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PCR試劑(ji)盒(he)
豬(zhu)病(bing)PCR試劑(ji)盒(he)
50T口(kou)蹄(ti)疫病(bing)毒(du)O型(FMDV-O)核(he)酸試劑(ji)盒(he)





產(chan)品簡介
口(kou)蹄疫病(bing)毒(du)O型(FMDV-O)核(he)酸試劑(ji)盒(he)是(shi)我司實(shi)時(shi)熒(ying)光探(tan)針(zhen)法試劑(ji)盒(he),種類齊(qi)全(quan),精(jing)準(zhun)高(gao)效,現貨(huo)供(gong)應(ying),歡迎廣(guang)大(da)新(xin)老客(ke)戶(hu)前(qian)來選(xuan)購。
產(chan)品分類(lei)
【產(chan)品名稱(cheng)】
商(shang)品名稱(cheng):口(kou)蹄(ti)疫病(bing)毒(du)O型(FMDV-O)核(he)酸試劑(ji)盒(he)(熒(ying)光-PCR法)
【包(bao)裝(zhuang)規(gui)格(ge)】25T/盒(he)、50T/盒(he)
【檢(jian)驗(yan)原(yuan)理(li)】本(ben)試劑(ji)盒(he)采(cai)用(yong)TaqMan 探(tan)針(zhen)法實(shi)時(shi)熒(ying)光PCR 技(ji)術(shu),根(gen)據(ju) 口(kou)蹄(ti)疫病(bing)毒(du)O型(FMDV-O)基因(yin)設(she)計(ji)特(te)異(yi)性(xing)引物(wu)和(he)熒(ying)光探(tan)針(zhen),用熒(ying)光PCR技(ji)術(shu)對口(kou)蹄(ti)疫病(bing)毒(du)O型(FMDV-O)的核(he)酸(suan)進行(xing)體(ti)外(wai)擴增檢(jian)測(ce),用於(yu)臨(lin)床(chuang)上對可疑感染(ran)病(bing)料(liao)的病(bing)原(yuan)學(xue)診(zhen)斷。
【試劑(ji)組成】
包(bao)裝(zhuang)規(gui)格(ge) | 25T/盒(he) | 50T/盒(he) |
反(fan)應(ying)液 | 500μL×1 管(guan) | 500μL×2 管(guan) |
酶(mei)液 | 25μL×1 管(guan) | 50μL×1 管(guan) |
陽(yang)性(xing)質(zhi)控品 | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
陰(yin)性(xing)質(zhi)控品 | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
說(shuo)明(ming):不同批(pi)號的試劑(ji)盒(he)組分不(bu)可交互使用
【儲(chu)存(cun)條件(jian)及有(you)效期】
-20℃±5℃,避光保存、運輸、反復(fu)凍(dong)融(rong)次(ci)數(shu)不超過(guo) 5 次(ci),有(you)效期 12 個(ge)月(yue)。
【適(shi)用(yong)儀(yi)器】 ABI7500、安(an)捷倫(lun) MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系(xi)列(lie)熒(ying)光定量(liang)PCR 檢(jian)測(ce)儀(yi)。
【使(shi)用(yong)方(fang)法】
1.樣品處理(li)(樣本(ben)處(chu)理(li)區)
核(he)酸(suan)提(ti)取(qu) 推薦采用核(he)酸(suan)提(ti)取(qu)或(huo)純(chun)化(hua)試劑(ji)(磁(ci)珠(zhu)法或(huo)離(li)心柱(zhu)法)進行(xing)核(he)酸(suan)提(ti)取(qu), 請(qing)按照(zhao)試劑(ji)說(shuo)明(ming)書(shu)進行(xing)操作。
2.試劑(ji)配制(試劑(ji)準(zhun)備區)根(gen)據(ju)待檢(jian)測(ce)樣本(ben)總(zong)數,設所需要(yao)的PCR 反(fan)應(ying)管(guan)管(guan)數為(wei) N(N=樣本(ben)數(shu)+1 管(guan)陰性(xing)對照(zhao)+1 管(guan)陽(yang)性(xing)對照(zhao);反(fan)應(ying)管(guan)數每(mei)滿(man)10 份(fen),多(duo)配制1 份(fen)),每(mei)測(ce)試反應(ying)體系(xi)配制如下(xia)表:
試劑(ji) | 反(fan)應(ying)液 | 酶(mei)液 |
用(yong)量(liang)(樣本(ben)數(shu)為 N) | 19μL | 1μL |
將(jiang)混(hun)合(he)好(hao)的測(ce)試反應(ying)液分裝(zhuang)到 PCR 反(fan)應(ying)管(guan)中,20μL/管(guan)。
3.加(jia)樣(樣本(ben)處(chu)理(li)區)將(jiang)步(bu)驟(zhou) 1 提(ti)取(qu)的核(he)酸(suan)、陽(yang)性(xing)質(zhi)控品、陰性(xing)質控品各(ge)取(qu)5μL,分別(bie)加(jia)入相應(ying)的反(fan)應(ying)管(guan)中,蓋(gai)好(hao)管(guan)蓋(gai),混(hun)勻(yun),短(duan)暫(zan)離(li)心。
4.PCR 擴增(核(he)酸(suan)擴增區(qu))
2.1 將(jiang)待(dai)檢(jian)測(ce)反應(ying)管(guan)置於(yu)熒光定量(liang) PCR 儀(yi)反應(ying)槽(cao)內(nei);
2.2 設(she)置好(hao)通(tong)道(dao)、樣品信息(xi),反應(ying)體系(xi)設置為(wei) 25μL;熒(ying)光通道(dao)選(xuan)擇:檢(jian)測(ce)通(tong)道(dao)(Reporter Dye)FAM,淬(cui)滅(mie)通道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系(xi)列(lie)儀(yi)器請(qing)勿(wu)選(xuan)擇 ROX 參比熒光,選(xuan)擇 None 即(ji)可。
2.3 推薦循(xun)環(huan)參數設置:
步(bu)驟(zhou) | 循(xun)環(huan)數(shu) | 溫(wen)度(du) | 時(shi)間(jian) | 收(shou)集(ji)熒光信號 |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否 |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否 |
60℃ | 30sec | 是(shi) |
5.結(jie)果(guo)分析(xi)判定
5.1結(jie)果(guo)分析(xi)條件(jian)設定(請(qing)參照(zhao)各(ge)儀(yi)器使用說(shuo)明(ming)書(shu)進行(xing)設(she)置,以分析(xi) ABI7500 儀(yi)器為例) 反(fan)應(ying)結(jie)束(shu)後(hou)自動(dong)保存結(jie)果(guo),根(gen)據(ju)分析(xi)後(hou)圖(tu)像(xiang)調(tiao)節 Baseline 的 Start 值(zhi)、End 值(zhi)以及(ji) Threshold 值(zhi)(用(yong)戶(hu)可根(gen) 據(ju)實(shi)際情況(kuang)自行(xing)調(tiao)整(zheng),Start 值(zhi)可設在(zai) 3~15、End 值(zhi)可設在(zai) 5~20,使(shi)閾(yu)值線(xian)位(wei)於(yu)擴增曲(qu)線(xian)指(zhi)數期,陰性(xing)質(zhi)控 品的擴增曲(qu)線(xian)平(ping)直或(huo)低(di)於(yu)閾(yu)值線(xian)),點擊(ji) Analyze 自(zi)動(dong)獲(huo)得(de)分析(xi)結(jie)果(guo)。
5.2結(jie)果(guo)判斷
陽(yang)性(xing):檢(jian)測(ce)通(tong)道(dao)Ct 值(zhi)≤40,且曲(qu)線(xian)有(you)明(ming)顯的指(zhi)數增長曲(qu)線(xian);
陰(yin)性(xing):樣本(ben)檢(jian)測結(jie)果(guo)無(wu)Ct 值(zhi),且無(wu)特(te)異(yi)性(xing)擴增曲(qu)線(xian);
可疑:樣本(ben)檢(jian)測結(jie)果(guo)40<Ct 值(zhi)≤45,建(jian)議(yi)重(zhong)復(fu)檢(jian)測(ce),如果(guo)檢測通(tong)道(dao)仍為(wei)40值(zhi)≤45,且曲(qu)線(xian)有(you)明(ming)顯的增(zeng)長(chang) 曲(qu)線(xian),判定為陽(yang)性(xing),否則為(wei)陰(yin)性。
5.3 質(zhi)控標(biao)準(zhun) 陰(yin)性(xing)質(zhi)控品:無(wu)特(te)異(yi)性(xing)擴增曲(qu)線(xian)或(huo)無(wu)Ct 值(zhi)顯(xian)示(shi);陽(yang)性(xing)質(zhi)控品:擴增曲(qu)線(xian)有(you)明(ming)顯指(zhi)數增長期(qi),且 Ct 值(zhi)≤32;以上(shang)條件(jian)應(ying)同時(shi)滿足,否則實(shi)驗(yan)視(shi)為(wei)無(wu)效(xiao)。
【口(kou)蹄(ti)疫病(bing)毒(du)O型(FMDV-O)核(he)酸試劑(ji)盒(he)(熒(ying)光-PCR法)註意(yi)事(shi)項】
1.所(suo)有(you)操作嚴格按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)進行(xing);
2.試劑(ji)盒(he)內(nei)各(ge)種組分使(shi)用(yong)前(qian)應(ying)自然(ran)融化(hua),完quan混(hun)勻(yun)並短(duan)暫(zan)離(li)心;
3.反(fan)應(ying)液應(ying)避光保存;
4.反(fan)應(ying)中盡量(liang)避免氣(qi)泡(pao)存(cun)在,管(guan)蓋(gai)需(xu)蓋(gai)緊;
5.使(shi)用(yong)壹(yi)次(ci)性吸(xi)頭(tou)、壹次(ci)性手(shou)套和各(ge)區(qu)專(zhuan)用(yong)工(gong)作服;
6.樣本(ben)處(chu)理(li)、試劑(ji)配制、加(jia)樣需在(zai)不同區(qu)進行(xing),以免(mian)交叉汙染(ran);
7.實(shi)驗(yan)完畢後(hou)用 10%次(ci)氯(lv)酸(suan)或(huo) 75%酒(jiu)精(jing)或(huo)紫(zi)外(wai)燈(deng)處理(li)工(gong)作臺和(he)移(yi)液器;
8.試劑(ji)盒(he)裏(li)所(suo)有(you)物品應(ying)視為(wei)汙染(ran)物(wu)對待(dai),並按(an)照(zhao)《微(wei)生物生物醫(yi)學(xue)實(shi)驗(yan)室(shi)生物安(an)全(quan)通(tong)則》進行(xing)處(chu)理(li)。
我司的實(shi)時(shi)熒(ying)光探(tan)針(zhen)法試劑(ji)盒(he)種類齊(qi)全(quan)(涵(han)蓋(gai)禽(qin)病(bing)、豬(zhu)病(bing)、馬(ma)牛(niu)羊(yang)病(bing)和(he)水產(chan)動(dong)物(wu)病(bing)原(yuan)體檢測(ce)),精準(zhun)高(gao)效,多(duo)重(zhong)檢(jian)測(壹重(zhong)、雙(shuang)重(zhong)、三(san)重(zhong)),現貨(huo)供(gong)應(ying)歡迎廣(guang)大(da)新(xin)老客(ke)戶(hu)前(qian)來選(xuan)購。
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