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PCR試劑(ji)盒(he)
豬病(bing)PCR試劑(ji)盒(he)
50T豬水(shui)皰(pao)病(bing)毒(SVDV)核酸(suan)試劑(ji)盒(he)





產品(pin)簡(jian)介(jie)
豬水皰病(bing)毒(SVDV)核酸(suan)試劑(ji)盒(he)是我(wo)司(si)實時熒光(guang)探(tan)針法(fa)試劑(ji)盒(he),種(zhong)類(lei)齊(qi)全,精(jing)準(zhun)高(gao)效,現貨(huo)供應(ying),歡(huan)迎廣大新(xin)老客戶前來(lai)選(xuan)購。
產品(pin)分(fen)類(lei)
【產品(pin)名(ming)稱(cheng)】
商(shang)品(pin)名(ming)稱(cheng):豬(zhu)水(shui)皰病(bing)毒(SVDV)核酸(suan)試劑(ji)盒(he)
【包裝規格】25T/盒(he)、50T/盒(he)
【檢驗原(yuan)理(li)】本(ben)試劑(ji)盒(he)采用TaqMan 探(tan)針(zhen)法(fa)實時熒光(guang)PCR 技(ji)術,根(gen)據 豬(zhu)水(shui)皰病(bing)毒(SVDV)基因(yin)設計特異(yi)性(xing)引(yin)物和(he)熒光(guang)探(tan)針,用熒光(guang)PCR技(ji)術對豬(zhu)水(shui)皰病(bing)毒(SVDV)的核酸(suan)進(jin)行(xing)體(ti)外(wai)擴增檢測,用於(yu)臨(lin)床上對可疑感染(ran)病(bing)料的病(bing)原(yuan)學(xue)診斷(duan)。
【試劑(ji)組(zu)成】
包裝規格 | 25T/盒(he) | 50T/盒(he) |
反(fan)應(ying)液 | 500μL×1 管(guan) | 500μL×2 管(guan) |
酶液 | 25μL×1 管(guan) | 50μL×1 管(guan) |
陽(yang)性(xing)質控(kong)品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
陰性質(zhi)控(kong)品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
說(shuo)明(ming):不(bu)同批號(hao)的試劑(ji)盒(he)組分(fen)不(bu)可交互(hu)使用(yong)
【儲(chu)存條(tiao)件及(ji)有(you)效期(qi)】
-20℃±5℃,避(bi)光(guang)保存、運(yun)輸、反(fan)復(fu)凍融(rong)次(ci)數(shu)不(bu)超過 5 次(ci),有(you)效期(qi) 12 個(ge)月(yue)。
【適(shi)用(yong)儀器】 ABI7500、安(an)捷(jie)倫(lun) MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系列(lie)熒光(guang)定量PCR 檢測儀。
【使用(yong)方(fang)法(fa)】
1.樣品(pin)處(chu)理(樣本(ben)處(chu)理區(qu))
核酸(suan)提取 推(tui)薦采用核酸(suan)提取或(huo)純化試劑(ji)(磁(ci)珠(zhu)法(fa)或(huo)離心柱(zhu)法(fa))進(jin)行(xing)核酸(suan)提取, 請(qing)按(an)照試劑(ji)說(shuo)明書(shu)進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)。
2.試劑(ji)配制(試劑(ji)準(zhun)備(bei)區(qu))根(gen)據(ju)待檢測樣本(ben)總數(shu),設所需要的PCR 反(fan)應(ying)管(guan)管(guan)數(shu)為(wei) N(N=樣本(ben)數(shu)+1 管(guan)陰性對照+1 管(guan)陽(yang)性對照;反(fan)應(ying)管(guan)數(shu)每(mei)滿10 份,多(duo)配制1 份),每(mei)測試反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)配制如下表(biao):
試劑(ji) | 反(fan)應(ying)液 | 酶液 |
用(yong)量(樣本(ben)數(shu)為(wei) N) | 19μL | 1μL |
將混(hun)合好(hao)的測試反(fan)應(ying)液分(fen)裝到 PCR 反(fan)應(ying)管(guan)中(zhong),20μL/管(guan)。
3.加(jia)樣(樣本(ben)處(chu)理區(qu))將步驟 1 提取的核酸(suan)、陽(yang)性質控(kong)品(pin)、陰性質(zhi)控(kong)品(pin)各(ge)取5μL,分(fen)別(bie)加(jia)入(ru)相應(ying)的反(fan)應(ying)管(guan)中(zhong),蓋(gai)好(hao)管(guan)蓋,混(hun)勻,短(duan)暫(zan)離心。
4.PCR 擴增(核酸(suan)擴增區(qu))
2.1 將待檢測反(fan)應(ying)管(guan)置(zhi)於(yu)熒光(guang)定量 PCR 儀(yi)反(fan)應(ying)槽內;
2.2 設置好(hao)通道、樣品(pin)信(xin)息(xi),反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)設置為(wei) 25μL;熒光(guang)通道選(xuan)擇:檢測通道(Reporter Dye)FAM,淬(cui)滅(mie)通道(Quencher Dye)NONE,ABI 系(xi)列(lie)儀(yi)器請勿選(xuan)擇 ROX 參(can)比(bi)熒光(guang),選(xuan)擇 None 即(ji)可。
2.3 推(tui)薦循(xun)環(huan)參(can)數(shu)設置:
步(bu)驟 | 循(xun)環(huan)數(shu) | 溫(wen)度(du) | 時(shi)間 | 收(shou)集熒光(guang)信(xin)號(hao) |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否(fou) |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否(fou) |
60℃ | 30sec | 是(shi) |
5.結(jie)果分(fen)析(xi)判(pan)定
5.1結(jie)果分(fen)析(xi)條件設定(請(qing)參(can)照各儀(yi)器(qi)使用(yong)說(shuo)明(ming)書(shu)進(jin)行(xing)設置,以(yi)分(fen)析(xi) ABI7500 儀(yi)器(qi)為例(li)) 反(fan)應(ying)結(jie)束(shu)後自動(dong)保(bao)存結(jie)果,根據(ju)分(fen)析(xi)後圖像調(tiao)節(jie) Baseline 的 Start 值(zhi)、End 值(zhi)以(yi)及 Threshold 值(zhi)(用戶可根(gen) 據(ju)實際情況自行(xing)調整(zheng),Start 值(zhi)可設在(zai) 3~15、End 值(zhi)可設在(zai) 5~20,使閾值(zhi)線(xian)位(wei)於(yu)擴增曲線(xian)指數(shu)期(qi),陰性質(zhi)控(kong) 品(pin)的擴增曲線(xian)平(ping)直或(huo)低(di)於(yu)閾值(zhi)線(xian)),點(dian)擊(ji) Analyze 自(zi)動(dong)獲得分(fen)析(xi)結果。
5.2結(jie)果判(pan)斷(duan)
陽(yang)性(xing):檢測通道Ct 值(zhi)≤40,且(qie)曲線(xian)有(you)明顯的指數(shu)增長(chang)曲線(xian);
陰性:樣本(ben)檢測結果無Ct 值(zhi),且無特異(yi)性(xing)擴增曲線(xian);
可疑:樣本(ben)檢測結果40<Ct 值(zhi)≤45,建(jian)議(yi)重(zhong)復(fu)檢測,如果檢測通道仍(reng)為40值(zhi)≤45,且(qie)曲線(xian)有(you)明顯的增長(chang) 曲線(xian),判(pan)定為陽性,否(fou)則(ze)為陰性。
5.3 質(zhi)控(kong)標(biao)準(zhun) 陰性質(zhi)控(kong)品(pin):無特異(yi)性(xing)擴增曲線(xian)或(huo)無Ct 值(zhi)顯示;陽性質控(kong)品(pin):擴增曲線(xian)有(you)明顯指數(shu)增長(chang)期(qi),且(qie) Ct 值(zhi)≤32;以(yi)上條(tiao)件應(ying)同(tong)時滿足(zu),否(fou)則(ze)實驗視(shi)為(wei)無效(xiao)。
【豬(zhu)水(shui)皰病(bing)毒(SVDV)核酸(suan)試劑(ji)盒(he)註(zhu)意事(shi)項】
1.所(suo)有(you)操作(zuo)嚴(yan)格按(an)照說明(ming)書(shu)進(jin)行(xing);
2.試劑(ji)盒(he)內各(ge)種(zhong)組(zu)分(fen)使用(yong)前應(ying)自(zi)然(ran)融(rong)化,完(wan)quan混(hun)勻並短(duan)暫(zan)離心;
3.反(fan)應(ying)液應避光保(bao)存;
4.反(fan)應(ying)中(zhong)盡(jin)量避(bi)免(mian)氣(qi)泡(pao)存在(zai),管蓋(gai)需蓋緊(jin);
5.使用(yong)壹(yi)次(ci)性吸(xi)頭(tou)、壹(yi)次(ci)性手套(tao)和(he)各區(qu)專用工(gong)作(zuo)服;
6.樣本(ben)處(chu)理、試劑(ji)配制、加樣需在(zai)不(bu)同區(qu)進(jin)行(xing),以(yi)免(mian)交叉(cha)汙染;
7.實驗完(wan)畢(bi)後用 10%次(ci)氯酸(suan)或(huo) 75%酒精(jing)或(huo)紫外(wai)燈處(chu)理工作(zuo)臺和(he)移(yi)液器;
8.試劑(ji)盒(he)裏(li)所有(you)物品(pin)應(ying)視(shi)為汙染物對待,並按(an)照《微(wei)生物生物醫學(xue)實驗室生(sheng)物安全(quan)通則(ze)》進(jin)行(xing)處(chu)理。
我(wo)司(si)的實時熒光(guang)探(tan)針法(fa)試劑(ji)盒(he)種(zhong)類(lei)齊(qi)全(涵蓋禽(qin)病(bing)、豬病(bing)、馬牛(niu)羊(yang)病(bing)和(he)水產動物病(bing)原(yuan)體(ti)檢測),精準(zhun)高(gao)效,多(duo)重(zhong)檢測(壹重(zhong)、雙重、三(san)重),現貨(huo)供應(ying)歡(huan)迎廣大新(xin)老客戶前來(lai)選(xuan)購。
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