產(chan)品中(zhong)心(xin)
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產(chan)品中(zhong)心(xin)
PCR試劑盒(he)
豬(zhu)病(bing)PCR試劑盒(he)
50T豬(zhu)德(de)爾塔(ta)冠狀病毒(du)PCR檢(jian)測試劑盒(he)
產(chan)品簡(jian)介
豬(zhu)德(de)爾塔(ta)冠狀病毒(du)PCR檢(jian)測試劑盒(he)是(shi)我(wo)司(si)實時熒光探(tan)針法(fa)試劑盒(he),種(zhong)類齊(qi)全(quan),精準高(gao)效(xiao),現貨(huo)供應,歡迎(ying)廣大(da)新(xin)老(lao)客戶(hu)前(qian)來(lai)選購。
產(chan)品分(fen)類
【產(chan)品名(ming)稱】
商(shang)品名(ming)稱:豬(zhu)德(de)爾塔(ta)冠狀病毒(du)PCR檢(jian)測試劑盒(he)(實時熒光PCR法(fa))
【包(bao)裝規格】25T/盒(he)、50T/盒(he)
我(wo)司(si)的實時熒光探(tan)針法(fa)試劑盒(he)種(zhong)類齊(qi)全(quan)(涵蓋(gai)禽(qin)病(bing)、豬(zhu)病(bing)、馬(ma)牛羊病和水(shui)產(chan)動(dong)物(wu)病(bing)原(yuan)體檢(jian)測),精準高(gao)效(xiao),多(duo)重(zhong)檢(jian)測(壹(yi)重(zhong)、雙重、三重),現貨(huo)供應歡迎(ying)廣大(da)新(xin)老(lao)客戶(hu)前(qian)來(lai)選購。
【檢(jian)驗(yan)原理】本試劑盒(he)采(cai)用TaqMan 探(tan)針法(fa)實時熒光PCR 技(ji)術(shu),根(gen)據(ju)豬(zhu)德(de)爾塔(ta)冠狀病毒(du)基因(yin)設(she)計特異(yi)性引物(wu)和熒光探(tan)針,用(yong)熒光PCR技(ji)術(shu)對(dui)豬(zhu)德(de)爾塔(ta)冠狀病毒(du)的核(he)酸進(jin)行體(ti)外(wai)擴增(zeng)檢(jian)測,用於(yu)臨(lin)床上(shang)對(dui)可疑(yi)感染病(bing)料的病(bing)原學(xue)診斷(duan)。
【試劑組(zu)成】
包(bao)裝規格 | 25T/盒(he) | 50T/盒(he) |
PCR反(fan)應液 | 500 μL×1管(guan) | 1000 μL×1管(guan) |
陽(yang)性對(dui)照(zhao) | 40 μL×1管(guan) | 40 μL×1管(guan) |
陰(yin)性對(dui)照(zhao) | 40 μL×1管(guan) | 40 μL×1管(guan) |
說(shuo)明(ming)書(shu) | 1份(fen) | 1份(fen) |
說(shuo)明(ming):不同批(pi)號的試劑盒(he)組(zu)分不可(ke)交互使用(yong)
【儲(chu)存(cun)條(tiao)件(jian)及(ji)有效期】
避(bi)光(guang)-20℃以(yi)下保(bao)存(cun),避(bi)免反(fan)復(fu)凍(dong)融,有效期12個月。
【適用(yong)儀(yi)器】 ABI 系(xi)列、Bio-Rad系(xi)列、Agilent Stratagene MX系(xi)列、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系(xi)列、杭州(zhou)博(bo)日系(xi)列等(deng)多通道實時熒光定量PCR儀(yi)。
【檢(jian)驗(yan)方法(fa)】
1. 試劑準備(bei)(試劑準備(bei)區)
(1)從(cong)冰(bing)箱(xiang)中(zhong)取(qu)出(chu)試劑盒(he), 從(cong)試劑盒(he)中(zhong)取(qu)出(chu)實驗(yan)所需試劑,充(chong)分(fen)融化(hua)混(hun)勻並(bing)瞬(shun)時離(li)心(xin)以(yi)去除管(guan)壁(bi)附(fu)著液體。
(2)核(he)算(suan)當次實驗(yan)所需要(yao)的反(fan)應數(n),並根(gen)據(ju)如(ru)下表所示反(fan)應體系(xi)計算(suan)當次實驗(yan)所需要(yao)的各種試劑量(liang)。
n =陰(yin)性對(dui)照(zhao)數(1T)+陽(yang)性對(dui)照(zhao)數(1T)+誤(wu)差預(yu)留(liu)量(liang)(1T)+樣(yang)本數
單(dan)反(fan)液配制(zhi)表(每(mei)份(fen)) | PCR反(fan)應液(UNG酶(mei)及Taq酶(mei)) | 20 μL |
(3)在無菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)加入(ru)上(shang)述(shu)試劑,充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)後瞬時離(li)心(xin)。按照(zhao)20μL/管(guan)分裝量(liang)將(jiang)試劑分(fen)裝至PCR反(fan)應管(guan)。
(4)蓋(gai)緊PCR反(fan)應管(guan)蓋(gai)後將(jiang)PCR反(fan)應管(guan)轉(zhuan)移(yi)至樣(yang)本處理區(qu)。剩(sheng)余試劑放(fang)回-20℃以(yi)下冰(bing)箱(xiang)冷凍(dong)保存(cun)。
2.樣(yang)本準備(bei)(樣(yang)本處理區(qu))
用(yong)DNA/RNA提(ti)取(qu)試劑盒(he)提(ti)取(qu)核(he)酸(suan)即(ji)可(ke),具體(ti)操(cao)作(zuo)按(an)照(zhao)其試劑盒(he)說(shuo)明(ming)書(shu)
3.加樣(yang)
在上(shang)述(shu)制(zhi)備好(hao)的PCR反(fan)應樣(yang)本管(guan)中(zhong)分(fen)別(bie)加入(ru)處(chu)理好(hao)的待(dai)測標本DNA各5 μl、終體積25 μl/管(guan),蓋(gai)好(hao)PCR反(fan)應蓋(gai)混(hun)勻(yun)後瞬時低速(su)離(li)心(xin),轉(zhuan)移(yi)到(dao)PCR儀(yi)器上(shang)。陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)和陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)管(guan)則各加5 μL試劑盒(he)自(zi)帶的陰(yin)性對(dui)照(zhao)或陽性(xing)對(dui)照(zhao)品,終(zhong)體(ti)積為25 μl/管(guan),蓋(gai)好(hao)PCR反(fan)應蓋(gai)混(hun)勻(yun)後瞬時低速(su)離(li)心(xin),轉(zhuan)移(yi)到(dao)PCR儀(yi)器上(shang)。
4.PCR(PCR擴增(zeng)區(qu))
(1)取(qu)樣(yang)本處理區(qu)準備(bei)好的PCR反(fan)應管(guan),放置在實時熒光定量PCR儀(yi)樣(yang)品(pin)槽相應位置(zhi),並記錄放(fang)置順(shun)序(xu)。
(2)按(an)下表設(she)置儀(yi)器核酸(suan)擴增(zeng)相(xiang)關參數進(jin)行PCR擴增(zeng)。
反(fan)應體積 | 25 μL | 通道選擇 | FAM通道采(cai)集豬(zhu)德(de)爾塔(ta)冠狀病毒(du)熒光信號 |
PCR 反(fan)應 條(tiao)件(jian) | 步(bu)驟 | 條(tiao)件(jian) | 循(xun)環(huan)數 |
UNG處(chu)理 | 37℃:2分(fen)鐘(zhong)(min) | 1 | |
預(yu)變性(xing) | 95℃:3分(fen)鐘(zhong)(min) | 1 | |
PCR擴增(zeng) | 95℃:5秒(s) | 40 | |
55℃:40秒(s) (此(ci)階(jie)段(duan)結束時采(cai)集熒光信號) |
註(zhu):ABI系(xi)列熒光PCR儀(yi)在設(she)置時不選ROX校(xiao)正,設(she)置淬滅基團(tuan)選擇None。
【註(zhu)意事(shi)項(xiang)】
1.使(shi)用本試劑盒(he)的實驗(yan)室,應嚴格(ge)按照(zhao)國(guo)家有關部(bu)分頒布的有(you)關基因(yin)擴增(zeng)檢(jian)驗(yan)實驗(yan)室管(guan)理規範(fan)進(jin)行管(guan)理;
2.為(wei)避(bi)免RNA降(jiang)解(jie),樣(yang)本處理過程應在0-4℃條(tiao)件(jian)下(xia)操(cao)作(zuo),且(qie)完(wan)成實驗(yan)後立即(ji)上(shang)機(ji)檢(jian)測;樣(yang)本處理過程中(zhong)使(shi)用(yong)的器具耗(hao)材應經過無(wu)核酶(mei)處理;
3.各區域(yu)物(wu)品(pin)均為專(zhuan)用,不得交叉(cha)使(shi)用,以(yi)免汙(wu)染(ran);檢(jian)測結束後,應立即(ji)對(dui)工作(zuo)臺(tai)清潔(jie);
4.吸取(qu)反(fan)應液時,應盡量(liang)避(bi)免產(chan)生氣(qi)泡;上(shang) PCR 儀(yi)前,應註意檢(jian)查(zha)各反(fan)應管(guan)是否(fou)蓋(gai)緊,以(yi)免液體蒸發(fa)造(zao)成結果不準確(que);
5.試劑盒(he)所有試劑在使用前應該(gai)在常(chang)溫下充(chong)分(fen)融化(hua)混(hun)勻,並(bing)應瞬時離(li)心(xin);
6.試劑盒(he)內(nei)所配陰(yin)性和陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)在第(di)壹(yi)次使(shi)用前應全部(bu)轉(zhuan)移(yi)至標本準備(bei)區,並單獨存(cun)放(fang);
7.為(wei)防(fang)止熒光幹(gan)擾,應避(bi)免裸(luo)手(shou)直接接觸PCR反(fan)應管(guan),並應避(bi)免在PCR反(fan)應管(guan)上(shang)進(jin)行任(ren)何(he)標記;
8.檢(jian)測過程中(zhong)使(shi)用(yong)過的吸頭(tou),應直接打到盛(sheng)有(you) 10%次氯酸的廢(fei)物(wu)缸(gang)內(nei),檢(jian)測結束的PCR 反(fan)應管(guan),切(qie)忌開(kai)蓋(gai),並(bing)與其(qi)他廢(fei)棄(qi)物(wu)品(pin)壹(yi)同滅菌後丟(diu)棄(qi);工作(zuo)臺(tai)及(ji)各種實驗(yan)用品(pin)應定期用(yong) 10%次氯酸、75%酒(jiu)精或紫外燈進(jin)行消(xiao)毒(du);
9.儀(yi)器擴增(zeng)相(xiang)關參數應按照(zhao)本說(shuo)明(ming)書(shu)相(xiang)關要(yao)求進(jin)行設(she)置;不同批(pi)號試劑不能(neng)混用;並(bing)在有效期內(nei)使(shi)用(yong).
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