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PCR試(shi)劑盒
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50T轉(zhuan)基因植物(wu)CamV35SPCR試(shi)劑盒





產品(pin)簡(jian)介
轉(zhuan)基因植物(wu)CamV35SPCR試(shi)劑盒是(shi)我(wo)司實(shi)時熒(ying)光(guang)探針(zhen)法試劑盒,種類齊全(quan),精(jing)準(zhun)高(gao)效,現貨供(gong)應,歡(huan)迎廣(guang)大(da)新老(lao)客戶前(qian)來(lai)咨(zi)詢(xun)和選(xuan)購。
產品(pin)分(fen)類
【產品(pin)名稱】
商品(pin)名稱:轉(zhuan)基因植物(wu)CamV35SPCR試(shi)劑盒
【包裝(zhuang)規(gui)格】25T/盒、50T/盒
【檢(jian)驗(yan)原(yuan)理】本試劑盒采用TaqMan 探針(zhen)法實時熒(ying)光(guang)PCR 技術(shu),根(gen)據(ju)轉(zhuan)基因植物(wu)CamV35S基因設計特(te)異(yi)性(xing)引物(wu)和熒(ying)光(guang)探針(zhen),用(yong)熒(ying)光(guang)PCR技術(shu)對轉(zhuan)基因植物(wu)CamV35S的(de)核酸進行體(ti)外擴(kuo)增檢(jian)測(ce),用於臨(lin)床(chuang)上(shang)對可(ke)疑感(gan)染病(bing)料(liao)的(de)病原(yuan)學診斷(duan)。
我(wo)司的(de)實時熒(ying)光(guang)探針(zhen)法試劑盒種類齊全(quan)(涵蓋(gai)禽病、豬(zhu)病、馬牛(niu)羊(yang)病和水(shui)產動(dong)物(wu)病(bing)原體檢(jian)測(ce)),精準高效,多重(zhong)檢(jian)測(ce)(壹重(zhong)、雙(shuang)重(zhong)、三(san)重(zhong)),現貨供(gong)應歡(huan)迎廣(guang)大(da)新老(lao)客戶前(qian)來(lai)咨詢(xun)和選購。
【試劑組(zu)成】
包裝(zhuang)規(gui)格 | 25T/盒 | 50T/盒 |
反應液(ye) | 500μL×1 管(guan) | 500μL×2 管(guan) |
酶液 | 25μL×1 管(guan) | 50μL×1 管(guan) |
陽性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
陰(yin)性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
說(shuo)明:不同批(pi)號的(de)試劑盒組(zu)分(fen)不(bu)可(ke)交互(hu)使(shi)用
【儲存(cun)條(tiao)件(jian)及(ji)有效期】
-20℃±5℃,避(bi)光保(bao)存(cun)、運輸、反復凍(dong)融(rong)次數(shu)不超(chao)過 5 次,有效期 12 個(ge)月。
【適(shi)用儀器(qi)】 ABI7500、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系(xi)列熒(ying)光(guang)定(ding)量PCR 檢(jian)測(ce)儀。
【轉(zhuan)基因植物(wu)CamV35SPCR試(shi)劑盒使(shi)用方法】
1.樣品(pin)處(chu)理(樣本(ben)處(chu)理區)
核酸提(ti)取(qu) 推薦(jian)采用核酸提(ti)取(qu)或(huo)純(chun)化(hua)試劑(磁(ci)珠法或離心柱(zhu)法)進行核(he)酸提(ti)取(qu),請(qing)按照(zhao)試劑說(shuo)明書進行操(cao)作(zuo)。
2.試劑配制(試(shi)劑準備(bei)區(qu))根(gen)據(ju)待檢(jian)測(ce)樣本(ben)總(zong)數(shu),設所(suo)需(xu)要的(de)PCR 反應管(guan)管(guan)數(shu)為 N(N=樣本(ben)數(shu)+1 管(guan)陰(yin)性(xing)對照(zhao)+1 管(guan)陽性(xing)對照(zhao);反應管(guan)數(shu)每滿(man)10 份,多配制1 份),每測(ce)試反應體(ti)系(xi)配制如下(xia)表(biao):
試劑 | 反應液(ye) | 酶液 |
用量(樣本(ben)數(shu)為 N) | 19μL | 1μL |
將混(hun)合(he)好(hao)的(de)測(ce)試反應液(ye)分裝(zhuang)到 PCR 反應管(guan)中,20μL/管(guan)。
3.加樣(樣本(ben)處(chu)理區)將步(bu)驟 1 提取(qu)的(de)核酸、陽性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin)、陰(yin)性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin)各(ge)取(qu)5μL,分別加入(ru)相應的(de)反應管(guan)中,蓋(gai)好(hao)管(guan)蓋(gai),混(hun)勻,短(duan)暫離心。
4.PCR 擴(kuo)增(核(he)酸擴(kuo)增區(qu))
2.1 將待檢(jian)測(ce)反應管(guan)置(zhi)於(yu)熒(ying)光(guang)定(ding)量 PCR 儀反應槽(cao)內;
2.2 設置(zhi)好(hao)通道、樣品(pin)信(xin)息,反應體(ti)系(xi)設(she)置(zhi)為(wei) 25μL;熒(ying)光(guang)通道選(xuan)擇(ze):檢(jian)測(ce)通道(Reporter Dye)FAM,淬(cui)滅通道(Quencher Dye)NONE,ABI 系(xi)列儀器(qi)請勿(wu)選擇(ze) ROX 參(can)比熒(ying)光(guang),選擇(ze) None 即可(ke)。
2.3 推薦(jian)循環(huan)參(can)數(shu)設置(zhi):
步(bu)驟 | 循環數(shu) | 溫(wen)度(du) | 時間(jian) | 收集熒(ying)光(guang)信(xin)號 |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否(fou) |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否(fou) |
60℃ | 30sec | 是(shi) |
5.結果分析判定(ding)
5.1結果分析條(tiao)件(jian)設(she)定(ding)(請參(can)照(zhao)各儀(yi)器(qi)使(shi)用說(shuo)明書進行設(she)置(zhi),以(yi)分析 ABI7500 儀器(qi)為例(li)) 反應結(jie)束後(hou)自動(dong)保(bao)存(cun)結果,根(gen)據(ju)分析(xi)後圖(tu)像調(tiao)節 Baseline 的(de) Start 值、End 值以及(ji) Threshold 值(用戶可(ke)根(gen) 據實際情況自(zi)行調(tiao)整,Start 值可設在(zai) 3~15、End 值可設在(zai) 5~20,使(shi)閾值線位於(yu)擴(kuo)增曲(qu)線指(zhi)數(shu)期,陰(yin)性(xing)質(zhi)控(kong) 品(pin)的(de)擴(kuo)增曲(qu)線平(ping)直或低(di)於閾值線),點擊 Analyze 自動(dong)獲得分析(xi)結果。
5.2結果判斷(duan)
陽性(xing):檢(jian)測(ce)通道Ct 值≤40,且(qie)曲(qu)線有(you)明顯的(de)指(zhi)數(shu)增長(chang)曲(qu)線;
陰(yin)性(xing):樣本(ben)檢(jian)測(ce)結果無Ct 值,且(qie)無(wu)特(te)異(yi)性(xing)擴(kuo)增曲(qu)線;
可疑:樣本(ben)檢(jian)測(ce)結果40<Ct 值≤45,建議(yi)重(zhong)復(fu)檢(jian)測(ce),如果檢(jian)測(ce)通道仍為40值≤45,且(qie)曲(qu)線有(you)明顯的(de)增長(chang) 曲(qu)線,判定(ding)為陽性(xing),否(fou)則為(wei)陰(yin)性(xing)。
5.3 質(zhi)控(kong)標準(zhun) 陰(yin)性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin):無(wu)特異性(xing)擴(kuo)增曲(qu)線或(huo)無Ct 值顯示(shi);陽性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin):擴(kuo)增曲(qu)線有(you)明顯指(zhi)數(shu)增長(chang)期(qi),且(qie) Ct 值≤32;以上(shang)條(tiao)件(jian)應同時滿(man)足(zu),否(fou)則實(shi)驗(yan)視(shi)為無效。
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