待檢測反應(ying)管(guan)置(zhi)於熒(ying)光(guang)定(ding)量 PCR 儀(yi)反應(ying)槽內;
2.2 設置(zhi)好(hao)通(tong)道(dao)、樣(yang)品(pin)信(xin)息,反應(ying)體(ti)系設置(zhi)為(wei) 25μL;熒(ying)光(guang)通(tong)道(dao)選(xuan)擇(ze):檢測通(tong)道(dao)(Reporter Dye)FAM,淬滅(mie)通(tong)道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系列儀(yi)器(qi)請勿(wu)選(xuan)擇(ze) ROX 參(can)比熒(ying)光(guang),選(xuan)擇(ze) None 即(ji)可。
2.3 推(tui)薦(jian)循環(huan)參(can)數設置(zhi):
| 步(bu)驟 | 循(xun)環(huan)數 | 溫(wen)度 | 時(shi)間(jian) | 收(shou)集(ji)熒(ying)光(guang)信(xin)號 |
| 1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否(fou) |
| 2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否(fou) |
| 60℃ | 30sec | 是(shi) |
5.結(jie)果(guo)分(fen)析判(pan)定(ding)
5.1結(jie)果(guo)分(fen)析條(tiao)件設定(ding)(請參(can)照各(ge)儀(yi)器(qi)使用說明書進行(xing)設置(zhi),以(yi)分(fen)析(xi) ABI7500 儀(yi)器(qi)為例(li)) 反應(ying)結(jie)束後自(zi)動(dong)保存(cun)結(jie)果(guo),根(gen)據(ju)分(fen)析(xi)後圖(tu)像(xiang)調節 Baseline 的(de) Start 值(zhi)、End 值(zhi)以及(ji) Threshold 值(zhi)(用戶可根(gen) 據(ju)實(shi)際情況(kuang)自(zi)行(xing)調整,Start 值(zhi)可設在 3~15、End 值(zhi)可設在 5~20,使(shi)閾值(zhi)線位於擴(kuo)增(zeng)曲線(xian)指數期(qi),陰(yin)性(xing)質控(kong) 品(pin)的(de)擴增(zeng)曲線平(ping)直(zhi)或(huo)低(di)於閾(yu)值(zhi)線),點擊(ji) Analyze 自(zi)動(dong)獲得(de)分析結(jie)果(guo)。
5.2結(jie)果(guo)判(pan)斷
陽(yang)性(xing):檢測通(tong)道(dao)Ct 值(zhi)≤40,且(qie)曲線(xian)有(you)明顯(xian)的(de)指數增長(chang)曲(qu)線;
陰(yin)性(xing):樣本(ben)檢測結(jie)果(guo)無(wu)Ct 值(zhi),且無(wu)特(te)異(yi)性(xing)擴增(zeng)曲線(xian);
可疑(yi):樣本(ben)檢(jian)測結(jie)果(guo)40<Ct 值(zhi)≤45,建(jian)議重復(fu)檢測,如(ru)果(guo)檢(jian)測通(tong)道(dao)仍(reng)為40值(zhi)≤45,且(qie)曲線(xian)有(you)明顯(xian)的(de)增長(chang) 曲(qu)線,判(pan)定(ding)為陽(yang)性(xing),否(fou)則(ze)為陰性(xing)。
5.3 質(zhi)控標(biao)準(zhun) 陰(yin)性(xing)質控(kong)品:無(wu)特(te)異(yi)性(xing)擴增(zeng)曲線(xian)或(huo)無(wu)Ct 值(zhi)顯(xian)示(shi);陽(yang)性(xing)質控(kong)品:擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)有(you)明顯(xian)指數增長(chang)期(qi),且(qie) Ct 值(zhi)≤32;以(yi)上(shang)條(tiao)件應(ying)同時(shi)滿(man)足(zu),否(fou)則(ze)實驗(yan)視為無(wu)效(xiao)。
3. 檢(jian)測方(fang)法的(de)局(ju)限(xian)性(xing)
1. 樣(yang)本檢(jian)測結(jie)果(guo)與樣本收集(ji)、處(chu)理(li)、運送(song)以及(ji)保存(cun)質量有(you)關;
2. 樣(yang)本提(ti)取(qu)過(guo)程中(zhong)沒有(you)控(kong)制(zhi)好(hao)交叉(cha)汙(wu)染,會出(chu)現假陽性(xing)結(jie)果(guo);
3. 陽(yang)性(xing)對照(zhao)、擴增(zeng)產(chan)物(wu)泄(xie)漏,會(hui)導致(zhi)假(jia)陽(yang)性(xing)結(jie)果(guo);
4. 病(bing)原體(ti)在流(liu)行(xing)過(guo)程中(zhong)基(ji)因(yin)突(tu)變、重組(zu),會導(dao)致(zhi)假(jia)陰(yin)性(xing)結(jie)果(guo);
5. 不同的(de)提取(qu)方法存(cun)在提(ti)取(qu)效(xiao)率(lv)差異,會(hui)導(dao)致(zhi)假(jia)陰(yin)性(xing)結(jie)果(guo);
6. 試(shi)劑運輸(shu),保存(cun)不當或試劑配(pei)制(zhi)不準確(que)引(yin)起(qi)的(de)試劑(ji)檢測效(xiao)能(neng)下降(jiang),出(chu)現假陰性(xing)或定(ding)量檢測不準確(que)的(de)結(jie)果(guo);
7. 本(ben)檢測結(jie)果(guo)僅(jin)供參(can)考(kao),如(ru)須確(que)診請結(jie)合臨(lin)床(chuang)癥(zheng)狀(zhuang)以(yi)及(ji)其他(ta)檢(jian)測手(shou)段(duan)。
【 禽(qin)流感病毒N3亞(ya)型(xing)(AIV-N3)PCR檢(jian)測試(shi)劑盒(he)註意事項】
1.所(suo)有(you)操(cao)作(zuo)嚴(yan)格(ge)按照說明書進行(xing);
2.試(shi)劑盒(he)內各種組(zu)分使用前(qian)應(ying)自(zi)然融化,完(wan)quan混勻並(bing)短(duan)暫(zan)離(li)心;
3.反應(ying)液應(ying)避(bi)光(guang)保存(cun);
4.反應(ying)中(zhong)盡(jin)量避(bi)免(mian)氣泡存在,管(guan)蓋需蓋緊(jin);
5.使(shi)用壹次性(xing)吸(xi)頭(tou)、壹次性(xing)手(shou)套(tao)和(he)各(ge)區(qu)專用工作(zuo)服(fu);
6.樣(yang)本處(chu)理(li)、試(shi)劑(ji)配(pei)制(zhi)、加(jia)樣需在不同區(qu)進(jin)行(xing),以免交叉(cha)汙(wu)染;
7.實(shi)驗(yan)完畢後用 10%次氯酸或 75%酒精或紫(zi)外(wai)燈(deng)處(chu)理(li)工作(zuo)臺(tai)和移液(ye)器(qi);
8.試(shi)劑盒(he)裏(li)所有(you)物(wu)品(pin)應(ying)視為汙(wu)染(ran)物(wu)對待(dai),並(bing)按照《微生物生物醫(yi)學實(shi)驗(yan)室生物安(an)全(quan)通(tong)則(ze)》進(jin)行(xing)處(chu)理(li)。
我(wo)司的(de)實時(shi)熒(ying)光(guang)探針(zhen)法試(shi)劑盒種類(lei)齊(qi)全(quan)(涵蓋禽(qin)病、豬(zhu)病(bing)、馬牛羊(yang)病和(he)水(shui)產(chan)動(dong)物病(bing)原體(ti)檢(jian)測),精準高(gao)效(xiao),多重檢(jian)測(壹重、雙(shuang)重、三重),現(xian)貨(huo)供應(ying)歡(huan)迎廣(guang)大新老(lao)客(ke)戶前(qian)來(lai)選(xuan)購(gou)。
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