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PCR試(shi)劑(ji)盒(he)
禽類(lei)PCR試(shi)劑(ji)盒(he)
50T禽流(liu)感病(bing)毒(du)H9亞型(AIV-H9)PCR檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)
產品(pin)簡(jian)介
禽(qin)流(liu)感病(bing)毒(du)H9亞型(AIV-H9)PCR檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)是我司實(shi)時熒(ying)光探針(zhen)法(fa)試(shi)劑(ji)盒(he),種類(lei)齊全(quan),精(jing)準(zhun)高(gao)效,現(xian)貨供應(ying),歡迎廣(guang)大新(xin)老(lao)客(ke)戶(hu)前(qian)來(lai)選(xuan)購(gou)。
產品(pin)分(fen)類(lei)
【產品(pin)名稱(cheng)】
商品(pin)名稱(cheng):禽流(liu)感病(bing)毒(du)H9亞型(AIV-H9)PCR檢測試(shi)劑(ji)盒(he)(熒(ying)光PCR 法)
【包裝(zhuang)規(gui)格(ge)】25T/盒、50T/盒
【檢驗原(yuan)理】本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)采用(yong)TaqMan 探針(zhen)法(fa)實(shi)時熒(ying)光PCR 技術,根(gen)據禽流(liu)感病(bing)毒(du)H9亞型(AIV-H9)基(ji)因設(she)計(ji)特(te)異性(xing)引物(wu)和熒(ying)光探針(zhen),用(yong)熒(ying)光PCR技術對(dui)禽流(liu)感病(bing)毒(du)H9亞型(AIV-H9)的核酸(suan)進(jin)行體(ti)外擴增檢測,用於臨(lin)床(chuang)上(shang)對(dui)可疑感染病(bing)料的病(bing)原學診(zhen)斷(duan)。
【試(shi)劑(ji)組(zu)成(cheng)】
| 包裝(zhuang)規(gui)格(ge) | 25T/盒 | 50T/盒 |
| 反應(ying)液 | 500μL×1 管 | 500μL×2 管 |
| 酶(mei)液(ye) | 25μL×1 管 | 50μL×1 管 |
| 陽性(xing)質控(kong)品(pin) | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
| 陰性(xing)質控(kong)品(pin) | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
說明:不同批(pi)號的試(shi)劑(ji)盒(he)組(zu)分(fen)不(bu)可交互使(shi)用(yong)
【儲存(cun)條(tiao)件及有效期(qi)】
-20℃±5℃,避(bi)光(guang)保(bao)存(cun)、運輸、反復(fu)凍(dong)融次(ci)數不超(chao)過(guo) 5 次(ci),有效期(qi) 12 個月(yue)。
【適用儀(yi)器(qi)】 ABI7500、安(an)捷倫(lun) MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系列(lie)熒(ying)光定量(liang)PCR 檢測儀(yi)。
【使(shi)用(yong)方法】
1.樣品(pin)處(chu)理(樣(yang)本(ben)處(chu)理區(qu))
核酸(suan)提取 推薦(jian)采用(yong)核酸(suan)提取或純(chun)化(hua)試(shi)劑(ji)(磁(ci)珠法或離心柱法(fa))進(jin)行核酸(suan)提取, 請按照(zhao)試(shi)劑(ji)說(shuo)明書(shu)進(jin)行操作。
2.試(shi)劑(ji)配(pei)制(試(shi)劑(ji)準(zhun)備(bei)區)根(gen)據待(dai)檢(jian)測樣本(ben)總(zong)數,設(she)所(suo)需要的PCR 反應(ying)管管(guan)數為 N(N=樣本(ben)數+1 管陰性(xing)對(dui)照+1 管陽性(xing)對(dui)照;反應(ying)管數每滿10 份,多配(pei)制1 份),每測試(shi)反應(ying)體(ti)系配(pei)制如(ru)下表(biao):
| 試(shi)劑(ji) | 反應(ying)液 | 酶(mei)液(ye) |
| 用量(liang)(樣本(ben)數為 N) | 19μL | 1μL |
將混合(he)好的測試(shi)反應(ying)液分(fen)裝(zhuang)到(dao) PCR 反應(ying)管中(zhong),20μL/管。
3.加(jia)樣(樣本(ben)處(chu)理區(qu))將步(bu)驟(zhou) 1 提取的核酸(suan)、陽(yang)性(xing)質控(kong)品(pin)、陰性(xing)質控(kong)品(pin)各(ge)取(qu)5μL,分(fen)別(bie)加(jia)入相(xiang)應(ying)的反應(ying)管中(zhong),蓋(gai)好管(guan)蓋(gai),混勻(yun),短(duan)暫(zan)離心。
4.PCR 擴增(核酸(suan)擴增區)
2.1 將待檢(jian)測(ce)反應(ying)管置於熒(ying)光定量(liang) PCR 儀(yi)反應(ying)槽內(nei);
2.2 設(she)置好通(tong)道(dao)、樣(yang)品(pin)信息(xi),反應(ying)體(ti)系設(she)置為 25μL;熒(ying)光通(tong)道(dao)選(xuan)擇(ze):檢測(ce)通(tong)道(dao)(Reporter Dye)FAM,淬滅通(tong)道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系列(lie)儀(yi)器(qi)請勿選(xuan)擇(ze) ROX 參比(bi)熒(ying)光,選(xuan)擇(ze) None 即可。
2.3 推薦(jian)循環(huan)參數設(she)置:
| 步(bu)驟(zhou) | 循環(huan)數 | 溫度(du) | 時間(jian) | 收集(ji)熒(ying)光信號 |
| 1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否(fou) |
| 2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否(fou) |
| 60℃ | 30sec | 是 |
5.結果分(fen)析(xi)判(pan)定(ding)
5.1結果分(fen)析(xi)條(tiao)件設(she)定(ding)(請參照各(ge)儀(yi)器(qi)使(shi)用(yong)說(shuo)明書(shu)進(jin)行設(she)置,以分(fen)析(xi) ABI7500 儀(yi)器(qi)為例(li)) 反應(ying)結束(shu)後(hou)自動(dong)保(bao)存(cun)結(jie)果,根(gen)據分(fen)析(xi)後(hou)圖像(xiang)調節 Baseline 的 Start 值、End 值以及 Threshold 值(用戶(hu)可根(gen) 據實(shi)際情況自行調整,Start 值可設(she)在(zai) 3~15、End 值可設(she)在(zai) 5~20,使(shi)閾(yu)值線位(wei)於擴增曲線指數期(qi),陰性(xing)質控(kong) 品(pin)的擴增曲線平(ping)直或低於(yu)閾值線),點擊 Analyze 自動獲(huo)得分(fen)析(xi)結(jie)果。
5.2結果判斷
陽性(xing):檢測(ce)通(tong)道(dao)Ct 值≤40,且(qie)曲線有明顯(xian)的指數增長曲線;
陰性(xing):樣本(ben)檢(jian)測結果無Ct 值,且(qie)無特(te)異性(xing)擴增曲線;
可疑:樣本(ben)檢(jian)測結果40<Ct 值≤45,建(jian)議重(zhong)復(fu)檢(jian)測,如(ru)果檢測通(tong)道(dao)仍為40值≤45,且(qie)曲線有明顯(xian)的增長 曲線,判(pan)定為陽性(xing),否(fou)則(ze)為(wei)陰性(xing)。
5.3 質控標(biao)準(zhun) 陰性(xing)質控(kong)品(pin):無特(te)異性(xing)擴增曲線或無Ct 值顯(xian)示;陽(yang)性(xing)質控(kong)品(pin):擴增曲線有明顯(xian)指數增長期(qi),且(qie) Ct 值≤32;以上條件應(ying)同時滿足,否(fou)則(ze)實(shi)驗視(shi)為(wei)無效。
3. 檢測方法的局限(xian)性(xing)
1. 樣本(ben)檢(jian)測結果與樣本(ben)收(shou)集(ji)、處(chu)理、運送以及保(bao)存(cun)質(zhi)量(liang)有關(guan);
2. 樣本(ben)提取過(guo)程中沒(mei)有控(kong)制(zhi)好交叉汙(wu)染,會(hui)出(chu)現(xian)假陽(yang)性(xing)結果;
3. 陽性(xing)對(dui)照、擴增產物(wu)泄漏,會導致(zhi)假陽(yang)性(xing)結果;
4. 病(bing)原體(ti)在(zai)流(liu)行過程中基(ji)因突(tu)變(bian)、重組(zu),會(hui)導致(zhi)假陰性(xing)結果;
5. 不同的提取方法存(cun)在(zai)提取效率(lv)差(cha)異(yi),會(hui)導致(zhi)假陰性(xing)結果;
6. 試(shi)劑(ji)運輸,保(bao)存(cun)不(bu)當(dang)或試(shi)劑(ji)配(pei)制不(bu)準(zhun)確引起(qi)的試(shi)劑(ji)檢(jian)測效能(neng)下降(jiang),出現(xian)假陰性(xing)或定量(liang)檢測(ce)不(bu)準(zhun)確的結果;
7. 本(ben)檢(jian)測結果僅(jin)供參考,如(ru)須(xu)確診(zhen)請結合(he)臨床(chuang)癥(zheng)狀以及其(qi)他(ta)檢(jian)測(ce)手段(duan)。
【 禽流(liu)感病(bing)毒(du)H9亞型(AIV-H9)PCR檢測試(shi)劑(ji)盒(he)註意(yi)事(shi)項(xiang)】
1.所(suo)有操(cao)作嚴格按(an)照說(shuo)明書(shu)進(jin)行;
2.試(shi)劑(ji)盒(he)內(nei)各(ge)種(zhong)組(zu)分(fen)使(shi)用(yong)前(qian)應(ying)自然(ran)融化(hua),完(wan)quan混勻(yun)並(bing)短(duan)暫(zan)離心;
3.反應(ying)液應(ying)避(bi)光(guang)保(bao)存(cun);
4.反應(ying)中盡(jin)量(liang)避(bi)免(mian)氣(qi)泡(pao)存(cun)在(zai),管(guan)蓋(gai)需蓋(gai)緊;
5.使(shi)用(yong)壹次(ci)性(xing)吸頭、壹次(ci)性(xing)手套和各(ge)區(qu)專用工(gong)作服;
6.樣本(ben)處(chu)理、試(shi)劑(ji)配(pei)制、加(jia)樣需在(zai)不(bu)同區進(jin)行,以免交叉汙(wu)染;
7.實(shi)驗完(wan)畢後(hou)用 10%次(ci)氯(lv)酸(suan)或 75%酒(jiu)精(jing)或紫外(wai)燈(deng)處(chu)理工(gong)作臺(tai)和移(yi)液(ye)器(qi);
8.試(shi)劑(ji)盒(he)裏所(suo)有物(wu)品(pin)應(ying)視為(wei)汙(wu)染物(wu)對(dui)待,並(bing)按照《微生物(wu)生物(wu)醫學實(shi)驗室(shi)生物(wu)安(an)全通(tong)則》進(jin)行處(chu)理。
我司的實(shi)時熒(ying)光探針(zhen)法(fa)試(shi)劑(ji)盒(he)種類(lei)齊全(quan)(涵(han)蓋(gai)禽病(bing)、豬病(bing)、馬牛(niu)羊(yang)病(bing)和水產動(dong)物(wu)病(bing)原體(ti)檢測),精(jing)準(zhun)高(gao)效,多重檢測(壹重(zhong)、雙重(zhong)、三(san)重(zhong)),現(xian)貨供應(ying)歡迎廣(guang)大新(xin)老(lao)客(ke)戶(hu)前(qian)來(lai)選(xuan)購(gou)。
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