產品(pin)中(zhong)心(xin)
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產品(pin)中(zhong)心(xin)
PCR試劑盒
禽(qin)類(lei)PCR試(shi)劑(ji)盒
50T禽(qin)流(liu)感(gan)病(bing)毒N9亞(ya)型(xing)(AIV-N9)PCR檢測試劑盒
產品(pin)簡(jian)介(jie)
禽(qin)流(liu)感(gan)病(bing)毒N9亞(ya)型(xing)(AIV-N9)PCR檢測試劑盒是我(wo)司(si)實時(shi)熒(ying)光(guang)探(tan)針(zhen)法(fa)試(shi)劑(ji)盒(he),種(zhong)類(lei)齊(qi)全(quan),精(jing)準高(gao)效,現貨供應,歡(huan)迎廣大(da)新老客戶(hu)前(qian)來選(xuan)購(gou)。
產品(pin)分(fen)類(lei)
【產品(pin)名稱(cheng)】
商品(pin)名稱(cheng):禽(qin)流(liu)感(gan)病(bing)毒N9亞(ya)型(xing)(AIV-N9)PCR檢測試劑(ji)盒(熒(ying)光(guang)PCR 法)
【包(bao)裝規(gui)格(ge)】25T/盒、50T/盒
【檢驗(yan)原理(li)】本試劑盒采用(yong)TaqMan 探(tan)針(zhen)法(fa)實(shi)時(shi)熒(ying)光(guang)PCR 技(ji)術,根(gen)據(ju)禽(qin)流(liu)感(gan)病(bing)毒N9亞(ya)型(xing)(AIV-N9)基(ji)因(yin)設(she)計(ji)特(te)異性(xing)引物和(he)熒(ying)光(guang)探(tan)針(zhen),用(yong)熒(ying)光(guang)PCR技(ji)術對(dui)禽(qin)流(liu)感(gan)病(bing)毒N9亞(ya)型(xing)(AIV-N9)的(de)核(he)酸(suan)進行(xing)體外(wai)擴(kuo)增(zeng)檢測,用於(yu)臨床上(shang)對(dui)可(ke)疑感(gan)染(ran)病(bing)料的(de)病(bing)原(yuan)學(xue)診斷(duan)。
【試劑(ji)組(zu)成】
| 包(bao)裝規(gui)格(ge) | 25T/盒 | 50T/盒 |
| 反應(ying)液 | 500μL×1 管 | 500μL×2 管 |
| 酶液(ye) | 25μL×1 管 | 50μL×1 管 |
| 陽性(xing)質控品 | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
| 陰(yin)性(xing)質控品 | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
說明(ming):不同(tong)批(pi)號的(de)試(shi)劑(ji)盒(he)組(zu)分不(bu)可(ke)交互使用(yong)
【儲(chu)存條(tiao)件(jian)及有效期(qi)】
-20℃±5℃,避光(guang)保存(cun)、運輸、反(fan)復凍(dong)融(rong)次數(shu)不超(chao)過(guo) 5 次,有效期(qi) 12 個月(yue)。
【適用(yong)儀器(qi)】 ABI7500、安捷(jie)倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系(xi)列(lie)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR 檢測儀。
【使用(yong)方(fang)法(fa)】
1.樣品處(chu)理(li)(樣本處理(li)區(qu))
核酸(suan)提(ti)取(qu) 推薦(jian)采用(yong)核(he)酸提(ti)取(qu)或(huo)純(chun)化試劑(磁珠法(fa)或(huo)離(li)心(xin)柱(zhu)法(fa))進行(xing)核酸(suan)提(ti)取(qu), 請(qing)按(an)照(zhao)試(shi)劑(ji)說明書進行(xing)操作(zuo)。
2.試劑(ji)配(pei)制(試劑(ji)準(zhun)備(bei)區(qu))根(gen)據(ju)待(dai)檢測樣本總數,設(she)所(suo)需(xu)要(yao)的(de)PCR 反應(ying)管管(guan)數為 N(N=樣本數+1 管陰(yin)性(xing)對(dui)照+1 管陽(yang)性對(dui)照;反(fan)應(ying)管數(shu)每滿(man)10 份(fen),多配(pei)制1 份(fen)),每測(ce)試(shi)反應(ying)體系配(pei)制如(ru)下(xia)表:
| 試劑(ji) | 反應(ying)液 | 酶液(ye) |
| 用量(liang)(樣本數為 N) | 19μL | 1μL |
將混(hun)合好(hao)的(de)測(ce)試(shi)反(fan)應液(ye)分(fen)裝到 PCR 反應(ying)管中(zhong),20μL/管。
3.加樣(樣本處理(li)區(qu))將步(bu)驟(zhou) 1 提(ti)取(qu)的(de)核(he)酸(suan)、陽(yang)性質控品、陰(yin)性(xing)質控品各(ge)取(qu)5μL,分別(bie)加入相應(ying)的(de)反(fan)應(ying)管(guan)中(zhong),蓋(gai)好(hao)管(guan)蓋,混勻,短(duan)暫離(li)心(xin)。
4.PCR 擴增(zeng)(核酸(suan)擴增區(qu))
2.1 將待(dai)檢測反應管置(zhi)於(yu)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang) PCR 儀反應(ying)槽(cao)內(nei);
2.2 設(she)置(zhi)好(hao)通(tong)道、樣品信(xin)息,反應(ying)體系設(she)置(zhi)為 25μL;熒(ying)光(guang)通道(dao)選(xuan)擇(ze):檢測通道(Reporter Dye)FAM,淬滅(mie)通道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系列(lie)儀器(qi)請(qing)勿(wu)選(xuan)擇(ze) ROX 參比(bi)熒(ying)光(guang),選(xuan)擇(ze) None 即可(ke)。
2.3 推薦(jian)循環(huan)參數設(she)置(zhi):
| 步(bu)驟(zhou) | 循環(huan)數 | 溫(wen)度 | 時(shi)間 | 收集熒(ying)光(guang)信號 |
| 1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否 |
| 2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否 |
| 60℃ | 30sec | 是 |
5.結果(guo)分析(xi)判定(ding)
5.1結果(guo)分析(xi)條件(jian)設(she)定(ding)(請(qing)參照各儀器(qi)使用(yong)說明書進行(xing)設(she)置(zhi),以分(fen)析 ABI7500 儀器(qi)為例(li)) 反應(ying)結束(shu)後自動保(bao)存(cun)結果(guo),根(gen)據(ju)分析後(hou)圖(tu)像(xiang)調節 Baseline 的(de) Start 值、End 值以(yi)及 Threshold 值(用(yong)戶(hu)可(ke)根(gen) 據(ju)實際情況自(zi)行(xing)調整(zheng),Start 值可(ke)設(she)在(zai) 3~15、End 值可(ke)設(she)在(zai) 5~20,使閾(yu)值線位(wei)於(yu)擴(kuo)增曲(qu)線指數期(qi),陰(yin)性(xing)質控 品的(de)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線平直或(huo)低(di)於(yu)閾(yu)值線),點擊 Analyze 自動(dong)獲得分(fen)析結果(guo)。
5.2結果(guo)判斷(duan)
陽性(xing):檢測通道Ct 值≤40,且曲(qu)線有明顯(xian)的(de)指數增(zeng)長(chang)曲線;
陰(yin)性(xing):樣本檢測結果(guo)無Ct 值,且(qie)無特(te)異性(xing)擴增曲(qu)線;
可(ke)疑:樣本檢測結果(guo)40<Ct 值≤45,建議(yi)重復檢測,如(ru)果(guo)檢測通道仍為(wei)40值≤45,且曲(qu)線有明顯(xian)的(de)增(zeng)長(chang) 曲線,判定(ding)為陽(yang)性(xing),否(fou)則為陰(yin)性(xing)。
5.3 質控標準 陰(yin)性(xing)質控品:無特(te)異性(xing)擴增曲(qu)線或(huo)無Ct 值顯(xian)示;陽(yang)性質控品:擴(kuo)增(zeng)曲線有明顯(xian)指數增(zeng)長(chang)期,且 Ct 值≤32;以上(shang)條件(jian)應同時(shi)滿足,否(fou)則實驗(yan)視為(wei)無效(xiao)。
3. 檢測方(fang)法(fa)的(de)局限性(xing)
1. 樣本檢測結果(guo)與(yu)樣本收集、處理(li)、運送以(yi)及保存(cun)質量(liang)有關(guan);
2. 樣本提(ti)取(qu)過(guo)程(cheng)中(zhong)沒(mei)有控制好(hao)交叉汙(wu)染,會出(chu)現(xian)假(jia)陽(yang)性(xing)結(jie)果(guo);
3. 陽性(xing)對(dui)照、擴(kuo)增(zeng)產物泄漏,會導致(zhi)假(jia)陽(yang)性(xing)結(jie)果(guo);
4. 病原(yuan)體在(zai)流行(xing)過(guo)程(cheng)中(zhong)基(ji)因(yin)突(tu)變(bian)、重組(zu),會導致(zhi)假(jia)陰(yin)性(xing)結(jie)果(guo);
5. 不同(tong)的(de)提(ti)取(qu)方(fang)法(fa)存在(zai)提(ti)取(qu)效(xiao)率差(cha)異,會導致(zhi)假(jia)陰(yin)性(xing)結(jie)果(guo);
6. 試劑(ji)運輸,保(bao)存不(bu)當(dang)或(huo)試劑(ji)配(pei)制不準(zhun)確(que)引起(qi)的(de)試(shi)劑(ji)檢測效能(neng)下(xia)降(jiang),出(chu)現(xian)假(jia)陰(yin)性(xing)或(huo)定(ding)量(liang)檢測不準確(que)的(de)結(jie)果(guo);
7. 本檢測結果(guo)僅供參考(kao),如(ru)須(xu)確(que)診請(qing)結(jie)合臨床癥(zheng)狀(zhuang)以及其他(ta)檢測手段。
【 禽(qin)流(liu)感(gan)病(bing)毒N9亞(ya)型(xing)(AIV-N9)PCR檢測試劑(ji)盒註意(yi)事項】
1.所(suo)有操作(zuo)嚴格(ge)按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書進行(xing);
2.試劑(ji)盒內(nei)各種(zhong)組(zu)分使用(yong)前(qian)應自(zi)然(ran)融(rong)化,完quan混勻(yun)並短(duan)暫離(li)心(xin);
3.反應(ying)液應(ying)避光保存(cun);
4.反應(ying)中(zhong)盡(jin)量(liang)避免氣(qi)泡存在(zai),管蓋(gai)需(xu)蓋緊;
5.使用(yong)壹(yi)次性(xing)吸(xi)頭、壹(yi)次性(xing)手套(tao)和(he)各(ge)區(qu)專用(yong)工作(zuo)服;
6.樣本處理(li)、試(shi)劑配(pei)制、加樣需(xu)在(zai)不同(tong)區(qu)進行(xing),以免交叉汙(wu)染;
7.實驗(yan)完畢後(hou)用(yong) 10%次氯(lv)酸或(huo) 75%酒精(jing)或(huo)紫外(wai)燈(deng)處理(li)工作(zuo)臺(tai)和(he)移(yi)液(ye)器(qi);
8.試劑(ji)盒裏所(suo)有物品(pin)應視(shi)為汙(wu)染物對(dui)待(dai),並按(an)照《微(wei)生物生物醫(yi)學實(shi)驗(yan)室生物安(an)全(quan)通(tong)則》進行(xing)處理(li)。
我(wo)司(si)的(de)實(shi)時(shi)熒(ying)光(guang)探(tan)針(zhen)法(fa)試(shi)劑(ji)盒(he)種(zhong)類(lei)齊(qi)全(quan)(涵蓋(gai)禽(qin)病(bing)、豬(zhu)病(bing)、馬(ma)牛(niu)羊病和(he)水(shui)產動(dong)物病(bing)原體檢測),精(jing)準高(gao)效,多重檢測(壹(yi)重、雙(shuang)重、三(san)重),現貨供(gong)應歡(huan)迎廣大(da)新老客戶(hu)前(qian)來選(xuan)購(gou)。
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