產(chan)品(pin)簡(jian)介(jie)

豬藍(lan)耳(er)病毒(du)(歐(ou)洲株(zhu))核(he)酸(suan)試劑盒是(shi)我司(si)實時熒光探針法(fa)試劑盒,種(zhong)類齊(qi)全(quan),精(jing)準高(gao)效(xiao)，現(xian)貨(huo)供應,歡(huan)迎廣大(da)新老客戶(hu)前(qian)來選(xuan)購。

【產(chan)品(pin)名稱(cheng)】

商品(pin)名稱(cheng)：豬藍(lan)耳(er)病毒(du)(歐(ou)洲株(zhu))核(he)酸(suan)試劑盒(熒(ying)光-PCR法(fa))

【包裝規格】25T/盒、50T/盒

【檢驗原理】本試劑盒采(cai)用(yong)TaqMan 探針法(fa)實時熒光PCR 技術，根(gen)據 豬藍(lan)耳(er)病毒(du)(歐(ou)洲株(zhu))基(ji)因(yin)設計特異(yi)性(xing)引(yin)物和(he)熒(ying)光探針，用(yong)熒(ying)光PCR技術對豬藍(lan)耳(er)病毒(du)(歐(ou)洲株(zhu))的(de)核酸(suan)進行體外擴(kuo)增(zeng)檢測(ce)，用於(yu)臨床上對可(ke)疑(yi)感(gan)染(ran)病料(liao)的(de)病原學診斷(duan)。

【試劑組(zu)成】

說(shuo)明：不同(tong)批號的(de)試劑盒組(zu)分不(bu)可(ke)交(jiao)互(hu)使(shi)用(yong)

【儲(chu)存條件及有(you)效(xiao)期(qi)】

 -20℃±5℃，避光保存、運輸、反復凍融次數(shu)不超過 5 次，有(you)效(xiao)期(qi) 12 個(ge)月(yue)。

【適(shi)用(yong)儀器(qi)】 ABI7500、安(an)捷倫(lun) MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系(xi)列熒光定(ding)量PCR 檢測(ce)儀。

【使(shi)用(yong)方法(fa)】

1.樣品(pin)處理（樣本處理區）

 核酸(suan)提(ti)取(qu) 推(tui)薦(jian)采(cai)用(yong)核(he)酸(suan)提(ti)取(qu)或(huo)純化(hua)試劑（磁(ci)珠法(fa)或(huo)離心(xin)柱(zhu)法(fa)）進(jin)行核酸(suan)提(ti)取(qu)， 請(qing)按照試劑說(shuo)明書進(jin)行操作。

2.試劑配(pei)制(zhi)（試劑準備區）根(gen)據待檢測(ce)樣本總(zong)數，設(she)所需要(yao)的(de)PCR 反應管(guan)管數為 N(N=樣本數+1 管(guan)陰性對照+1 管陽(yang)性對照；反應管(guan)數每(mei)滿(man)10 份(fen)，多配制(zhi)1 份(fen))，每(mei)測(ce)試反應體(ti)系(xi)配制(zhi)如下(xia)表：

將(jiang)混合(he)好(hao)的(de)測(ce)試反應液(ye)分裝到 PCR 反應管(guan)中，20μL/管。

3.加(jia)樣（樣(yang)本處理區）將(jiang)步驟 1 提(ti)取(qu)的(de)核酸(suan)、陽(yang)性質(zhi)控品(pin)、陰性質控(kong)品(pin)各取(qu)5μL，分別加(jia)入相(xiang)應的(de)反應管(guan)中，蓋好(hao)管(guan)蓋，混(hun)勻(yun)，短(duan)暫(zan)離心(xin)。

4.PCR 擴(kuo)增(zeng)（核酸(suan)擴(kuo)增(zeng)區）

2.1 將(jiang)待檢測(ce)反應管(guan)置於(yu)熒(ying)光定(ding)量 PCR 儀(yi)反應槽(cao)內；

2.2 設(she)置好(hao)通(tong)道(dao)、樣品(pin)信(xin)息(xi)，反應體(ti)系(xi)設置為 25μL；熒(ying)光通(tong)道(dao)選擇(ze)：檢測(ce)通(tong)道(dao)（Reporter Dye）FAM，淬(cui)滅(mie)通(tong)道(dao)（Quencher Dye）NONE，ABI 系(xi)列儀器請(qing)勿(wu)選擇(ze) ROX 參比熒(ying)光，選擇(ze) None 即可。

2.3 推薦(jian)循(xun)環參數設(she)置：

5.結(jie)果(guo)分析判(pan)定(ding)

5.1結果分析條件設定(ding)（請(qing)參照各儀(yi)器使(shi)用(yong)說(shuo)明書進(jin)行設置，以(yi)分析 ABI7500 儀器(qi)為例(li)） 反(fan)應結(jie)束後(hou)自動(dong)保存結果(guo)，根據分析後(hou)圖(tu)像(xiang)調(tiao)節(jie) Baseline 的(de) Start 值、End 值以(yi)及 Threshold 值（用(yong)戶(hu)可根(gen) 據實際情(qing)況(kuang)自行調整(zheng)，Start 值可(ke)設(she)在 3～15、End 值可(ke)設(she)在 5～20，使(shi)閾(yu)值線(xian)位(wei)於(yu)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)指(zhi)數(shu)期(qi)，陰性質控(kong) 品(pin)的(de)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)平(ping)直或(huo)低於(yu)閾(yu)值線(xian)），點(dian)擊(ji) Analyze 自(zi)動(dong)獲(huo)得分析結(jie)果(guo)。

5.2結果(guo)判斷(duan)

陽(yang)性：檢測(ce)通(tong)道(dao)Ct 值≤40，且(qie)曲(qu)線(xian)有(you)明(ming)顯的(de)指數增(zeng)長曲(qu)線(xian)；

陰性：樣本檢測(ce)結果(guo)無Ct 值，且(qie)無特(te)異(yi)性(xing)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)；

可疑(yi)：樣(yang)本檢測(ce)結果(guo)40＜Ct 值≤45，建議重(zhong)復(fu)檢測(ce)，如果檢測(ce)通(tong)道(dao)仍為40值≤45，且(qie)曲(qu)線(xian)有(you)明(ming)顯的(de)增(zeng)長 曲(qu)線(xian)，判(pan)定(ding)為陽(yang)性，否(fou)則為陰性。

5.3 質控(kong)標準 陰性質控(kong)品(pin)：無特(te)異(yi)性(xing)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)或(huo)無Ct 值顯(xian)示(shi)；陽(yang)性質(zhi)控品(pin)：擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線(xian)有(you)明(ming)顯指數增(zeng)長期(qi)，且(qie) Ct 值≤32；以上條件應同(tong)時滿(man)足，否(fou)則實驗視為無效(xiao)。

3. 檢測(ce)方法(fa)的(de)局限(xian)性

1. 樣本檢測(ce)結果(guo)與(yu)樣(yang)本收(shou)集、處理、運送以(yi)及保存質量有(you)關(guan)；

2. 樣(yang)本提(ti)取(qu)過程中沒(mei)有控(kong)制(zhi)好(hao)交(jiao)叉(cha)汙染(ran)，會出現(xian)假陽(yang)性結(jie)果；

3. 陽(yang)性對照、擴(kuo)增(zeng)產(chan)物(wu)泄(xie)漏(lou)，會導致(zhi)假(jia)陽(yang)性結(jie)果；

4. 病原體在流(liu)行過程中基因突變(bian)、重(zhong)組(zu)，會導致(zhi)假(jia)陰性結果(guo)；

5. 不同(tong)的(de)提(ti)取(qu)方法(fa)存在提(ti)取(qu)效(xiao)率差(cha)異(yi)，會導致(zhi)假(jia)陰性結果(guo)；

6. 試劑運(yun)輸，保存不當(dang)或(huo)試劑配(pei)制(zhi)不準確引起的(de)試劑檢測(ce)效(xiao)能(neng)下(xia)降(jiang)，出(chu)現(xian)假(jia)陰性或定(ding)量檢測(ce)不準確的(de)結果；

7. 本檢測(ce)結果(guo)僅供參考，如須(xu)確(que)診請(qing)結(jie)合(he)臨床癥狀(zhuang)以及其(qi)他檢測(ce)手(shou)段。

【豬藍(lan)耳(er)病毒(du)(歐(ou)洲株(zhu))核(he)酸(suan)試劑盒(熒(ying)光-PCR法(fa))註意(yi)事(shi)項(xiang)】

1.所有操作嚴(yan)格按照說(shuo)明書進(jin)行；

2.試劑盒內(nei)各(ge)種(zhong)組(zu)分使(shi)用(yong)前(qian)應自(zi)然融化(hua)，完(wan)quan混(hun)勻(yun)並短(duan)暫(zan)離心(xin)；

3.反(fan)應液(ye)應避(bi)光保存；

4.反應中盡(jin)量避(bi)免(mian)氣(qi)泡存在，管蓋需(xu)蓋緊(jin)；

5.使(shi)用(yong)壹次性(xing)吸頭(tou)、壹次性(xing)手(shou)套和(he)各(ge)區(qu)專(zhuan)用(yong)工作服(fu)；

6.樣(yang)本處理、試劑配(pei)制(zhi)、加(jia)樣需(xu)在不同(tong)區進(jin)行，以免交(jiao)叉(cha)汙染(ran)；

7.實驗完(wan)畢(bi)後用 10%次氯(lv)酸(suan)或 75%酒(jiu)精(jing)或(huo)紫外燈(deng)處理工作臺和(he)移(yi)液(ye)器；

8.試劑盒裏所有物(wu)品(pin)應視(shi)為汙染(ran)物對待，並(bing)按照《微(wei)生物(wu)生物(wu)醫學實驗室生物(wu)安(an)全(quan)通(tong)則(ze)》進行處理。

我司(si)的(de)實時熒光探針法(fa)試劑盒種(zhong)類齊(qi)全(quan)（涵(han)蓋禽病、豬(zhu)病(bing)、馬(ma)牛(niu)羊(yang)病(bing)和(he)水產(chan)動(dong)物病原體(ti)檢測(ce)），精(jing)準高(gao)效(xiao)，多重(zhong)檢測(ce)（壹重(zhong)、雙(shuang)重(zhong)、三重(zhong)），現(xian)貨供應歡(huan)迎廣大(da)新老客戶(hu)前(qian)來選(xuan)購。