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PCR試劑盒
豬病PCR試劑盒
50T豬流感(gan)(SIV)核(he)酸試劑盒(熒(ying)光-PCR法)





產(chan)品簡介
豬(zhu)流(liu)感(gan)(SIV)核(he)酸試劑盒(熒(ying)光-PCR法)是(shi)我司(si)實時(shi)熒(ying)光探針(zhen)法試劑盒,種(zhong)類齊(qi)全,精(jing)準高(gao)效(xiao),現貨(huo)供應(ying),歡(huan)迎廣大(da)新老(lao)客(ke)戶(hu)前(qian)來(lai)選購。
產品分類
相(xiang)關(guan)文章
【產品名(ming)稱(cheng)】
商品名(ming)稱(cheng):豬流感(gan)(SIV)核(he)酸試劑盒(熒(ying)光-PCR法)
【包裝規格(ge)】25T/盒、50T/盒
【檢驗(yan)原理】本試劑盒采用(yong)TaqMan 探針法實(shi)時(shi)熒(ying)光PCR 技(ji)術,根據(ju) 豬流感(gan)(SIV)基因設(she)計(ji)特(te)異(yi)性(xing)引物(wu)和(he)熒(ying)光探針(zhen),用(yong)熒(ying)光PCR技(ji)術對豬流感(gan)(SIV)的核(he)酸進行體外(wai)擴增檢測(ce),用於(yu)臨(lin)床上對可疑(yi)感(gan)染病料的病(bing)原學診斷(duan)。
【試劑組(zu)成(cheng)】
包裝規格(ge) | 25T/盒 | 50T/盒 |
反(fan)應(ying)液 | 500μL×1 管(guan) | 500μL×2 管(guan) |
酶(mei)液 | 25μL×1 管(guan) | 50μL×1 管(guan) |
陽(yang)性質控品 | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
陰性質控品 | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
說明:不同(tong)批(pi)號(hao)的(de)試劑盒組分不可(ke)交(jiao)互(hu)使(shi)用(yong)
【儲(chu)存條件(jian)及有(you)效(xiao)期】
-20℃±5℃,避光保存、運輸(shu)、反(fan)復凍(dong)融(rong)次數不超(chao)過 5 次,有(you)效(xiao)期 12 個(ge)月。
【適用(yong)儀(yi)器】 ABI7500、安(an)捷(jie)倫(lun) MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系(xi)列熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR 檢測(ce)儀(yi)。
【使用方(fang)法】
1.樣(yang)品處(chu)理(樣(yang)本(ben)處(chu)理區(qu))
核(he)酸提(ti)取 推薦采用(yong)核(he)酸提(ti)取或純化試劑(磁珠(zhu)法或(huo)離心(xin)柱法)進行核(he)酸提(ti)取, 請(qing)按照試劑說明書進行操(cao)作。
2.試劑配(pei)制(試劑準(zhun)備(bei)區)根據待檢測(ce)樣(yang)本(ben)總(zong)數,設(she)所(suo)需(xu)要(yao)的(de)PCR 反(fan)應(ying)管(guan)管(guan)數為 N(N=樣(yang)本(ben)數+1 管(guan)陰性對照+1 管(guan)陽(yang)性對照;反(fan)應(ying)管(guan)數每滿(man)10 份,多配(pei)制1 份),每測(ce)試反(fan)應(ying)體系(xi)配(pei)制如下表:
試劑 | 反(fan)應(ying)液 | 酶(mei)液 |
用量(liang)(樣(yang)本(ben)數為 N) | 19μL | 1μL |
將混合(he)好的(de)測(ce)試反(fan)應(ying)液分裝到 PCR 反(fan)應(ying)管(guan)中,20μL/管(guan)。
3.加(jia)樣(yang)(樣(yang)本(ben)處(chu)理區(qu))將步驟 1 提取的核(he)酸、陽(yang)性質控品、陰性質控品各取5μL,分別(bie)加(jia)入(ru)相應(ying)的反(fan)應(ying)管(guan)中,蓋好(hao)管(guan)蓋(gai),混勻(yun),短(duan)暫(zan)離心(xin)。
4.PCR 擴增(核(he)酸擴增區)
2.1 將待檢測(ce)反(fan)應(ying)管(guan)置(zhi)於(yu)熒(ying)光定(ding)量(liang) PCR 儀(yi)反(fan)應(ying)槽內(nei);
2.2 設(she)置(zhi)好(hao)通(tong)道、樣(yang)品信(xin)息(xi),反(fan)應(ying)體系(xi)設(she)置(zhi)為(wei) 25μL;熒(ying)光通(tong)道選擇:檢測(ce)通(tong)道(Reporter Dye)FAM,淬(cui)滅通(tong)道(Quencher Dye)NONE,ABI 系列儀(yi)器請(qing)勿選(xuan)擇 ROX 參比(bi)熒(ying)光,選擇 None 即可。
2.3 推薦循(xun)環(huan)參(can)數設(she)置(zhi):
步驟 | 循(xun)環(huan)數 | 溫(wen)度(du) | 時(shi)間(jian) | 收集熒(ying)光信號(hao) |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否(fou) |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否(fou) |
60℃ | 30sec | 是 |
5.結果(guo)分析判定(ding)
5.1結果(guo)分析條件(jian)設(she)定(ding)(請(qing)參照各儀(yi)器使(shi)用說明書進行設(she)置(zhi),以(yi)分析 ABI7500 儀(yi)器為(wei)例) 反(fan)應(ying)結束(shu)後自動(dong)保(bao)存(cun)結果(guo),根(gen)據(ju)分析後圖像(xiang)調(tiao)節(jie) Baseline 的 Start 值、End 值以(yi)及 Threshold 值(用(yong)戶(hu)可(ke)根(gen) 據實際(ji)情(qing)況(kuang)自行(xing)調(tiao)整(zheng),Start 值可(ke)設(she)在(zai) 3~15、End 值可(ke)設(she)在(zai) 5~20,使閾(yu)值線(xian)位(wei)於(yu)擴增曲線(xian)指(zhi)數期,陰性質控 品的(de)擴增曲線(xian)平(ping)直(zhi)或(huo)低(di)於(yu)閾(yu)值線(xian)),點擊(ji) Analyze 自動(dong)獲得分析結果(guo)。
5.2結果(guo)判斷(duan)
陽(yang)性:檢測(ce)通(tong)道Ct 值≤40,且曲線(xian)有(you)明顯(xian)的(de)指(zhi)數增長曲線(xian);
陰性:樣(yang)本(ben)檢測(ce)結果(guo)無(wu)Ct 值,且(qie)無(wu)特異(yi)性(xing)擴增曲線(xian);
可疑(yi):樣(yang)本(ben)檢測(ce)結果(guo)40<Ct 值≤45,建(jian)議重(zhong)復(fu)檢測(ce),如果檢測(ce)通(tong)道仍為(wei)40值≤45,且曲線(xian)有(you)明顯(xian)的(de)增(zeng)長 曲線(xian),判定(ding)為(wei)陽(yang)性,否(fou)則(ze)為(wei)陰性。
5.3 質控標(biao)準(zhun) 陰性質控品:無(wu)特(te)異(yi)性(xing)擴增曲線(xian)或(huo)無Ct 值顯(xian)示(shi);陽(yang)性質控品:擴增曲線(xian)有(you)明顯(xian)指(zhi)數增長期,且(qie) Ct 值≤32;以(yi)上(shang)條件(jian)應(ying)同(tong)時(shi)滿(man)足,否(fou)則(ze)實(shi)驗(yan)視(shi)為無(wu)效(xiao)。
3. 檢測(ce)方(fang)法的(de)局(ju)限性(xing)
1. 樣(yang)本(ben)檢測(ce)結果(guo)與(yu)樣(yang)本(ben)收(shou)集、處(chu)理、運送以(yi)及保(bao)存(cun)質量(liang)有(you)關;
2. 樣(yang)本(ben)提(ti)取過程中沒有(you)控制好(hao)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染,會出現假陽(yang)性結果(guo);
3. 陽(yang)性對照、擴增產物(wu)泄(xie)漏(lou),會導(dao)致假陽(yang)性結果(guo);
4. 病原體在流行過程中基因突(tu)變、重(zhong)組(zu),會導(dao)致假陰性結果(guo);
5. 不同(tong)的(de)提(ti)取方(fang)法存(cun)在(zai)提(ti)取效(xiao)率差異(yi),會導(dao)致假陰性結果(guo);
6. 試劑運輸(shu),保存不當或(huo)試劑配(pei)制不(bu)準確(que)引起(qi)的試劑檢測(ce)效(xiao)能下降,出現假陰性或定(ding)量(liang)檢測(ce)不準(zhun)確的(de)結果(guo);
7. 本檢測(ce)結果(guo)僅(jin)供參考(kao),如須確(que)診請(qing)結合(he)臨床癥狀(zhuang)以(yi)及其(qi)他檢測(ce)手段。
【豬流感(gan)(SIV)核(he)酸試劑盒(熒(ying)光-PCR法)註(zhu)意事項】
1.所有(you)操(cao)作嚴(yan)格(ge)按照說明書進行;
2.試劑盒內各種(zhong)組分使用(yong)前(qian)應(ying)自然融化(hua),完quan混勻(yun)並(bing)短(duan)暫離心(xin);
3.反(fan)應(ying)液應(ying)避光保存;
4.反(fan)應(ying)中盡量(liang)避免氣(qi)泡存在,管(guan)蓋(gai)需(xu)蓋(gai)緊(jin);
5.使用壹(yi)次(ci)性吸(xi)頭(tou)、壹(yi)次性手套(tao)和(he)各區專用工(gong)作服(fu);
6.樣(yang)本(ben)處(chu)理、試劑配(pei)制、加(jia)樣(yang)需(xu)在(zai)不(bu)同(tong)區(qu)進行,以(yi)免交(jiao)叉(cha)汙(wu)染;
7.實驗(yan)完畢(bi)後用 10%次氯酸(suan)或(huo) 75%酒精(jing)或紫(zi)外(wai)燈(deng)處(chu)理工(gong)作臺(tai)和(he)移液器;
8.試劑盒裏所(suo)有(you)物(wu)品應(ying)視為(wei)汙(wu)染物(wu)對待,並按照《微生物(wu)生物(wu)醫學(xue)實(shi)驗(yan)室(shi)生物(wu)安(an)全通(tong)則》進行處(chu)理。
我司(si)的實(shi)時(shi)熒(ying)光探針(zhen)法試劑盒種(zhong)類齊(qi)全(涵(han)蓋禽(qin)病(bing)、豬病、馬牛(niu)羊病和(he)水(shui)產動(dong)物(wu)病原體檢測(ce)),精(jing)準高(gao)效(xiao),多重(zhong)檢測(ce)(壹重(zhong)、雙重(zhong)、三(san)重),現貨供應(ying)歡(huan)迎廣大(da)新老(lao)客(ke)戶(hu)前(qian)來(lai)選購。
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