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PCR試(shi)劑(ji)盒
豬(zhu)病PCR試(shi)劑(ji)盒
50T口(kou)蹄(ti)疫病毒(du)亞洲(zhou)1型(xing)(FMDV-Asia1)核(he)酸試(shi)劑(ji)盒





產(chan)品簡介(jie)
口(kou)蹄(ti)疫病毒(du)亞洲(zhou)1型(xing)(FMDV-Asia1)核(he)酸試(shi)劑(ji)盒是(shi)我司實時熒光(guang)探(tan)針(zhen)法(fa)試劑(ji)盒,種(zhong)類齊(qi)全(quan),精(jing)準高(gao)效,現(xian)貨(huo)供(gong)應,歡(huan)迎廣大新老客(ke)戶(hu)前(qian)來(lai)選購。
產(chan)品(pin)分類
【產(chan)品(pin)名(ming)稱(cheng)】
商(shang)品(pin)名(ming)稱(cheng):口(kou)蹄(ti)疫病毒(du)亞洲(zhou)1型(xing)(FMDV-Asia1)核(he)酸試(shi)劑(ji)盒(熒光(guang)-PCR法(fa))
【包裝(zhuang)規(gui)格(ge)】25T/盒、50T/盒
【檢(jian)驗(yan)原(yuan)理(li)】本(ben)試(shi)劑(ji)盒采(cai)用TaqMan 探(tan)針(zhen)法(fa)實時熒光(guang)PCR 技(ji)術(shu),根(gen)據 口(kou)蹄(ti)疫病毒(du)亞洲(zhou)1型(xing)(FMDV-Asia1)基(ji)因(yin)設(she)計特(te)異(yi)性(xing)引(yin)物(wu)和(he)熒光(guang)探(tan)針(zhen),用熒光(guang)PCR技(ji)術(shu)對口(kou)蹄(ti)疫病毒(du)亞洲(zhou)1型(xing)(FMDV-Asia1)的(de)核(he)酸進行體(ti)外擴增檢(jian)測(ce),用於(yu)臨床(chuang)上(shang)對可(ke)疑(yi)感染(ran)病料(liao)的病原(yuan)學(xue)診斷。
【試(shi)劑(ji)組(zu)成(cheng)】
包裝(zhuang)規(gui)格(ge) | 25T/盒 | 50T/盒 |
反應液 | 500μL×1 管(guan) | 500μL×2 管(guan) |
酶(mei)液(ye) | 25μL×1 管(guan) | 50μL×1 管(guan) |
陽(yang)性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
陰(yin)性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
說(shuo)明(ming):不同(tong)批(pi)號(hao)的試(shi)劑(ji)盒組(zu)分不可(ke)交互(hu)使用
【儲存條件及有效(xiao)期(qi)】
-20℃±5℃,避光(guang)保(bao)存(cun)、運(yun)輸、反復凍(dong)融(rong)次(ci)數不超(chao)過 5 次(ci),有效(xiao)期(qi) 12 個月(yue)。
【適(shi)用儀(yi)器(qi)】 ABI7500、安捷(jie)倫(lun) MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系(xi)列熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR 檢(jian)測(ce)儀(yi)。
【使用方(fang)法(fa)】
1.樣(yang)品(pin)處(chu)理(li)(樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)區)
核(he)酸提取(qu) 推(tui)薦(jian)采用核(he)酸提取(qu)或(huo)純(chun)化(hua)試劑(ji)(磁(ci)珠法(fa)或(huo)離心(xin)柱法(fa))進行核(he)酸提取(qu), 請(qing)按照試劑(ji)說(shuo)明(ming)書(shu)進行操(cao)作(zuo)。
2.試(shi)劑(ji)配制(試(shi)劑(ji)準備區)根(gen)據待(dai)檢(jian)測(ce)樣(yang)本(ben)總數,設(she)所需(xu)要的PCR 反應管管數為(wei) N(N=樣(yang)本(ben)數+1 管(guan)陰(yin)性(xing)對照+1 管(guan)陽(yang)性(xing)對照;反應管數每(mei)滿10 份(fen),多(duo)配制1 份(fen)),每(mei)測試(shi)反應體(ti)系(xi)配制如(ru)下(xia)表(biao):
試(shi)劑(ji) | 反應液 | 酶(mei)液(ye) |
用量(liang)(樣本(ben)數為(wei) N) | 19μL | 1μL |
將(jiang)混(hun)合好的測(ce)試(shi)反應液分裝到 PCR 反應管中,20μL/管(guan)。
3.加(jia)樣(yang)(樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)區)將(jiang)步(bu)驟(zhou) 1 提取(qu)的核(he)酸、陽(yang)性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin)、陰性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin)各取(qu)5μL,分別加入相(xiang)應的反應管中,蓋好管蓋,混(hun)勻,短暫離心(xin)。
4.PCR 擴(kuo)增(核(he)酸擴(kuo)增區)
2.1 將(jiang)待(dai)檢(jian)測(ce)反應管置(zhi)於(yu)熒光(guang)定(ding)量(liang) PCR 儀(yi)反應槽(cao)內;
2.2 設(she)置(zhi)好通道(dao)、樣(yang)品信息,反應體(ti)系(xi)設(she)置(zhi)為(wei) 25μL;熒光(guang)通(tong)道(dao)選(xuan)擇:檢(jian)測(ce)通(tong)道(Reporter Dye)FAM,淬(cui)滅通(tong)道(Quencher Dye)NONE,ABI 系(xi)列(lie)儀(yi)器(qi)請(qing)勿選(xuan)擇 ROX 參比熒光(guang),選(xuan)擇 None 即(ji)可(ke)。
2.3 推(tui)薦(jian)循(xun)環參數設(she)置(zhi):
步(bu)驟(zhou) | 循(xun)環數 | 溫度(du) | 時間 | 收集(ji)熒光(guang)信(xin)號(hao) |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否(fou) |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否(fou) |
60℃ | 30sec | 是(shi) |
5.結果(guo)分析(xi)判定(ding)
5.1結果(guo)分析(xi)條件設(she)定(請(qing)參照(zhao)各儀器(qi)使用說(shuo)明(ming)書(shu)進行設(she)置(zhi),以分析(xi) ABI7500 儀(yi)器(qi)為(wei)例) 反應結束後自(zi)動(dong)保(bao)存(cun)結果(guo),根(gen)據分析(xi)後(hou)圖像(xiang)調節(jie) Baseline 的(de) Start 值、End 值以及 Threshold 值(用戶(hu)可(ke)根(gen) 據實(shi)際(ji)情(qing)況自(zi)行調整(zheng),Start 值可(ke)設(she)在 3~15、End 值可(ke)設(she)在 5~20,使閾值線位(wei)於(yu)擴增曲(qu)線指(zhi)數期,陰(yin)性(xing)質(zhi)控(kong) 品(pin)的(de)擴(kuo)增曲(qu)線平直或(huo)低於(yu)閾值線),點(dian)擊 Analyze 自(zi)動(dong)獲(huo)得分析(xi)結果(guo)。
5.2結果(guo)判斷
陽(yang)性(xing):檢(jian)測(ce)通(tong)道Ct 值≤40,且(qie)曲(qu)線有明(ming)顯的指(zhi)數增長(chang)曲(qu)線;
陰(yin)性(xing):樣(yang)本(ben)檢(jian)測(ce)結果(guo)無Ct 值,且無(wu)特(te)異(yi)性(xing)擴(kuo)增曲(qu)線;
可(ke)疑(yi):樣本(ben)檢(jian)測(ce)結果(guo)40<Ct 值≤45,建(jian)議重復檢(jian)測(ce),如(ru)果(guo)檢(jian)測(ce)通(tong)道仍為(wei)40值≤45,且(qie)曲(qu)線有明(ming)顯的增長(chang) 曲(qu)線,判定(ding)為(wei)陽性(xing),否(fou)則(ze)為(wei)陰性(xing)。
5.3 質(zhi)控(kong)標(biao)準 陰(yin)性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin):無特(te)異(yi)性(xing)擴(kuo)增曲(qu)線或(huo)無Ct 值顯示;陽(yang)性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin):擴增曲(qu)線有明(ming)顯指數增長(chang)期(qi),且 Ct 值≤32;以上條件應同時滿足,否則(ze)實驗(yan)視(shi)為(wei)無效(xiao)。
3. 檢(jian)測(ce)方(fang)法(fa)的局(ju)限性(xing)
1. 樣(yang)本(ben)檢(jian)測(ce)結果(guo)與樣本(ben)收集(ji)、處(chu)理(li)、運(yun)送以及保(bao)存(cun)質(zhi)量(liang)有關(guan);
2. 樣(yang)本(ben)提取(qu)過程(cheng)中沒有控(kong)制好交叉汙(wu)染,會出(chu)現(xian)假陽性(xing)結果(guo);
3. 陽(yang)性(xing)對照、擴(kuo)增產(chan)物(wu)泄漏(lou),會導致假陽性(xing)結果(guo);
4. 病原(yuan)體(ti)在(zai)流(liu)行過程(cheng)中基(ji)因(yin)突變(bian)、重組(zu),會導致假陰性(xing)結果(guo);
5. 不同(tong)的提取(qu)方法(fa)存在(zai)提取(qu)效率差(cha)異,會導致假陰性(xing)結果(guo);
6. 試(shi)劑(ji)運(yun)輸,保(bao)存(cun)不當(dang)或(huo)試劑(ji)配制不準確引(yin)起的(de)試(shi)劑(ji)檢(jian)測(ce)效(xiao)能(neng)下(xia)降(jiang),出(chu)現(xian)假陰性(xing)或(huo)定量(liang)檢(jian)測(ce)不準確的(de)結果(guo);
7. 本(ben)檢(jian)測(ce)結果(guo)僅供(gong)參考(kao),如須確(que)診請(qing)結合臨床(chuang)癥(zheng)狀(zhuang)以及其他(ta)檢(jian)測(ce)手(shou)段(duan)。
【口(kou)蹄(ti)疫病毒(du)亞洲(zhou)1型(xing)(FMDV-Asia1)核(he)酸試(shi)劑(ji)盒(熒光(guang)-PCR法(fa))註(zhu)意事(shi)項(xiang)】
1.所有操(cao)作(zuo)嚴(yan)格(ge)按照說明(ming)書(shu)進行;
2.試(shi)劑(ji)盒內各種組分使用前(qian)應自(zi)然融(rong)化(hua),完quan混(hun)勻並短暫離(li)心(xin);
3.反應液應避光(guang)保(bao)存(cun);
4.反應中盡量(liang)避免氣泡存(cun)在(zai),管(guan)蓋需(xu)蓋緊;
5.使用壹(yi)次(ci)性(xing)吸(xi)頭(tou)、壹(yi)次(ci)性(xing)手(shou)套和(he)各區專用工作(zuo)服(fu);
6.樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)、試(shi)劑(ji)配制、加(jia)樣需(xu)在不同(tong)區進行,以免交叉汙(wu)染;
7.實(shi)驗(yan)完畢後(hou)用 10%次(ci)氯(lv)酸(suan)或(huo) 75%酒(jiu)精(jing)或(huo)紫外燈處(chu)理(li)工作(zuo)臺(tai)和(he)移液器(qi);
8.試(shi)劑(ji)盒裏(li)所有物(wu)品應視(shi)為(wei)汙(wu)染物(wu)對待,並(bing)按照《微生(sheng)物(wu)生(sheng)物(wu)醫(yi)學實驗室生(sheng)物(wu)安全(quan)通(tong)則(ze)》進行處(chu)理(li)。
我司的實(shi)時熒光(guang)探(tan)針(zhen)法(fa)試劑(ji)盒種(zhong)類齊(qi)全(quan)(涵蓋禽(qin)病、豬(zhu)病、馬(ma)牛(niu)羊病和(he)水產(chan)動(dong)物(wu)病原(yuan)體(ti)檢(jian)測(ce)),精(jing)準高(gao)效,多(duo)重檢(jian)測(ce)(壹(yi)重、雙重(zhong)、三(san)重),現(xian)貨(huo)供(gong)應歡(huan)迎廣大新老客(ke)戶(hu)前(qian)來(lai)選購。
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