產(chan)品(pin)簡(jian)介(jie)

腦心(xin)肌炎病毒(du)(EMCV)核酸(suan)試(shi)劑(ji)盒(he)(熒(ying)光(guang)-PCR法)是(shi)我(wo)司(si)實(shi)時(shi)熒(ying)光(guang)探(tan)針(zhen)法試(shi)劑(ji)盒(he),種類(lei)齊(qi)全(quan),精準高效，現貨供(gong)應(ying),歡(huan)迎(ying)廣大(da)新(xin)老(lao)客(ke)戶(hu)前來(lai)選購。

【產(chan)品(pin)名(ming)稱(cheng)】

商品(pin)名(ming)稱(cheng)：腦心(xin)肌炎病毒(du)(EMCV)核酸(suan)試(shi)劑(ji)盒(he)(熒(ying)光(guang)-PCR法)

【包裝規(gui)格(ge)】25T/盒(he)、50T/盒(he)

【檢驗原(yuan)理(li)】本試(shi)劑(ji)盒(he)采(cai)用TaqMan 探針(zhen)法實時(shi)熒(ying)光(guang)PCR 技術，根據(ju) 腦心(xin)肌炎病毒(du)(EMCV)基(ji)因設(she)計特異性(xing)引物和熒(ying)光(guang)探(tan)針(zhen)，用(yong)熒(ying)光(guang)PCR技術對腦心(xin)肌炎病毒(du)(EMCV)的核酸(suan)進(jin)行(xing)體外(wai)擴增(zeng)檢測，用於(yu)臨(lin)床(chuang)上對可疑感(gan)染(ran)病料的病原(yuan)學(xue)診斷(duan)。

【試(shi)劑(ji)組(zu)成】

說(shuo)明(ming)：不(bu)同(tong)批(pi)號的試(shi)劑(ji)盒(he)組(zu)分不(bu)可(ke)交(jiao)互使用

【儲(chu)存條件(jian)及有(you)效期】

 -20℃±5℃，避光保存(cun)、運(yun)輸(shu)、反復凍融次數(shu)不(bu)超(chao)過(guo) 5 次，有(you)效期 12 個月(yue)。

【適(shi)用儀(yi)器】 ABI7500、安(an)捷(jie)倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR 檢測儀(yi)。

【使用方(fang)法】

1.樣(yang)品(pin)處理(li)（樣(yang)本處理(li)區）

 核酸(suan)提(ti)取(qu) 推(tui)薦(jian)采(cai)用核酸(suan)提(ti)取(qu)或純(chun)化(hua)試(shi)劑(ji)（磁(ci)珠(zhu)法或離心(xin)柱法）進行(xing)核酸(suan)提(ti)取(qu)， 請(qing)按(an)照(zhao)試(shi)劑(ji)說明(ming)書進行(xing)操(cao)作。

2.試(shi)劑(ji)配制（試(shi)劑(ji)準備(bei)區）根據(ju)待檢測樣(yang)本總(zong)數(shu)，設所需要的PCR 反應(ying)管管數(shu)為(wei) N(N=樣(yang)本數(shu)+1 管陰性(xing)對照+1 管陽性(xing)對照；反應(ying)管數(shu)每滿10 份(fen)，多(duo)配(pei)制1 份(fen))，每測試(shi)反應(ying)體(ti)系配(pei)制如下(xia)表(biao)：

將混(hun)合(he)好(hao)的測試(shi)反應(ying)液分裝到 PCR 反應(ying)管中，20μL/管。

3.加樣(yang)（樣(yang)本處理(li)區）將步驟(zhou) 1 提取(qu)的核酸(suan)、陽(yang)性(xing)質控(kong)品(pin)、陰(yin)性(xing)質控(kong)品(pin)各(ge)取(qu)5μL，分(fen)別加入(ru)相應(ying)的反應(ying)管中，蓋(gai)好(hao)管蓋(gai)，混(hun)勻，短暫(zan)離(li)心(xin)。

4.PCR 擴增(zeng)（核酸(suan)擴增(zeng)區）

2.1 將待檢測反應(ying)管置(zhi)於(yu)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang) PCR 儀(yi)反應(ying)槽(cao)內(nei)；

2.2 設置(zhi)好(hao)通道(dao)、樣(yang)品(pin)信(xin)息，反應(ying)體(ti)系設(she)置(zhi)為(wei) 25μL；熒(ying)光(guang)通(tong)道(dao)選擇：檢測通道(dao)（Reporter Dye）FAM，淬滅(mie)通道(dao)（Quencher Dye）NONE，ABI 系列儀(yi)器請勿(wu)選擇 ROX 參(can)比熒(ying)光(guang)，選(xuan)擇 None 即可(ke)。

2.3 推(tui)薦(jian)循環參(can)數(shu)設置(zhi)：

5.結果(guo)分(fen)析(xi)判(pan)定(ding)

5.1結(jie)果(guo)分(fen)析(xi)條件(jian)設(she)定(ding)（請參(can)照(zhao)各(ge)儀(yi)器使用說(shuo)明(ming)書進行(xing)設置(zhi)，以分(fen)析 ABI7500 儀(yi)器為(wei)例） 反應(ying)結(jie)束(shu)後(hou)自(zi)動保存(cun)結果(guo)，根(gen)據(ju)分析(xi)後(hou)圖像調(tiao)節(jie) Baseline 的 Start 值(zhi)、End 值(zhi)以(yi)及 Threshold 值（用戶(hu)可根(gen) 據(ju)實際情況自(zi)行(xing)調整(zheng)，Start 值(zhi)可(ke)設在(zai) 3～15、End 值(zhi)可(ke)設在(zai) 5～20，使閾值(zhi)線(xian)位於(yu)擴增(zeng)曲線(xian)指數(shu)期，陰(yin)性(xing)質控(kong) 品(pin)的擴增(zeng)曲線(xian)平直(zhi)或低於(yu)閾值(zhi)線(xian)），點擊(ji) Analyze 自(zi)動獲得分(fen)析結(jie)果(guo)。

5.2結(jie)果(guo)判(pan)斷(duan)

陽性(xing)：檢測通道(dao)Ct 值(zhi)≤40，且曲線有(you)明(ming)顯的指數(shu)增(zeng)長曲(qu)線；

陰(yin)性(xing)：樣(yang)本檢測結果(guo)無Ct 值，且(qie)無特異性(xing)擴增(zeng)曲線(xian)；

可(ke)疑：樣(yang)本檢測結果(guo)40＜Ct 值≤45，建(jian)議(yi)重(zhong)復檢測，如果(guo)檢測通道(dao)仍為(wei)40值(zhi)≤45，且曲(qu)線(xian)有(you)明(ming)顯的增(zeng)長 曲線(xian)，判(pan)定(ding)為(wei)陽性(xing)，否(fou)則(ze)為(wei)陰性(xing)。

5.3 質控(kong)標準(zhun) 陰(yin)性(xing)質控(kong)品(pin)：無特異性(xing)擴增(zeng)曲線(xian)或無Ct 值顯示；陽性(xing)質控(kong)品(pin)：擴增(zeng)曲線(xian)有(you)明(ming)顯指數(shu)增(zeng)長期(qi)，且 Ct 值(zhi)≤32；以(yi)上條件(jian)應(ying)同(tong)時滿足(zu)，否則(ze)實驗視為(wei)無效。

3. 檢測方法的局限性(xing)

1. 樣(yang)本檢測結果(guo)與(yu)樣(yang)本收集、處理(li)、運送以(yi)及保(bao)存(cun)質量(liang)有(you)關(guan)；

2. 樣(yang)本提取(qu)過(guo)程中沒(mei)有(you)控(kong)制好(hao)交叉(cha)汙(wu)染(ran)，會(hui)出現(xian)假(jia)陽性(xing)結(jie)果(guo)；

3. 陽(yang)性(xing)對照、擴增(zeng)產(chan)物(wu)泄漏(lou)，會(hui)導致(zhi)假(jia)陽性(xing)結(jie)果(guo)；

4. 病原(yuan)體在(zai)流行(xing)過(guo)程中基(ji)因突(tu)變、重(zhong)組(zu)，會(hui)導致(zhi)假(jia)陰性(xing)結(jie)果(guo)；

5. 不(bu)同(tong)的提取(qu)方(fang)法存在(zai)提取(qu)效率差(cha)異，會(hui)導致(zhi)假(jia)陰性(xing)結(jie)果(guo)；

6. 試(shi)劑(ji)運輸(shu)，保(bao)存(cun)不(bu)當(dang)或試(shi)劑(ji)配制不(bu)準(zhun)確(que)引起(qi)的試(shi)劑(ji)檢測效能(neng)下(xia)降(jiang)，出現假(jia)陰性(xing)或定(ding)量(liang)檢測不(bu)準(zhun)確(que)的結果(guo)；

7. 本檢測結果(guo)僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，如須確(que)診請(qing)結合(he)臨(lin)床(chuang)癥(zheng)狀以(yi)及其(qi)他檢測手段。

【腦心(xin)肌炎病毒(du)(EMCV)核酸(suan)試(shi)劑(ji)盒(he)(熒(ying)光(guang)-PCR法)註意事(shi)項(xiang)】

1.所有(you)操(cao)作嚴(yan)格(ge)按(an)照(zhao)說明(ming)書進行(xing)；

2.試(shi)劑(ji)盒(he)內(nei)各種(zhong)組(zu)分使用前應(ying)自(zi)然融化，完quan混(hun)勻並短暫(zan)離(li)心(xin)；

3.反應(ying)液應(ying)避光保存(cun)；

4.反應(ying)中盡(jin)量(liang)避免氣(qi)泡存(cun)在(zai)，管蓋(gai)需蓋(gai)緊；

5.使用壹(yi)次(ci)性(xing)吸(xi)頭(tou)、壹(yi)次(ci)性(xing)手(shou)套(tao)和各區專用(yong)工(gong)作(zuo)服(fu)；

6.樣(yang)本處理(li)、試(shi)劑(ji)配制、加樣(yang)需在不(bu)同(tong)區進(jin)行(xing)，以免(mian)交(jiao)叉(cha)汙染；

7.實驗完畢後(hou)用(yong) 10%次氯(lv)酸(suan)或 75%酒精或紫(zi)外(wai)燈(deng)處理(li)工(gong)作(zuo)臺和移液器；

8.試(shi)劑(ji)盒(he)裏所有(you)物(wu)品(pin)應(ying)視為(wei)汙染物(wu)對待，並按(an)照(zhao)《微生(sheng)物(wu)生(sheng)物(wu)醫(yi)學(xue)實(shi)驗室(shi)生(sheng)物(wu)安(an)全(quan)通則》進行(xing)處理(li)。

我(wo)司(si)的實時熒(ying)光(guang)探(tan)針(zhen)法試(shi)劑(ji)盒(he)種類(lei)齊(qi)全(quan)（涵蓋(gai)禽病、豬(zhu)病、馬牛羊(yang)病和水產(chan)動物病原(yuan)體檢測），精準高效，多(duo)重(zhong)檢測（壹(yi)重(zhong)、雙重(zhong)、三(san)重(zhong)），現貨供(gong)應(ying)歡(huan)迎(ying)廣大(da)新(xin)老(lao)客(ke)戶(hu)前來(lai)選購。