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PCR試(shi)劑盒
豬病PCR試(shi)劑(ji)盒
50T戊(wu)型(xing)肝炎(yan)病毒(du)(HEV)核酸試(shi)劑盒(he)(熒光(guang)-PCR法)





產品(pin)簡(jian)介(jie)
戊(wu)型(xing)肝炎(yan)病毒(du)(HEV)核酸試(shi)劑盒(he)(熒光(guang)-PCR法)是(shi)我司(si)實(shi)時(shi)熒光(guang)探(tan)針(zhen)法(fa)試(shi)劑(ji)盒,種類(lei)齊(qi)全(quan),精準(zhun)高效,現(xian)貨(huo)供應,歡迎(ying)廣大新(xin)老(lao)客(ke)戶前來(lai)選購(gou)。
產品(pin)分(fen)類(lei)
【產品(pin)名(ming)稱(cheng)】
商品(pin)名(ming)稱(cheng):戊(wu)型(xing)肝炎(yan)病毒(du)(HEV)核酸試(shi)劑盒(he)(熒光(guang)-PCR法)
【包裝(zhuang)規(gui)格(ge)】25T/盒、50T/盒
【檢驗(yan)原理】本(ben)試劑(ji)盒采(cai)用(yong)TaqMan 探(tan)針(zhen)法(fa)實(shi)時(shi)熒光(guang)PCR 技術(shu),根據 戊(wu)型(xing)肝炎(yan)病毒(du)(HEV)基因(yin)設(she)計(ji)特(te)異(yi)性引物和(he)熒光(guang)探(tan)針(zhen),用(yong)熒光(guang)PCR技術(shu)對(dui)戊(wu)型(xing)肝炎(yan)病毒(du)(HEV)的(de)核酸進(jin)行體(ti)外擴增(zeng)檢測(ce),用(yong)於臨床上(shang)對(dui)可疑感染(ran)病料(liao)的(de)病原(yuan)學(xue)診斷。
【試劑(ji)組成】
包裝(zhuang)規(gui)格(ge) | 25T/盒 | 50T/盒 |
反應液 | 500μL×1 管 | 500μL×2 管 |
酶液 | 25μL×1 管 | 50μL×1 管 |
陽(yang)性質控品(pin) | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
陰性質控品(pin) | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
說明:不同批號的(de)試(shi)劑盒組分(fen)不可交(jiao)互使用(yong)
【儲存條件及(ji)有(you)效期(qi)】
-20℃±5℃,避(bi)光保(bao)存、運輸、反復(fu)凍(dong)融次數(shu)不超過(guo) 5 次,有(you)效期(qi) 12 個月(yue)。
【適用(yong)儀器】 ABI7500、安捷(jie)倫(lun) MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列(lie)熒光(guang)定量PCR 檢測(ce)儀。
【使用(yong)方(fang)法(fa)】
1.樣(yang)品處理(li)(樣(yang)本(ben)處理(li)區(qu))
核酸提(ti)取(qu) 推(tui)薦(jian)采(cai)用(yong)核酸提(ti)取(qu)或純(chun)化(hua)試劑(ji)(磁珠(zhu)法或離(li)心(xin)柱法)進行核酸提(ti)取(qu), 請按照(zhao)試劑說明書進(jin)行操(cao)作。
2.試劑(ji)配制(試劑準(zhun)備區)根據待檢測(ce)樣(yang)本(ben)總數(shu),設(she)所需要(yao)的(de)PCR 反應管管數(shu)為(wei) N(N=樣(yang)本(ben)數(shu)+1 管陰性對(dui)照+1 管陽(yang)性對(dui)照;反(fan)應管數(shu)每(mei)滿10 份(fen),多配制1 份(fen)),每(mei)測試(shi)反應體(ti)系配(pei)制(zhi)如(ru)下(xia)表(biao):
試劑(ji) | 反應液 | 酶液 |
用(yong)量(樣(yang)本(ben)數(shu)為(wei) N) | 19μL | 1μL |
將(jiang)混(hun)合好的(de)測(ce)試反應液分(fen)裝(zhuang)到 PCR 反應管中,20μL/管。
3.加(jia)樣(yang)(樣(yang)本(ben)處理(li)區(qu))將(jiang)步(bu)驟 1 提取(qu)的(de)核酸、陽(yang)性質控品(pin)、陰性質控品(pin)各(ge)取(qu)5μL,分(fen)別加(jia)入相應的(de)反(fan)應管中,蓋(gai)好管蓋(gai),混勻(yun),短暫離(li)心(xin)。
4.PCR 擴增(zeng)(核酸擴(kuo)增(zeng)區)
2.1 將(jiang)待(dai)檢測(ce)反應管置於(yu)熒光(guang)定量 PCR 儀反(fan)應槽內(nei);
2.2 設(she)置好(hao)通(tong)道(dao)、樣(yang)品信息,反(fan)應體(ti)系設(she)置為(wei) 25μL;熒光(guang)通道(dao)選擇(ze):檢測(ce)通道(dao)(Reporter Dye)FAM,淬滅(mie)通(tong)道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系列(lie)儀(yi)器請勿(wu)選擇(ze) ROX 參(can)比(bi)熒光(guang),選擇(ze) None 即可。
2.3 推(tui)薦(jian)循環參(can)數(shu)設(she)置:
步驟(zhou) | 循環數(shu) | 溫度(du) | 時間(jian) | 收集熒光(guang)信號 |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否 |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否 |
60℃ | 30sec | 是(shi) |
5.結(jie)果(guo)分(fen)析判(pan)定(ding)
5.1結(jie)果(guo)分(fen)析條(tiao)件(jian)設(she)定(請參(can)照各(ge)儀器(qi)使用(yong)說明書進(jin)行設(she)置,以分(fen)析 ABI7500 儀器(qi)為(wei)例(li)) 反應結(jie)束(shu)後自(zi)動(dong)保存結(jie)果(guo),根據分(fen)析後圖(tu)像調(tiao)節(jie) Baseline 的(de) Start 值(zhi)、End 值(zhi)以及(ji) Threshold 值(zhi)(用(yong)戶可根(gen) 據實際(ji)情(qing)況自(zi)行調(tiao)整(zheng),Start 值(zhi)可設(she)在 3~15、End 值(zhi)可設(she)在 5~20,使閾(yu)值(zhi)線(xian)位(wei)於(yu)擴(kuo)增(zeng)曲線(xian)指(zhi)數(shu)期(qi),陰性質控 品的(de)擴(kuo)增(zeng)曲線(xian)平(ping)直(zhi)或低(di)於(yu)閾(yu)值(zhi)線(xian)),點(dian)擊 Analyze 自(zi)動(dong)獲得(de)分(fen)析結(jie)果(guo)。
5.2結(jie)果(guo)判斷
陽(yang)性:檢測(ce)通道(dao)Ct 值(zhi)≤40,且(qie)曲(qu)線有(you)明顯的(de)指(zhi)數(shu)增(zeng)長(chang)曲線;
陰性:樣(yang)本(ben)檢測(ce)結(jie)果(guo)無(wu)Ct 值(zhi),且(qie)無(wu)特(te)異(yi)性擴增(zeng)曲線(xian);
可疑:樣(yang)本(ben)檢測(ce)結(jie)果(guo)40<Ct 值(zhi)≤45,建議(yi)重復(fu)檢測(ce),如(ru)果(guo)檢測(ce)通道(dao)仍為(wei)40值(zhi)≤45,且(qie)曲(qu)線有(you)明顯的(de)增(zeng)長(chang) 曲線(xian),判定為(wei)陽(yang)性,否則(ze)為(wei)陰性。
5.3 質控(kong)標準(zhun) 陰性質控品(pin):無(wu)特(te)異(yi)性擴增(zeng)曲線(xian)或無(wu)Ct 值(zhi)顯示(shi);陽(yang)性質控品(pin):擴(kuo)增(zeng)曲線(xian)有(you)明顯指(zhi)數(shu)增(zeng)長(chang)期(qi),且(qie) Ct 值(zhi)≤32;以上(shang)條(tiao)件應同時滿(man)足(zu),否則(ze)實驗(yan)視為(wei)無(wu)效(xiao)。
3. 檢測(ce)方(fang)法(fa)的(de)局(ju)限性
1. 樣(yang)本(ben)檢測(ce)結(jie)果(guo)與(yu)樣(yang)本(ben)收集、處理(li)、運(yun)送以及(ji)保(bao)存質量有(you)關;
2. 樣(yang)本(ben)提取(qu)過程(cheng)中沒有(you)控制好(hao)交(jiao)叉汙(wu)染,會(hui)出現(xian)假(jia)陽(yang)性結(jie)果(guo);
3. 陽(yang)性對(dui)照、擴(kuo)增(zeng)產物(wu)泄漏,會(hui)導致(zhi)假(jia)陽(yang)性結(jie)果(guo);
4. 病原(yuan)體(ti)在流行過(guo)程(cheng)中基因突(tu)變(bian)、重組,會(hui)導致(zhi)假(jia)陰性結(jie)果(guo);
5. 不同的(de)提(ti)取(qu)方(fang)法(fa)存在提取(qu)效率差異(yi),會(hui)導致(zhi)假(jia)陰性結(jie)果(guo);
6. 試劑(ji)運輸,保存不當(dang)或試劑(ji)配(pei)制不準(zhun)確引(yin)起(qi)的(de)試(shi)劑檢測(ce)效能下(xia)降(jiang),出現(xian)假(jia)陰性或定量檢測(ce)不準(zhun)確的(de)結(jie)果(guo);
7. 本(ben)檢測(ce)結(jie)果(guo)僅供參(can)考,如(ru)須(xu)確(que)診(zhen)請結(jie)合臨床癥(zheng)狀(zhuang)以及(ji)其(qi)他(ta)檢測(ce)手段(duan)。
【戊(wu)型(xing)肝炎(yan)病毒(du)(HEV)核酸試(shi)劑盒(he)(熒光(guang)-PCR法)註意(yi)事項】
1.所有(you)操作嚴(yan)格按照(zhao)說明書進(jin)行;
2.試劑(ji)盒內各(ge)種組分(fen)使用(yong)前應自(zi)然(ran)融化(hua),完quan混勻(yun)並短暫離(li)心(xin);
3.反應液應避(bi)光保(bao)存;
4.反應中盡量避(bi)免(mian)氣(qi)泡存在,管蓋(gai)需蓋(gai)緊(jin);
5.使用(yong)壹次性吸(xi)頭(tou)、壹次(ci)性手套(tao)和各(ge)區專用(yong)工作服;
6.樣(yang)本(ben)處理(li)、試(shi)劑配(pei)制、加(jia)樣(yang)需在(zai)不同區進(jin)行,以免(mian)交(jiao)叉汙(wu)染;
7.實驗(yan)完畢(bi)後用(yong) 10%次氯酸或 75%酒(jiu)精或紫(zi)外燈處理(li)工(gong)作臺和移(yi)液(ye)器(qi);
8.試劑(ji)盒裏(li)所(suo)有(you)物品應視為(wei)汙(wu)染(ran)物(wu)對(dui)待,並按照(zhao)《微(wei)生(sheng)物(wu)生(sheng)物(wu)醫學實驗(yan)室生物(wu)安全(quan)通則(ze)》進行處理(li)。
我司(si)的(de)實(shi)時熒光(guang)探(tan)針(zhen)法(fa)試(shi)劑(ji)盒種類(lei)齊(qi)全(quan)(涵(han)蓋(gai)禽病、豬(zhu)病、馬(ma)牛(niu)羊病和(he)水(shui)產動(dong)物(wu)病原(yuan)體(ti)檢測(ce)),精準(zhun)高效,多重檢測(ce)(壹重、雙重、三重),現(xian)貨(huo)供應歡迎(ying)廣大新(xin)老(lao)客(ke)戶前來(lai)選購(gou)。
上(shang)壹(yi)個:50T豬水皰性口(kou)炎(yan)(VSV)核酸試(shi)劑盒(he)(熒光(guang)-PCR法)
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下(xia)壹(yi)個(ge):50T口(kou)蹄疫病毒(du)A型(xing)(FMDV-A)核酸試(shi)劑盒(he)
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