產品簡(jian)介

豬(zhu)水皰性口炎(yan)(VSV)核(he)酸(suan)試劑盒(he)(熒光(guang)-PCR法)是我(wo)司實(shi)時(shi)熒光(guang)探針法試劑盒(he),種類(lei)齊(qi)全(quan),精準高(gao)效(xiao)，現貨(huo)供(gong)應(ying),歡(huan)迎廣大(da)新(xin)老客戶(hu)前來(lai)選購(gou)。

【產品名稱(cheng)】

商品名稱(cheng)：豬(zhu)水皰性口炎(yan)(VSV)核(he)酸(suan)試劑盒(he)(熒光(guang)-PCR法)

【包(bao)裝規(gui)格】25T/盒、50T/盒

【檢(jian)驗(yan)原(yuan)理(li)】本試劑盒(he)采用(yong)TaqMan 探針(zhen)法實(shi)時(shi)熒光(guang)PCR 技(ji)術(shu)，根據(ju) 豬(zhu)水皰性口炎(yan)(VSV)基因(yin)設(she)計(ji)特(te)異(yi)性(xing)引(yin)物和熒光(guang)探針，用(yong)熒光(guang)PCR技(ji)術(shu)對豬(zhu)水皰性口炎(yan)(VSV)的核(he)酸(suan)進行體外(wai)擴增檢(jian)測(ce)，用(yong)於(yu)臨床上對可(ke)疑感(gan)染病料(liao)的病原(yuan)學(xue)診(zhen)斷。

【試劑組成】

說(shuo)明：不同(tong)批(pi)號的試劑盒(he)組分(fen)不可(ke)交互使(shi)用(yong)

【儲存(cun)條(tiao)件及(ji)有(you)效(xiao)期(qi)】

 -20℃±5℃，避光(guang)保存、運輸(shu)、反復(fu)凍融次(ci)數(shu)不超(chao)過 5 次，有(you)效(xiao)期(qi) 12 個月(yue)。

【適(shi)用(yong)儀(yi)器】 ABI7500、安(an)捷(jie)倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系(xi)列(lie)熒光(guang)定量(liang)PCR 檢(jian)測(ce)儀。

【使用(yong)方(fang)法】

1.樣品處(chu)理(li)（樣本處(chu)理(li)區）

 核(he)酸(suan)提取(qu) 推薦采用(yong)核(he)酸(suan)提取(qu)或純化(hua)試劑（磁(ci)珠(zhu)法或離心柱(zhu)法）進行核(he)酸(suan)提取(qu)， 請按(an)照試劑說(shuo)明書(shu)進行操(cao)作。

2.試劑配(pei)制(zhi)（試劑準備區(qu)）根據(ju)待(dai)檢(jian)測(ce)樣本總(zong)數，設(she)所(suo)需(xu)要的PCR 反應(ying)管(guan)管(guan)數為(wei) N(N=樣本數(shu)+1 管(guan)陰性(xing)對(dui)照+1 管(guan)陽(yang)性(xing)對(dui)照；反應(ying)管(guan)數每(mei)滿(man)10 份，多(duo)配(pei)制(zhi)1 份)，每(mei)測(ce)試反應(ying)體(ti)系(xi)配(pei)制(zhi)如(ru)下表(biao)：

將(jiang)混(hun)合(he)好(hao)的測試反應(ying)液(ye)分裝(zhuang)到(dao) PCR 反應(ying)管(guan)中，20μL/管(guan)。

3.加樣（樣本處(chu)理(li)區）將(jiang)步(bu)驟 1 提取(qu)的核(he)酸(suan)、陽(yang)性(xing)質控(kong)品、陰性(xing)質控(kong)品各(ge)取5μL，分別加入相應(ying)的反應(ying)管(guan)中，蓋(gai)好(hao)管(guan)蓋(gai)，混(hun)勻(yun)，短暫(zan)離心。

4.PCR 擴增（核(he)酸(suan)擴增區）

2.1 將(jiang)待檢(jian)測(ce)反應(ying)管(guan)置(zhi)於(yu)熒光(guang)定量(liang) PCR 儀反應(ying)槽(cao)內；

2.2 設置(zhi)好(hao)通(tong)道(dao)、樣品信息(xi)，反應(ying)體(ti)系(xi)設(she)置(zhi)為(wei) 25μL；熒光(guang)通(tong)道(dao)選(xuan)擇(ze)：檢(jian)測(ce)通(tong)道(dao)（Reporter Dye）FAM，淬(cui)滅(mie)通(tong)道(dao)（Quencher Dye）NONE，ABI 系(xi)列(lie)儀(yi)器請勿選擇 ROX 參比(bi)熒光(guang)，選擇 None 即(ji)可(ke)。

2.3 推薦循(xun)環(huan)參(can)數(shu)設(she)置(zhi)：

5.結(jie)果(guo)分析(xi)判定

5.1結(jie)果(guo)分析(xi)條(tiao)件設(she)定（請參(can)照各(ge)儀器使用(yong)說(shuo)明書(shu)進行設置(zhi)，以(yi)分(fen)析(xi) ABI7500 儀器為(wei)例(li)） 反應(ying)結(jie)束(shu)後自(zi)動(dong)保(bao)存(cun)結(jie)果(guo)，根據(ju)分析後圖(tu)像(xiang)調(tiao)節(jie) Baseline 的 Start 值、End 值以(yi)及(ji) Threshold 值（用(yong)戶(hu)可(ke)根 據實(shi)際情(qing)況(kuang)自(zi)行調(tiao)整，Start 值可(ke)設在(zai) 3～15、End 值可(ke)設在(zai) 5～20，使閾(yu)值(zhi)線位於(yu)擴(kuo)增曲線指(zhi)數(shu)期，陰性質控(kong) 品的擴增曲線平(ping)直(zhi)或低(di)於閾(yu)值線），點(dian)擊(ji) Analyze 自(zi)動(dong)獲得(de)分(fen)析結(jie)果(guo)。

5.2結(jie)果(guo)判斷

陽(yang)性(xing)：檢(jian)測(ce)通(tong)道(dao)Ct 值≤40，且曲線有(you)明(ming)顯的指數(shu)增長曲線；

陰性(xing)：樣本檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)無Ct 值，且無(wu)特(te)異(yi)性(xing)擴(kuo)增曲線；

可(ke)疑：樣本檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)40＜Ct 值≤45，建議(yi)重(zhong)復(fu)檢(jian)測(ce)，如(ru)果(guo)檢(jian)測(ce)通(tong)道(dao)仍(reng)為(wei)40值≤45，且曲線有(you)明(ming)顯的增長 曲線，判(pan)定(ding)為(wei)陽(yang)性(xing)，否(fou)則為(wei)陰性(xing)。

5.3 質控(kong)標準 陰性(xing)質控(kong)品：無特(te)異(yi)性(xing)擴(kuo)增曲線或無Ct 值顯(xian)示；陽(yang)性(xing)質控(kong)品：擴增曲線有(you)明(ming)顯指數增長期，且 Ct 值≤32；以上(shang)條(tiao)件應(ying)同(tong)時(shi)滿(man)足，否則實(shi)驗視(shi)為(wei)無效(xiao)。

3. 檢(jian)測(ce)方(fang)法的局限(xian)性

1. 樣本檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)與(yu)樣本收(shou)集(ji)、處(chu)理(li)、運送以(yi)及(ji)保(bao)存(cun)質量(liang)有(you)關(guan)；

2. 樣本提(ti)取過程中(zhong)沒有(you)控制(zhi)好(hao)交叉(cha)汙染，會(hui)出(chu)現假(jia)陽(yang)性(xing)結(jie)果(guo)；

3. 陽(yang)性(xing)對(dui)照、擴(kuo)增產物泄(xie)漏，會(hui)導(dao)致(zhi)假(jia)陽(yang)性(xing)結(jie)果(guo)；

4. 病原(yuan)體(ti)在(zai)流(liu)行過程中(zhong)基因(yin)突變、重(zhong)組，會(hui)導(dao)致(zhi)假(jia)陰性(xing)結(jie)果(guo)；

5. 不同(tong)的提取(qu)方(fang)法存在(zai)提(ti)取效率差(cha)異，會(hui)導(dao)致(zhi)假(jia)陰性(xing)結(jie)果(guo)；

6. 試劑運輸(shu)，保存(cun)不當或試劑配(pei)制(zhi)不準確引(yin)起(qi)的試劑檢(jian)測(ce)效能下降(jiang)，出(chu)現假(jia)陰性(xing)或定量(liang)檢(jian)測(ce)不準確的結(jie)果(guo)；

7. 本檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)僅供(gong)參(can)考，如(ru)須確診(zhen)請(qing)結(jie)合(he)臨床癥狀(zhuang)以及(ji)其他檢(jian)測(ce)手段。

【豬(zhu)水皰性口炎(yan)(VSV)核(he)酸(suan)試劑盒(he)(熒光(guang)-PCR法)註意(yi)事項(xiang)】

1.所(suo)有(you)操(cao)作嚴(yan)格(ge)按(an)照說(shuo)明書(shu)進行；

2.試劑盒(he)內各(ge)種組分(fen)使用(yong)前(qian)應(ying)自(zi)然(ran)融化(hua)，完quan混(hun)勻(yun)並短暫(zan)離心；

3.反應(ying)液(ye)應(ying)避(bi)光(guang)保存；

4.反應(ying)中(zhong)盡(jin)量(liang)避(bi)免氣泡存在(zai)，管(guan)蓋(gai)需(xu)蓋(gai)緊(jin)；

5.使用(yong)壹(yi)次性(xing)吸(xi)頭(tou)、壹(yi)次(ci)性(xing)手套和(he)各(ge)區專(zhuan)用(yong)工(gong)作服(fu)；

6.樣本處(chu)理(li)、試劑配(pei)制(zhi)、加(jia)樣需(xu)在(zai)不同(tong)區(qu)進行，以免交叉(cha)汙染；

7.實(shi)驗完畢後用(yong) 10%次氯(lv)酸(suan)或 75%酒精或紫(zi)外燈處(chu)理(li)工作(zuo)臺(tai)和(he)移(yi)液(ye)器；

8.試劑盒(he)裏所(suo)有(you)物品應(ying)視(shi)為(wei)汙染物對待，並按(an)照《微(wei)生物生物醫(yi)學實(shi)驗室(shi)生物安(an)全通(tong)則》進(jin)行處(chu)理(li)。

我司的實(shi)時(shi)熒光(guang)探針法試劑盒(he)種類(lei)齊(qi)全(quan)（涵(han)蓋(gai)禽(qin)病(bing)、豬(zhu)病、馬牛(niu)羊(yang)病(bing)和(he)水產(chan)動物病原(yuan)體(ti)檢(jian)測(ce)），精準高(gao)效(xiao)，多重(zhong)檢(jian)測(ce)（壹重(zhong)、雙重(zhong)、三重(zhong)），現貨(huo)供(gong)應(ying)歡(huan)迎廣大(da)新(xin)老客戶(hu)前來(lai)選購(gou)。