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PCR試劑(ji)盒
禽類(lei)PCR試(shi)劑(ji)盒
50T禽白血病病(bing)毒(du)核(he)酸檢測試(shi)劑(ji)盒(熒光(guang)PCR法)
產(chan)品(pin)簡介(jie)
禽(qin)白血病病(bing)毒(du)核(he)酸檢測試(shi)劑(ji)盒(熒光(guang)PCR法)是(shi)我(wo)司(si)實時熒光(guang)探(tan)針法試(shi)劑(ji)盒,種(zhong)類(lei)齊全(quan),精(jing)準(zhun)高(gao)效,現(xian)貨供應(ying),歡(huan)迎(ying)廣大(da)新老(lao)客(ke)戶(hu)前(qian)來選(xuan)購。
產品(pin)分類
【產品(pin)名(ming)稱(cheng)】
商品(pin)名(ming)稱(cheng):禽白血病病(bing)毒(du)核(he)酸檢測試(shi)劑(ji)盒(熒光(guang)PCR法)
【包裝(zhuang)規格(ge)】25T/盒、50T/盒
我(wo)司(si)的(de)實(shi)時熒光(guang)探(tan)針法試(shi)劑(ji)盒種(zhong)類(lei)齊全(quan)(涵蓋(gai)禽病、豬(zhu)病、馬牛(niu)羊(yang)病和(he)水(shui)產(chan)動物病(bing)原體檢測),精(jing)準(zhun)高(gao)效,多(duo)重檢測(壹重、雙(shuang)重、三(san)重),現(xian)貨供應(ying)歡(huan)迎(ying)廣大(da)新老(lao)客(ke)戶(hu)前(qian)來選(xuan)購。
【檢驗原理(li)】本(ben)試劑(ji)盒采用(yong)TaqMan 探(tan)針法實(shi)時(shi)熒光(guang)PCR 技術(shu),根據禽白血病病(bing)毒(du)亞型(xing)基(ji)因設計特異性引物和(he)熒光(guang)探(tan)針,用(yong)熒光(guang)PCR技術(shu)對(dui)禽白血病病(bing)毒(du)亞型(xing)的(de)核(he)酸進行體外擴(kuo)增(zeng)檢測,用(yong)於(yu)臨床(chuang)上對(dui)可疑感染病料(liao)的(de)病(bing)原學診斷。
【試劑(ji)組(zu)成(cheng)】
包裝(zhuang)規格(ge) | 25T/盒 | 50T/盒 |
PCR反應(ying)液 | 500 μL×1管(guan) | 1000 μL×1管(guan) |
陽性對(dui)照(zhao) | 40 μL×1管(guan) | 40 μL×1管(guan) |
陰性對(dui)照(zhao) | 40 μL×1管(guan) | 40 μL×1管(guan) |
說(shuo)明書 | 1份 | 1份 |
說(shuo)明:不(bu)同(tong)批號的(de)試(shi)劑(ji)盒組(zu)分不(bu)可(ke)交(jiao)互(hu)使(shi)用(yong)
【儲存條件(jian)及(ji)有效(xiao)期(qi)】
避光(guang)-20℃以(yi)下(xia)保(bao)存,避免(mian)反(fan)復凍融(rong),有效(xiao)期(qi)12個(ge)月。
【適用(yong)儀器(qi)】 ABI 系列、Bio-Rad系(xi)列、Agilent Stratagene MX系(xi)列、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系(xi)列、杭(hang)州博(bo)日(ri)系列等(deng)多(duo)通(tong)道實時熒光(guang)定量PCR儀(yi)。
【禽白血病病(bing)毒(du)核(he)酸檢測試(shi)劑(ji)盒(熒光(guang)PCR法)產品(pin)展(zhan)示】

【檢驗方法】
1. 試劑(ji)準(zhun)備(bei)(試(shi)劑(ji)準(zhun)備(bei)區)
(1)從冰箱中取(qu)出試劑(ji)盒, 從試劑(ji)盒中取(qu)出實驗所需(xu)試劑(ji),充分融化(hua)混(hun)勻並(bing)瞬(shun)時離心(xin)以去(qu)除管(guan)壁附著(zhe)液體。
(2)核(he)算當(dang)次實驗所(suo)需(xu)要的(de)反(fan)應數(n),並(bing)根據如(ru)下(xia)表(biao)所(suo)示(shi)反應體系計(ji)算(suan)當(dang)次實驗所(suo)需(xu)要的(de)各(ge)種(zhong)試(shi)劑(ji)量。
n =陰性對(dui)照(zhao)數(1T)+陽性對(dui)照(zhao)數(1T)+誤差(cha)預(yu)留量(1T)+樣本(ben)數
單(dan)反(fan)液配(pei)制(zhi)表(biao)(每份) | PCR反應(ying)液(UNG酶(mei)及(ji)Taq酶(mei)) | 20 μL |
(3)在無(wu)菌(jun)離心(xin)管(guan)中加(jia)入(ru)上述(shu)試(shi)劑(ji),充分混(hun)勻後(hou)瞬(shun)時離心(xin)。按照(zhao)20μL/管(guan)分裝量將(jiang)試劑(ji)分裝至(zhi)PCR反(fan)應管(guan)。
(4)蓋(gai)緊PCR反應管(guan)蓋(gai)後(hou)將PCR反(fan)應管(guan)轉(zhuan)移(yi)至(zhi)樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)區。剩(sheng)余(yu)試(shi)劑(ji)放(fang)回-20℃以(yi)下(xia)冰箱冷(leng)凍保(bao)存。
2.樣本(ben)準(zhun)備(bei)(樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)區)
用(yong)DNA/RNA提取(qu)試(shi)劑(ji)盒提取(qu)核(he)酸即可,具體操(cao)作按照(zhao)其試劑(ji)盒說(shuo)明書
3.加(jia)樣(yang)
在上述(shu)制(zhi)備(bei)好的(de)PCR反應(ying)樣(yang)本(ben)管(guan)中分別加(jia)入(ru)處(chu)理(li)好的(de)待(dai)測標(biao)本(ben)DNA各5 μl、終體積25 μl/管(guan),蓋(gai)好PCR反(fan)應蓋(gai)混(hun)勻後(hou)瞬(shun)時低速離心(xin),轉(zhuan)移(yi)到PCR儀(yi)器上。陰(yin)性對(dui)照(zhao)和(he)陽性對(dui)照(zhao)管(guan)則(ze)各加(jia)5 μL試(shi)劑(ji)盒自帶的(de)陰(yin)性對(dui)照(zhao)或陽(yang)性對(dui)照(zhao)品,終體積為(wei)25 μl/管(guan),蓋(gai)好PCR反(fan)應蓋(gai)混(hun)勻後(hou)瞬(shun)時低速離心(xin),轉(zhuan)移(yi)到PCR儀(yi)器上。
4.PCR(PCR擴(kuo)增(zeng)區)
(1)取(qu)樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)區準(zhun)備(bei)好的(de)PCR反(fan)應管(guan),放(fang)置在(zai)實時(shi)熒光(guang)定量PCR儀(yi)樣品(pin)槽相應位置,並(bing)記錄(lu)放(fang)置順序。
(2)按下(xia)表(biao)設置儀(yi)器核(he)酸擴(kuo)增(zeng)相(xiang)關(guan)參(can)數進行PCR擴(kuo)增(zeng)。
反應(ying)體積 | 25 μL | 通道(dao)選(xuan)擇 | FAM通道(dao)采(cai)集禽白血病病(bing)毒(du)亞型(xing)熒光(guang)信號 |
PCR 反應(ying) 條件(jian) | 步驟(zhou) | 條件(jian) | 循(xun)環(huan)數 |
UNG處(chu)理(li) | 37℃:2分鐘(min) | 1 | |
預(yu)變(bian)性 | 95℃:3分鐘(min) | 1 | |
PCR擴(kuo)增(zeng) | 95℃:5秒(s) | 40 | |
55℃:40秒(s) (此階(jie)段結(jie)束時(shi)采(cai)集熒光(guang)信號) |
註:ABI系列熒光(guang)PCR儀在(zai)設置時(shi)不(bu)選(xuan)ROX校正(zheng),設置淬(cui)滅基(ji)團(tuan)選(xuan)擇None。
【註意(yi)事項】
1.使(shi)用(yong)本(ben)試劑(ji)盒的(de)實(shi)驗室,應嚴格(ge)按照(zhao)國(guo)家有關(guan)部分頒布(bu)的(de)有關(guan)基(ji)因擴(kuo)增(zeng)檢驗實驗室管(guan)理(li)規範進行管(guan)理(li);
2.為避免(mian)RNA降解(jie),樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)過程應(ying)在(zai)0-4℃條件(jian)下(xia)操(cao)作,且(qie)完(wan)成(cheng)實驗後(hou)立即上機(ji)檢測;樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)過程中(zhong)使(shi)用(yong)的(de)器(qi)具耗材應經(jing)過無核(he)酶(mei)處(chu)理(li);
3.各區域(yu)物品(pin)均(jun)為(wei)專用(yong),不(bu)得交(jiao)叉使(shi)用(yong),以免(mian)汙染;檢測結(jie)束後(hou),應立即對工作臺(tai)清(qing)潔;
4.吸(xi)取(qu)反(fan)應(ying)液時,應(ying)盡量避免(mian)產(chan)生氣泡;上 PCR 儀前(qian),應註意(yi)檢查(zha)各反(fan)應管(guan)是(shi)否(fou)蓋(gai)緊,以免液體蒸發(fa)造(zao)成結(jie)果不(bu)準(zhun)確;
5.試劑(ji)盒所有試(shi)劑(ji)在使(shi)用(yong)前(qian)應該在(zai)常溫下(xia)充分融化(hua)混(hun)勻,並(bing)應(ying)瞬(shun)時離心(xin);
6.試劑(ji)盒內所(suo)配(pei)陰(yin)性和(he)陽性對(dui)照(zhao)在第壹次使(shi)用(yong)前(qian)應全(quan)部轉(zhuan)移(yi)至(zhi)標(biao)本(ben)準(zhun)備(bei)區,並(bing)單(dan)獨(du)存放(fang);
7.為防(fang)止(zhi)熒光(guang)幹擾(rao),應避免(mian)裸(luo)手直(zhi)接接觸(chu)PCR反應(ying)管(guan),並應(ying)避免(mian)在(zai)PCR反應(ying)管(guan)上進行任(ren)何標(biao)記;
8.檢測過程中(zhong)使(shi)用(yong)過的(de)吸(xi)頭,應(ying)直(zhi)接打到(dao)盛有 10%次氯(lv)酸的(de)廢(fei)物缸(gang)內,檢測結(jie)束的(de)PCR 反(fan)應管(guan),切(qie)忌開蓋(gai),並與(yu)其他廢(fei)棄物品(pin)壹同(tong)滅菌(jun)後(hou)丟棄;工作臺(tai)及各(ge)種(zhong)實(shi)驗用(yong)品應(ying)定期(qi)用(yong) 10%次氯(lv)酸、75%酒(jiu)精(jing)或紫(zi)外燈(deng)進行消(xiao)毒(du);
9.儀器(qi)擴(kuo)增(zeng)相(xiang)關(guan)參(can)數應(ying)按照(zhao)本(ben)說(shuo)明書相關(guan)要(yao)求進行設置;不(bu)同(tong)批號試(shi)劑(ji)不(bu)能混(hun)用(yong);並在(zai)有效(xiao)期(qi)內(nei)使(shi)用(yong).
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