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PCR試劑盒(he)
豬(zhu)病(bing)PCR試(shi)劑盒(he)
50T高(gao)致病(bing)性(xing)豬(zhu)藍(lan)耳病(bing)病(bing)毒(du)(PRRSV-M)核(he)酸試(shi)劑盒(he)





產(chan)品(pin)簡介
高(gao)致病(bing)性(xing)豬(zhu)藍(lan)耳病(bing)病(bing)毒(du)(PRRSV-M)核(he)酸試(shi)劑盒(he)是(shi)我司(si)實(shi)時(shi)熒(ying)光(guang)探針(zhen)法(fa)試劑盒(he),種(zhong)類(lei)齊全(quan),精(jing)準(zhun)高(gao)效,現(xian)貨供應(ying),歡(huan)迎廣(guang)大(da)新(xin)老客(ke)戶前(qian)來(lai)選購(gou)。
產品(pin)分(fen)類(lei)
【產(chan)品名(ming)稱】
商(shang)品名(ming)稱:高(gao)致病(bing)性(xing)豬(zhu)藍(lan)耳病(bing)病(bing)毒(du)(PRRSV-M)核(he)酸試(shi)劑盒(he)(熒(ying)光(guang)-PCR法(fa))
【包(bao)裝(zhuang)規(gui)格(ge)】25T/盒(he)、50T/盒(he)
【檢(jian)驗原(yuan)理(li)】本(ben)試劑盒(he)采用TaqMan 探針(zhen)法(fa)實(shi)時(shi)熒(ying)光(guang)PCR 技(ji)術,根據 高(gao)致病(bing)性(xing)豬(zhu)藍(lan)耳病(bing)病(bing)毒(du)(PRRSV-M)基(ji)因設計特異性(xing)引物和(he)熒(ying)光(guang)探針(zhen),用熒(ying)光(guang)PCR技(ji)術對高(gao)致病(bing)性(xing)豬(zhu)藍(lan)耳病(bing)病(bing)毒(du)(PRRSV-M)的(de)核(he)酸進行體外擴(kuo)增(zeng)檢(jian)測,用於臨(lin)床(chuang)上對(dui)可疑感(gan)染病(bing)料(liao)的病(bing)原(yuan)學(xue)診斷(duan)。
【試(shi)劑組(zu)成(cheng)】
包(bao)裝(zhuang)規(gui)格(ge) | 25T/盒(he) | 50T/盒(he) |
反(fan)應(ying)液 | 500μL×1 管 | 500μL×2 管 |
酶液 | 25μL×1 管 | 50μL×1 管 |
陽(yang)性(xing)質控(kong)品 | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
陰(yin)性(xing)質控(kong)品 | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
說(shuo)明:不(bu)同(tong)批(pi)號的試劑盒(he)組(zu)分(fen)不(bu)可交(jiao)互(hu)使用
【儲(chu)存條(tiao)件及(ji)有(you)效期】
-20℃±5℃,避(bi)光(guang)保存(cun)、運(yun)輸(shu)、反(fan)復(fu)凍融次數不(bu)超過(guo) 5 次(ci),有效(xiao)期 12 個(ge)月(yue)。
【適(shi)用儀(yi)器】 ABI7500、安(an)捷倫(lun) MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系(xi)列(lie)熒(ying)光(guang)定量(liang)PCR 檢(jian)測儀。
【使用方(fang)法(fa)】
1.樣(yang)品處理(li)(樣本(ben)處理(li)區(qu))
核(he)酸提(ti)取 推(tui)薦(jian)采用核(he)酸提(ti)取或(huo)純(chun)化試劑(磁(ci)珠(zhu)法(fa)或(huo)離心柱(zhu)法(fa))進行核(he)酸提(ti)取, 請(qing)按(an)照試劑說(shuo)明(ming)書(shu)進行操作(zuo)。
2.試(shi)劑配(pei)制(試(shi)劑準(zhun)備(bei)區(qu))根(gen)據待(dai)檢(jian)測樣本(ben)總(zong)數(shu),設所(suo)需(xu)要(yao)的PCR 反(fan)應(ying)管管數為 N(N=樣(yang)本數(shu)+1 管陰性(xing)對(dui)照+1 管陽性(xing)對(dui)照;反應(ying)管數每滿10 份(fen),多配(pei)制1 份(fen)),每(mei)測試反(fan)應(ying)體系(xi)配(pei)制如(ru)下(xia)表(biao):
試(shi)劑 | 反(fan)應(ying)液 | 酶液 |
用量(liang)(樣本數(shu)為 N) | 19μL | 1μL |
將(jiang)混(hun)合(he)好(hao)的(de)測試反(fan)應(ying)液分(fen)裝(zhuang)到 PCR 反(fan)應(ying)管中(zhong),20μL/管。
3.加樣(yang)(樣(yang)本處理(li)區(qu))將(jiang)步(bu)驟 1 提(ti)取的(de)核(he)酸、陽(yang)性(xing)質控(kong)品、陰(yin)性(xing)質控(kong)品各(ge)取(qu)5μL,分(fen)別加入相(xiang)應(ying)的反(fan)應(ying)管中(zhong),蓋好管蓋,混勻(yun),短暫(zan)離心。
4.PCR 擴(kuo)增(zeng)(核(he)酸擴(kuo)增(zeng)區(qu))
2.1 將(jiang)待(dai)檢(jian)測反應(ying)管置(zhi)於熒光(guang)定量(liang) PCR 儀(yi)反應(ying)槽(cao)內(nei);
2.2 設置(zhi)好(hao)通道(dao)、樣(yang)品(pin)信(xin)息(xi),反(fan)應(ying)體系(xi)設置(zhi)為 25μL;熒(ying)光(guang)通道(dao)選擇:檢測通道(dao)(Reporter Dye)FAM,淬滅通道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系(xi)列(lie)儀(yi)器請勿(wu)選擇 ROX 參(can)比(bi)熒光(guang),選擇 None 即(ji)可。
2.3 推(tui)薦(jian)循環(huan)參數設置(zhi):
步(bu)驟 | 循(xun)環(huan)數 | 溫度 | 時(shi)間(jian) | 收(shou)集熒(ying)光(guang)信號(hao) |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否(fou) |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否(fou) |
60℃ | 30sec | 是(shi) |
5.結(jie)果分(fen)析(xi)判定(ding)
5.1結(jie)果分(fen)析(xi)條(tiao)件設定(請(qing)參照各儀器使用說(shuo)明書(shu)進行設置(zhi),以(yi)分(fen)析(xi) ABI7500 儀(yi)器為例(li)) 反(fan)應(ying)結束後自(zi)動(dong)保存(cun)結果(guo),根據分(fen)析(xi)後圖(tu)像(xiang)調節(jie) Baseline 的(de) Start 值、End 值以(yi)及(ji) Threshold 值(用戶(hu)可根(gen) 據實(shi)際(ji)情(qing)況自(zi)行調整(zheng),Start 值可設在 3~15、End 值可設在 5~20,使閾值線(xian)位於擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線指數期,陰性(xing)質控(kong) 品(pin)的擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線平直(zhi)或(huo)低(di)於閾值線(xian)),點(dian)擊 Analyze 自(zi)動(dong)獲(huo)得(de)分析(xi)結果。
5.2結(jie)果判(pan)斷(duan)
陽(yang)性(xing):檢(jian)測通道(dao)Ct 值≤40,且(qie)曲(qu)線有明顯的指(zhi)數增(zeng)長(chang)曲(qu)線;
陰(yin)性(xing):樣(yang)本(ben)檢(jian)測結果(guo)無(wu)Ct 值,且(qie)無(wu)特(te)異(yi)性(xing)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線;
可疑:樣(yang)本檢測結果(guo)40<Ct 值≤45,建(jian)議重(zhong)復(fu)檢(jian)測,如(ru)果檢(jian)測通道(dao)仍(reng)為40值≤45,且(qie)曲(qu)線有明顯的增(zeng)長(chang) 曲(qu)線,判定為陽(yang)性(xing),否(fou)則(ze)為陰(yin)性(xing)。
5.3 質控(kong)標準 陰(yin)性(xing)質控(kong)品:無(wu)特(te)異(yi)性(xing)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線或(huo)無(wu)Ct 值顯示(shi);陽性(xing)質控(kong)品:擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線有明顯指數(shu)增(zeng)長(chang)期,且(qie) Ct 值≤32;以(yi)上條(tiao)件應(ying)同(tong)時(shi)滿足(zu),否(fou)則(ze)實(shi)驗視(shi)為無(wu)效(xiao)。
3. 檢(jian)測方法(fa)的局(ju)限(xian)性(xing)
1. 樣(yang)本檢(jian)測結果(guo)與樣本(ben)收(shou)集、處理(li)、運送(song)以及(ji)保(bao)存質量(liang)有關;
2. 樣(yang)本提(ti)取(qu)過程中(zhong)沒(mei)有控(kong)制(zhi)好(hao)交(jiao)叉汙染,會(hui)出(chu)現(xian)假陽(yang)性(xing)結(jie)果(guo);
3. 陽(yang)性(xing)對(dui)照、擴(kuo)增(zeng)產(chan)物泄漏,會(hui)導致假陽(yang)性(xing)結(jie)果(guo);
4. 病(bing)原(yuan)體在流(liu)行過程中(zhong)基(ji)因突變、重(zhong)組(zu),會(hui)導致假陰(yin)性(xing)結(jie)果(guo);
5. 不(bu)同(tong)的(de)提取方法(fa)存在提(ti)取(qu)效(xiao)率差異,會(hui)導致假陰(yin)性(xing)結(jie)果(guo);
6. 試(shi)劑運(yun)輸(shu),保存不(bu)當或(huo)試(shi)劑配(pei)制不(bu)準確引起的試(shi)劑檢(jian)測效能(neng)下(xia)降(jiang),出(chu)現(xian)假陰(yin)性(xing)或(huo)定(ding)量(liang)檢(jian)測不(bu)準確的(de)結(jie)果;
7. 本(ben)檢測結果(guo)僅(jin)供參考,如(ru)須確診(zhen)請(qing)結合(he)臨(lin)床(chuang)癥(zheng)狀(zhuang)以(yi)及(ji)其(qi)他(ta)檢(jian)測手段(duan)。
【高(gao)致病(bing)性(xing)豬(zhu)藍(lan)耳病(bing)病(bing)毒(du)(PRRSV-M)核(he)酸試(shi)劑盒(he)(熒(ying)光(guang)-PCR法(fa))註意(yi)事項】
1.所(suo)有(you)操(cao)作(zuo)嚴格按(an)照說明書(shu)進行;
2.試(shi)劑盒(he)內(nei)各種(zhong)組分使用前(qian)應(ying)自然(ran)融化,完quan混(hun)勻(yun)並短暫(zan)離心;
3.反(fan)應(ying)液應(ying)避光(guang)保存(cun);
4.反(fan)應(ying)中(zhong)盡(jin)量(liang)避免氣泡存在,管蓋需(xu)蓋緊(jin);
5.使用壹(yi)次性(xing)吸(xi)頭、壹次(ci)性(xing)手套(tao)和(he)各(ge)區(qu)專用工作(zuo)服;
6.樣(yang)本處理(li)、試劑配(pei)制、加樣(yang)需(xu)在不(bu)同(tong)區(qu)進行,以免交叉(cha)汙染;
7.實(shi)驗完(wan)畢(bi)後用 10%次(ci)氯酸(suan)或(huo) 75%酒(jiu)精或(huo)紫(zi)外燈處理(li)工作(zuo)臺和移液器(qi);
8.試(shi)劑盒(he)裏(li)所(suo)有(you)物品(pin)應(ying)視為汙(wu)染(ran)物對(dui)待(dai),並(bing)按(an)照《微(wei)生(sheng)物生(sheng)物醫學(xue)實(shi)驗室生(sheng)物安(an)全(quan)通則(ze)》進行處理(li)。
我司(si)的實(shi)時(shi)熒(ying)光(guang)探針(zhen)法(fa)試劑盒(he)種(zhong)類(lei)齊全(quan)(涵蓋禽病(bing)、豬(zhu)病(bing)、馬(ma)牛羊病(bing)和(he)水產動(dong)物病(bing)原(yuan)體檢測),精準(zhun)高(gao)效,多重(zhong)檢(jian)測(壹重(zhong)、雙(shuang)重(zhong)、三(san)重(zhong)),現(xian)貨(huo)供應(ying)歡(huan)迎廣(guang)大(da)新(xin)老客(ke)戶前(qian)來(lai)選購(gou)。
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