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PCR試(shi)劑(ji)盒
禽類(lei)PCR試劑(ji)盒
50T***病毒N2亞(ya)型(xing)(AIV-N2)PCR檢測(ce)試劑(ji)盒
產(chan)品簡(jian)介(jie)
***病毒N2亞(ya)型(xing)(AIV-N2)PCR檢測(ce)試劑(ji)盒是我(wo)司實時(shi)熒(ying)光(guang)探針法試劑(ji)盒,種類(lei)齊全,精準(zhun)高(gao)效(xiao),現(xian)貨供(gong)應(ying),歡迎(ying)廣(guang)大(da)新(xin)老(lao)客(ke)戶前(qian)來(lai)選購(gou)。
產(chan)品分類(lei)
【產(chan)品名(ming)稱(cheng)】
商品名(ming)稱(cheng):***病毒N2亞(ya)型(xing)(AIV-N2)PCR檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(熒光(guang)PCR 法)
【包(bao)裝(zhuang)規(gui)格】25T/盒(he)、50T/盒
【檢驗(yan)原理(li)】本試(shi)劑(ji)盒采(cai)用(yong)TaqMan 探針法實時(shi)熒(ying)光(guang)PCR 技(ji)術,根據***病毒N2亞(ya)型(xing)(AIV-N2)基因(yin)設計(ji)特(te)異(yi)性引(yin)物和熒(ying)光(guang)探針,用(yong)熒(ying)光(guang)PCR技(ji)術對(dui)***病毒N2亞(ya)型(xing)(AIV-N2)的(de)核(he)酸(suan)進行(xing)體(ti)外擴增檢測(ce),用(yong)於(yu)臨床(chuang)上對(dui)可疑感(gan)染病料(liao)的(de)病原學(xue)診(zhen)斷(duan)。
【試劑(ji)組成】
包(bao)裝(zhuang)規(gui)格 | 25T/盒(he) | 50T/盒 |
反應(ying)液 | 500μL×1 管(guan) | 500μL×2 管(guan) |
酶(mei)液 | 25μL×1 管(guan) | 50μL×1 管(guan) |
陽(yang)性質(zhi)控品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
陰(yin)性質(zhi)控品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
說明(ming):不(bu)同(tong)批號的(de)試劑(ji)盒組分不(bu)可(ke)交互使(shi)用(yong)
【儲存條(tiao)件及有(you)效期】
-20℃±5℃,避(bi)光(guang)保存、運(yun)輸、反(fan)復凍(dong)融(rong)次數(shu)不(bu)超(chao)過(guo) 5 次,有(you)效期 12 個月。
【適(shi)用(yong)儀(yi)器(qi)】 ABI7500、安捷(jie)倫(lun) MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系列熒光(guang)定量(liang)PCR 檢測(ce)儀(yi)。
【使(shi)用(yong)方(fang)法】
1.樣品(pin)處(chu)理(樣本處(chu)理區)
核(he)酸(suan)提取(qu) 推(tui)薦采(cai)用(yong)核(he)酸(suan)提取(qu)或純(chun)化試(shi)劑(ji)(磁珠法或離心(xin)柱(zhu)法)進行(xing)核(he)酸(suan)提取(qu), 請按(an)照試劑(ji)說明(ming)書(shu)進行(xing)操(cao)作。
2.試劑(ji)配制(試(shi)劑(ji)準(zhun)備(bei)區)根據待(dai)檢測(ce)樣本總數(shu),設所需要的(de)PCR 反(fan)應(ying)管(guan)管(guan)數(shu)為 N(N=樣本數(shu)+1 管(guan)陰(yin)性對(dui)照+1 管(guan)陽(yang)性對(dui)照;反應(ying)管(guan)數(shu)每(mei)滿(man)10 份(fen),多(duo)配制1 份(fen)),每(mei)測(ce)試反(fan)應(ying)體系配制如(ru)下(xia)表:
試(shi)劑(ji) | 反應(ying)液 | 酶(mei)液 |
用(yong)量(liang)(樣本數(shu)為 N) | 19μL | 1μL |
將(jiang)混合好(hao)的(de)測(ce)試反(fan)應(ying)液分(fen)裝(zhuang)到 PCR 反應(ying)管(guan)中,20μL/管(guan)。
3.加(jia)樣(樣本處(chu)理區)將(jiang)步(bu)驟(zhou) 1 提取(qu)的(de)核(he)酸(suan)、陽性質(zhi)控品(pin)、陰(yin)性質(zhi)控品(pin)各取(qu)5μL,分別加(jia)入(ru)相(xiang)應(ying)的(de)反應(ying)管(guan)中,蓋(gai)好(hao)管(guan)蓋(gai),混勻(yun),短暫離心(xin)。
4.PCR 擴增(核(he)酸(suan)擴增區)
2.1 將(jiang)待(dai)檢測(ce)反應(ying)管(guan)置(zhi)於(yu)熒光(guang)定量(liang) PCR 儀(yi)反(fan)應(ying)槽(cao)內(nei);
2.2 設置(zhi)好(hao)通道(dao)、樣品(pin)信息,反(fan)應(ying)體系設置為(wei) 25μL;熒光(guang)通道(dao)選擇(ze):檢測(ce)通道(dao)(Reporter Dye)FAM,淬(cui)滅(mie)通道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系列儀(yi)器(qi)請勿選擇(ze) ROX 參(can)比(bi)熒光(guang),選擇(ze) None 即(ji)可(ke)。
2.3 推(tui)薦循環參(can)數(shu)設置:
步(bu)驟(zhou) | 循環數(shu) | 溫(wen)度 | 時間 | 收集(ji)熒(ying)光(guang)信號 |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否(fou) |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否(fou) |
60℃ | 30sec | 是 |
5.結果分(fen)析(xi)判(pan)定
5.1結果分(fen)析(xi)條(tiao)件設定(請參(can)照各儀(yi)器(qi)使(shi)用(yong)說明(ming)書(shu)進行(xing)設(she)置,以分(fen)析 ABI7500 儀(yi)器(qi)為例(li)) 反(fan)應(ying)結束(shu)後(hou)自動(dong)保(bao)存結果,根據分(fen)析(xi)後圖像調(tiao)節(jie) Baseline 的(de) Start 值(zhi)、End 值以及 Threshold 值(用(yong)戶可根 據實際(ji)情況自行(xing)調(tiao)整(zheng),Start 值可設在(zai) 3~15、End 值(zhi)可設(she)在 5~20,使(shi)閾值(zhi)線位(wei)於(yu)擴增曲(qu)線指(zhi)數(shu)期,陰(yin)性質(zhi)控 品(pin)的(de)擴增曲(qu)線平(ping)直或(huo)低(di)於(yu)閾值(zhi)線),點擊 Analyze 自動(dong)獲(huo)得分(fen)析結果。
5.2結果判(pan)斷(duan)
陽(yang)性:檢測(ce)通道(dao)Ct 值(zhi)≤40,且(qie)曲(qu)線有(you)明(ming)顯的(de)指數(shu)增長曲(qu)線;
陰(yin)性:樣本檢測(ce)結果無(wu)Ct 值,且(qie)無特(te)異(yi)性擴增曲(qu)線;
可(ke)疑:樣本檢測(ce)結果40<Ct 值(zhi)≤45,建(jian)議(yi)重(zhong)復(fu)檢測(ce),如(ru)果(guo)檢測(ce)通道(dao)仍(reng)為40值(zhi)≤45,且曲(qu)線有(you)明(ming)顯的(de)增長 曲(qu)線,判(pan)定為陽(yang)性,否(fou)則為陰性。
5.3 質(zhi)控標準(zhun) 陰性質(zhi)控品(pin):無(wu)特(te)異性擴增曲(qu)線或(huo)無(wu)Ct 值顯示;陽性質(zhi)控品(pin):擴增曲(qu)線有(you)明(ming)顯指數(shu)增長期,且(qie) Ct 值≤32;以上條(tiao)件應(ying)同(tong)時滿(man)足,否(fou)則實驗(yan)視(shi)為無效。
3. 檢測(ce)方(fang)法的(de)局限性
1. 樣本檢測(ce)結果與(yu)樣本收(shou)集(ji)、處(chu)理、運(yun)送(song)以及保存質(zhi)量(liang)有(you)關(guan);
2. 樣本提取(qu)過程(cheng)中沒(mei)有(you)控制(zhi)好(hao)交叉汙染,會出現(xian)假(jia)陽(yang)性結果;
3. 陽性對(dui)照、擴增產(chan)物泄漏,會導致(zhi)假(jia)陽性結果;
4. 病原體(ti)在流行(xing)過(guo)程中基(ji)因(yin)突(tu)變(bian)、重(zhong)組(zu),會導致(zhi)假(jia)陰性結果;
5. 不(bu)同(tong)的(de)提取(qu)方(fang)法存在(zai)提取(qu)效率差(cha)異(yi),會導致(zhi)假(jia)陰性結果;
6. 試劑(ji)運輸,保(bao)存不(bu)當(dang)或試(shi)劑(ji)配制不(bu)準(zhun)確(que)引起的(de)試劑(ji)檢測(ce)效能(neng)下(xia)降,出現(xian)假(jia)陰(yin)性或(huo)定量(liang)檢測(ce)不(bu)準(zhun)確(que)的(de)結果;
7. 本檢測(ce)結果僅(jin)供(gong)參(can)考,如(ru)須確診請(qing)結合臨(lin)床(chuang)癥狀(zhuang)以及其他檢測(ce)手段。
【 ***病毒N2亞(ya)型(xing)(AIV-N2)PCR檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒註(zhu)意事項(xiang)】
1.所有(you)操(cao)作嚴格按照說明(ming)書(shu)進行(xing);
2.試(shi)劑(ji)盒內各種組(zu)分(fen)使(shi)用(yong)前(qian)應(ying)自然(ran)融(rong)化,完quan混勻(yun)並短(duan)暫離心(xin);
3.反應(ying)液應(ying)避(bi)光(guang)保存;
4.反應(ying)中盡(jin)量(liang)避(bi)免氣泡(pao)存在(zai),管(guan)蓋(gai)需蓋緊(jin);
5.使(shi)用(yong)壹次(ci)性吸頭、壹次(ci)性手套和各區專(zhuan)用(yong)工(gong)作服;
6.樣本處(chu)理、試(shi)劑(ji)配制、加(jia)樣需在不(bu)同(tong)區進行(xing),以免(mian)交叉汙染;
7.實驗(yan)完畢後用(yong) 10%次(ci)氯(lv)酸(suan)或 75%酒(jiu)精或(huo)紫(zi)外(wai)燈(deng)處(chu)理工(gong)作臺(tai)和移(yi)液(ye)器;
8.試(shi)劑(ji)盒裏(li)所有(you)物品應(ying)視為(wei)汙染物對待(dai),並(bing)按照《微生物生物醫學(xue)實驗(yan)室(shi)生物安全(quan)通(tong)則》進行(xing)處(chu)理。
我(wo)司的(de)實時(shi)熒(ying)光(guang)探針法試劑(ji)盒種類(lei)齊全(涵(han)蓋(gai)禽(qin)病(bing)、豬(zhu)病(bing)、馬牛羊(yang)病(bing)和水(shui)產(chan)動物病原(yuan)體(ti)檢測(ce)),精準(zhun)高(gao)效(xiao),多(duo)重(zhong)檢測(ce)(壹重(zhong)、雙(shuang)重(zhong)、三(san)重(zhong)),現(xian)貨供(gong)應(ying)歡迎(ying)廣(guang)大(da)新(xin)老(lao)客(ke)戶前(qian)來(lai)選購(gou)。
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