口(kou)蹄疫病毒非(fei)結構蛋白(bai)3ABC 阻斷ELISA 抗體(ti)檢測(ce)試劑盒(he)說(shuo)明書(shu)

   口蹄疫病毒非(fei)結構蛋白(bai)3ABC 阻斷ELISA 抗體(ti)檢測(ce)試劑盒(he)說(shuo)明書(shu)

【獸(shou)用名(ming)稱(cheng)】

通 用 名  口蹄疫病毒非(fei)結構蛋白(bai) 3ABC 阻斷 ELISA 抗體(ti)檢測(ce)試劑盒(he)

商(shang) 品(pin) 名  無

英 文 名  Foot and Mouth Disease Virus Non-structural Protein 3ABC Antibody Block

ELISA Kit

漢語(yu)拼(pin)音(yin)  Koutiyibingdu Feijiegoudanbai 3ABC Zuduan ELISA Kangtijiance Shijihe

【主(zhu)要組(zu)分與含量】

【作用與(yu)用途(tu)】  用於(yu)檢(jian)測牛、羊(yang)和(he)豬血清中(zhong)口蹄疫病毒非(fei)結構蛋白(bai) 3ABC 抗體(ti)。 【註意事(shi)項】

（1）實(shi)驗(yan)前，將(jiang)試劑盒(he)所有(you)組(zu)分取出置溫(wen)箱(xiang)（25℃± 3） 回(hui)溫(wen)至少(shao)30 分鐘，實(shi)驗(yan)完成後(hou) 放(fang)回(hui)2～8℃保存。

（2）若試劑盒(he)陰(yin)陽(yang)性對(dui)照(zhao)、酶(mei)標(biao)記物(wu)出現(xian)少量懸(xuan)浮(fu)物(wu)，屬(shu)正常(chang)現(xian)象(xiang)。

（3）請在(zai)試劑盒(he)規(gui)定的(de)有(you)效(xiao)期(qi)內(nei)使用；禁(jin)止(zhi)非(fei)同批試劑盒(he)混用(yong)。

（4）沒有(you)用(yong)完(wan)的(de)抗原(yuan)包被板(ban)應(ying)貯(zhu)存在密(mi)封(feng)塑(su)料(liao)袋(dai)內(nei)，於(yu) 2～8℃存放(fang)。

（5）避免(mian)底(di)物(wu)顯色(se)液暴露於(yu)強(qiang)光(guang)，避(bi)免接觸氧(yang)化(hua)劑(ji)。

（6）先使用血清稀(xi)釋(shi)板稀釋(shi)完所有(you)的(de)待(dai)檢(jian)血清，再(zai)將(jiang)稀(xi)釋(shi)好的(de)血清轉(zhuan)移到(dao)抗原(yuan)包被板(ban)上(shang)， 使反應(ying)時(shi)間(jian)壹(yi)致(zhi)。

（7）濃(nong)縮洗滌(di)液(ye)用(yong)蒸餾(liu)水(shui)或純水稀(xi)釋(shi)，如果發現(xian)有(you)結(jie)晶(jing)加熱(re)使其(qi)溶解(jie)後(hou)再使用。

（8）嚴格(ge)按照(zhao)操(cao)作程(cheng)序，仔細的(de)吸液、計時，充分洗滌(di)，對(dui)於(yu)獲得精確(que)的(de)結果(guo)是非(fei)常(chang)必 要的(de)。

【用法(fa)與判定】

1    用法(fa)

1. 1    樣品(pin)準備(bei)  取動(dong)物(wu)全血，待(dai)血液凝(ning)固(gu)後(hou)， 以 4000r/min 離心(xin) 10 分鐘，收(shou)集血清； 或待(dai)血液凝(ning)固(gu)後(hou)自然(ran)析出血清，再(zai)收(shou)集血清。血清應(ying)清(qing)亮(liang)，無(wu)溶血。

1.2    洗滌(di)液(ye)配(pei)制  使用前(qian)，將(jiang) 20 倍濃(nong)縮洗滌(di)液(ye)用(yong)蒸餾(liu)水(shui)或純水作 20 倍稀(xi)釋(shi)（例(li)如(ru)： 10ml 的(de)濃(nong)縮洗滌(di)液(ye)加上(shang) 190ml 純水(shui)），混勻(yun)。置 2~8℃保存，可(ke)保存 7 日。

1.3    待(dai)檢(jian)血清和(he)對(dui)照(zhao)的(de)稀釋(shi)

1.3. 1    待(dai)檢(jian)血清的(de)稀釋(shi)  將(jiang)待(dai)檢(jian)血清在(zai)血清稀(xi)釋(shi)板中按 1:1 稀釋(shi)（例(li)如(ru)：100μl 樣品(pin)稀(xi) 釋(shi)液中加 100μl 待(dai)檢(jian)血清）。

1.3.2    對(dui)照(zhao)的(de)稀釋(shi)  將(jiang)陰(yin)性對(dui)照(zhao)和(he)陽(yang)性對(dui)照在(zai)血清稀(xi)釋(shi)板中按 1:1 稀釋(shi)（例(li)如(ru)： 120μl 樣品(pin)稀(xi)釋(shi)液中加 120μl 對(dui)照(zhao)）。

1.4    操(cao)作步(bu)驟(zhou)

1.4. 1    取抗(kang)原(yuan)包被板(ban)（根(gen)據樣品(pin)多(duo)少(shao)，可(ke)拆開分次使用） ，每(mei)孔加入(ru)稀釋(shi)好的(de)洗滌(di)液(ye) 300μl ，無需靜(jing)置，甩(shuai)掉板(ban)孔中的(de)洗滌(di)液(ye)，重(zhong)復洗滌(di)共計 2 次，最(zui)後(hou)壹次在吸水材料(liao)上(shang)拍幹(gan)。

1.4.2    將(jiang)稀(xi)釋(shi)好的(de)待(dai)檢(jian)血清、陰(yin)陽(yang)性對(dui)照(zhao)各(ge)取 100µl 加入(ru)到(dao)抗原(yuan)包被板(ban)孔中，待(dai)檢(jian)血清 設 1 孔，陰、陽(yang)性對(dui)照(zhao)各(ge)設 2 孔，置 37℃溫(wen)育(yu) 60 分鐘。

1.4.3    甩(shuai)掉板(ban)孔中的(de)液體(ti)，每(mei)孔加入(ru)稀釋(shi)好的(de)洗滌(di)液(ye) 300μl ，無需靜(jing)置，甩(shuai)掉板(ban)孔中的(de) 洗滌(di)液(ye)，重(zhong)復洗滌(di)共計 5 次，最(zui)後(hou)壹次在吸水材(cai)料上(shang)拍(pai)幹(gan)。

1.4.4    每(mei)孔加入(ru)酶(mei)標(biao)記物(wu) 100μl ，置 37℃溫(wen)育(yu) 30 分鐘。

1.4.5    洗滌(di) 5 次，方(fang)法(fa)同 1.4.3。

1.4.6    每(mei)孔加入(ru)底(di)物(wu)顯色(se)液 100µl ，置室溫(wen)（20~25℃) 避光(guang)顯(xian)色(se) 10 分鐘。

1.4.7    每(mei)孔加入(ru)終止(zhi)液(ye) 50µl ，10 分鐘內在(zai)酶(mei)標(biao)儀上測(ce)定(ding)各孔 OD 630nm 值。

2    判定(ding)

2. 1    成立條件(jian)  陰性對(dui)照(zhao) OD630nm 平(ping)均(jun)值(zhi)＞0.5 ，陽(yang)性對(dui)照(zhao)的(de)阻斷率＞60%。

2.2    結果(guo)判(pan)定  S 為樣品(pin) OD630nm 值，N 為陰(yin)性對(dui)照(zhao)平(ping)均(jun) OD630nm 值，計算樣品(pin)阻斷率。 阻斷率

若被(bei)檢(jian)樣品(pin)的(de)阻斷率≥50% ，該樣品(pin)判(pan)為抗(kang)體(ti)陽(yang)性；

若被(bei)檢(jian)樣品(pin)的(de)阻斷率＜50% ，該樣品(pin)判(pan)為抗(kang)體(ti)陰性。

【規(gui)格(ge)】  96 孔/盒(he)或192 孔/盒(he)或480 孔/盒(he)

【貯藏(zang)與(yu)有(you)效(xiao)期(qi)】  2~8℃保存，有(you)效(xiao)期(qi)為 12 個月(yue) 

僅供科(ke)研(yan)使用