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PCR試劑(ji)盒
豬(zhu)病PCR試劑(ji)盒
50T豬(zhu)藍耳(er)病病毒(du)經(jing)典(dian)型(PRRSV-C)PCR試(shi)劑(ji)盒





產品簡(jian)介
豬(zhu)藍耳(er)病病毒(du)經(jing)典(dian)型(PRRSV-C)PCR試(shi)劑(ji)盒是(shi)我司(si)實(shi)時熒(ying)光探針法(fa)試(shi)劑(ji)盒,種類齊全,精準(zhun)高效(xiao),現(xian)貨(huo)供(gong)應,歡(huan)迎廣大新(xin)老(lao)客戶(hu)前(qian)來(lai)選(xuan)購。
產品分(fen)類(lei)
【產品名(ming)稱(cheng)】
商品名(ming)稱(cheng):豬(zhu)藍耳(er)病病毒(du)經(jing)典(dian)型(PRRSV-C)PCR試(shi)劑(ji)盒(熒(ying)光-PCR法(fa))
【包(bao)裝(zhuang)規格】25T/盒、50T/盒
【檢(jian)驗(yan)原(yuan)理(li)】本試劑(ji)盒采(cai)用(yong)TaqMan 探針法(fa)實(shi)時熒(ying)光PCR 技(ji)術(shu),根據 豬(zhu)藍耳(er)病病毒(du)經(jing)典(dian)型(PRRSV-C)基(ji)因(yin)設計特(te)異性(xing)引物(wu)和(he)熒(ying)光探針,用熒(ying)光PCR技(ji)術(shu)對豬(zhu)藍耳(er)病病毒(du)經(jing)典(dian)型(PRRSV-C)的(de)核酸進行體(ti)外(wai)擴(kuo)增(zeng)檢(jian)測,用於(yu)臨(lin)床(chuang)上(shang)對可(ke)疑(yi)感(gan)染(ran)病料(liao)的(de)病原(yuan)學(xue)診(zhen)斷。
【試(shi)劑(ji)組成】
包(bao)裝(zhuang)規格 | 25T/盒 | 50T/盒 |
反(fan)應液(ye) | 500μL×1 管(guan) | 500μL×2 管(guan) |
酶液(ye) | 25μL×1 管(guan) | 50μL×1 管(guan) |
陽(yang)性質(zhi)控品 | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
陰(yin)性(xing)質控品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
說(shuo)明:不(bu)同(tong)批(pi)號的(de)試劑盒組分(fen)不(bu)可(ke)交(jiao)互(hu)使(shi)用
【儲(chu)存(cun)條件(jian)及有(you)效(xiao)期】
-20℃±5℃,避(bi)光保(bao)存、運(yun)輸(shu)、反(fan)復凍融(rong)次數不(bu)超(chao)過(guo) 5 次(ci),有(you)效期 12 個(ge)月。
【適(shi)用(yong)儀(yi)器(qi)】 ABI7500、安(an)捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系列熒(ying)光定量(liang)PCR 檢(jian)測儀(yi)。
【使(shi)用方法(fa)】
1.樣品(pin)處理(li)(樣本處理(li)區)
核酸提(ti)取(qu) 推(tui)薦(jian)采(cai)用(yong)核酸提(ti)取(qu)或(huo)純(chun)化(hua)試劑(ji)(磁珠(zhu)法(fa)或(huo)離(li)心(xin)柱(zhu)法(fa))進行核酸提(ti)取(qu), 請按照(zhao)試劑(ji)說明書進行操(cao)作。
2.試(shi)劑(ji)配制(試劑準備區)根(gen)據待檢(jian)測樣本總數(shu),設所(suo)需(xu)要的(de)PCR 反(fan)應管管(guan)數為(wei) N(N=樣本數+1 管(guan)陰(yin)性對照(zhao)+1 管(guan)陽(yang)性對照(zhao);反應管數(shu)每滿(man)10 份(fen),多(duo)配制1 份(fen)),每(mei)測試反(fan)應體系(xi)配制如(ru)下(xia)表(biao):
試(shi)劑(ji) | 反(fan)應液(ye) | 酶液(ye) |
用(yong)量(liang)(樣本數為(wei) N) | 19μL | 1μL |
將混合好的(de)測試反(fan)應液(ye)分(fen)裝(zhuang)到(dao) PCR 反(fan)應管中(zhong),20μL/管(guan)。
3.加(jia)樣(樣本處理(li)區)將步(bu)驟(zhou) 1 提(ti)取(qu)的(de)核酸、陽(yang)性質(zhi)控品、陰性質控(kong)品(pin)各取5μL,分(fen)別(bie)加(jia)入(ru)相(xiang)應的(de)反應管中(zhong),蓋(gai)好(hao)管(guan)蓋(gai),混(hun)勻(yun),短(duan)暫離心(xin)。
4.PCR 擴(kuo)增(zeng)(核酸擴(kuo)增(zeng)區)
2.1 將待檢(jian)測反應管置(zhi)於(yu)熒(ying)光定量(liang) PCR 儀(yi)反(fan)應槽(cao)內;
2.2 設置(zhi)好通(tong)道(dao)、樣品(pin)信息,反應體系(xi)設置(zhi)為 25μL;熒(ying)光通道(dao)選(xuan)擇(ze):檢(jian)測通道(dao)(Reporter Dye)FAM,淬(cui)滅(mie)通道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系(xi)列儀(yi)器(qi)請勿選(xuan)擇(ze) ROX 參(can)比(bi)熒(ying)光,選(xuan)擇(ze) None 即(ji)可(ke)。
2.3 推(tui)薦(jian)循(xun)環參(can)數(shu)設置(zhi):
步(bu)驟(zhou) | 循(xun)環數 | 溫(wen)度 | 時間 | 收集熒(ying)光信號 |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否(fou) |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否(fou) |
60℃ | 30sec | 是(shi) |
5.結(jie)果(guo)分(fen)析(xi)判(pan)定
5.1結(jie)果(guo)分(fen)析(xi)條(tiao)件(jian)設定(請參(can)照(zhao)各儀(yi)器(qi)使(shi)用說明書進行設置(zhi),以分(fen)析(xi) ABI7500 儀(yi)器(qi)為例) 反(fan)應結束後(hou)自(zi)動(dong)保(bao)存結(jie)果(guo),根(gen)據分(fen)析(xi)後(hou)圖(tu)像調節 Baseline 的(de) Start 值、End 值以及 Threshold 值(用戶(hu)可(ke)根(gen) 據實(shi)際(ji)情況(kuang)自(zi)行調整,Start 值可(ke)設在(zai) 3~15、End 值可(ke)設在(zai) 5~20,使(shi)閾值線位(wei)於(yu)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)指數(shu)期,陰性(xing)質控(kong) 品(pin)的(de)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)平(ping)直(zhi)或(huo)低於(yu)閾(yu)值線),點擊 Analyze 自(zi)動(dong)獲得(de)分(fen)析(xi)結(jie)果。
5.2結(jie)果(guo)判(pan)斷
陽(yang)性:檢(jian)測通道(dao)Ct 值≤40,且曲(qu)線(xian)有明顯的(de)指數增(zeng)長(chang)曲(qu)線(xian);
陰(yin)性(xing):樣本檢(jian)測結果(guo)無Ct 值,且無特異性(xing)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian);
可(ke)疑(yi):樣本檢(jian)測結果(guo)40<Ct 值≤45,建議重(zhong)復檢(jian)測,如(ru)果檢(jian)測通道(dao)仍(reng)為40值≤45,且曲(qu)線(xian)有明顯的(de)增(zeng)長(chang) 曲(qu)線(xian),判(pan)定為(wei)陽(yang)性,否(fou)則為(wei)陰性(xing)。
5.3 質(zhi)控(kong)標(biao)準(zhun) 陰(yin)性(xing)質控品(pin):無特(te)異性(xing)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)或無(wu)Ct 值顯示(shi);陽(yang)性質(zhi)控品:擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)有明顯指數(shu)增(zeng)長(chang)期,且 Ct 值≤32;以上(shang)條件(jian)應同(tong)時滿(man)足,否則實(shi)驗(yan)視(shi)為(wei)無效。
3. 檢(jian)測方法(fa)的(de)局限性
1. 樣本檢(jian)測結果(guo)與(yu)樣本收集、處(chu)理(li)、運(yun)送(song)以及保(bao)存質(zhi)量(liang)有(you)關;
2. 樣本提(ti)取(qu)過(guo)程(cheng)中(zhong)沒(mei)有(you)控(kong)制好交(jiao)叉(cha)汙染,會出現(xian)假陽(yang)性結(jie)果;
3. 陽(yang)性對照(zhao)、擴(kuo)增(zeng)產物(wu)泄(xie)漏,會導致假(jia)陽(yang)性結(jie)果;
4. 病原(yuan)體在(zai)流(liu)行過(guo)程(cheng)中(zhong)基(ji)因(yin)突(tu)變、重(zhong)組,會導致假(jia)陰(yin)性結果(guo);
5. 不(bu)同(tong)的(de)提(ti)取(qu)方(fang)法(fa)存(cun)在(zai)提(ti)取(qu)效(xiao)率差異,會導致假(jia)陰(yin)性結果(guo);
6. 試(shi)劑(ji)運輸,保(bao)存不(bu)當(dang)或(huo)試(shi)劑配制不(bu)準(zhun)確(que)引起的(de)試劑檢(jian)測效能(neng)下(xia)降(jiang),出(chu)現(xian)假陰(yin)性或(huo)定(ding)量(liang)檢(jian)測不(bu)準(zhun)確(que)的(de)結果;
7. 本檢(jian)測結果(guo)僅供參(can)考(kao),如(ru)須確(que)診(zhen)請結合臨(lin)床(chuang)癥(zheng)狀以及其(qi)他檢(jian)測手段(duan)。
【豬(zhu)藍耳(er)病病毒(du)經(jing)典(dian)型(PRRSV-C)PCR試(shi)劑(ji)盒註(zhu)意(yi)事項】
1.所(suo)有(you)操作嚴格按(an)照(zhao)說明書進行;
2.試(shi)劑(ji)盒內各種組分(fen)使(shi)用前(qian)應自(zi)然(ran)融(rong)化(hua),完(wan)quan混(hun)勻(yun)並(bing)短暫(zan)離心(xin);
3.反(fan)應液(ye)應避(bi)光保(bao)存;
4.反(fan)應中盡(jin)量(liang)避(bi)免(mian)氣泡(pao)存(cun)在(zai),管蓋(gai)需(xu)蓋(gai)緊;
5.使(shi)用壹次性(xing)吸(xi)頭、壹(yi)次(ci)性手(shou)套和各區專(zhuan)用(yong)工(gong)作服;
6.樣本處理(li)、試(shi)劑(ji)配制、加樣需(xu)在(zai)不(bu)同(tong)區進行,以免(mian)交(jiao)叉(cha)汙染;
7.實(shi)驗(yan)完(wan)畢後(hou)用(yong) 10%次(ci)氯(lv)酸或 75%酒(jiu)精(jing)或紫外(wai)燈處(chu)理(li)工(gong)作臺和(he)移液(ye)器(qi);
8.試(shi)劑(ji)盒裏所(suo)有(you)物(wu)品(pin)應視為(wei)汙染物(wu)對待,並(bing)按照(zhao)《微生物(wu)生物(wu)醫(yi)學(xue)實(shi)驗(yan)室(shi)生物(wu)安(an)全通則》進行處(chu)理(li)。
我(wo)司(si)的(de)實(shi)時熒(ying)光探針法(fa)試(shi)劑(ji)盒種類齊全(涵(han)蓋(gai)禽(qin)病、豬(zhu)病、馬牛(niu)羊病和水(shui)產動(dong)物(wu)病原(yuan)體檢(jian)測),精準(zhun)高效(xiao),多(duo)重(zhong)檢(jian)測(壹重(zhong)、雙(shuang)重(zhong)、三重(zhong)),現(xian)貨(huo)供(gong)應歡(huan)迎廣大新(xin)老(lao)客戶(hu)前(qian)來(lai)選(xuan)購。
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