產(chan)品(pin)簡介(jie)

日(ri)本乙型腦(nao)炎(yan)病毒(du)(JEV)核(he)酸(suan)試劑盒(he)是(shi)我司(si)實時熒光探針法(fa)試劑盒(he),種(zhong)類(lei)齊全,精(jing)準(zhun)高(gao)效(xiao)，現(xian)貨(huo)供(gong)應(ying),歡迎廣大新(xin)老客(ke)戶前來(lai)選購(gou)。

【產品(pin)名(ming)稱(cheng)】

商(shang)品(pin)名(ming)稱(cheng)：日(ri)本乙型腦(nao)炎(yan)病毒(du)(JEV)核(he)酸(suan)試劑盒(he)(熒(ying)光-PCR法(fa))

【包裝(zhuang)規(gui)格】25T/盒、50T/盒

【檢驗原(yuan)理】本試劑盒(he)采用TaqMan 探針法(fa)實時熒光PCR 技術，根(gen)據 日(ri)本乙型腦(nao)炎(yan)病毒(du)(JEV)基因設計(ji)特(te)異性(xing)引(yin)物(wu)和(he)熒(ying)光(guang)探針，用熒(ying)光(guang)PCR技術對(dui)日(ri)本乙型腦(nao)炎(yan)病毒(du)(JEV)的核(he)酸(suan)進(jin)行(xing)體外擴(kuo)增(zeng)檢(jian)測，用於(yu)臨床上(shang)對可疑感染(ran)病料的(de)病原學診(zhen)斷。

【試劑組成(cheng)】

說明(ming)：不同批號(hao)的(de)試劑盒(he)組分不可(ke)交互(hu)使(shi)用

【儲(chu)存(cun)條(tiao)件及(ji)有效(xiao)期(qi)】

 -20℃±5℃，避光保(bao)存(cun)、運輸、反(fan)復(fu)凍融次(ci)數(shu)不超過 5 次，有效(xiao)期(qi) 12 個(ge)月。

【適用儀器(qi)】 ABI7500、安捷倫(lun) MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系(xi)列熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR 檢測儀。

【使用方(fang)法(fa)】

1.樣品(pin)處理（樣本處(chu)理區(qu)）

 核(he)酸(suan)提(ti)取 推(tui)薦(jian)采用核(he)酸(suan)提(ti)取或(huo)純(chun)化試劑（磁(ci)珠(zhu)法(fa)或(huo)離心柱(zhu)法(fa)）進(jin)行(xing)核(he)酸(suan)提(ti)取， 請按照(zhao)試劑說(shuo)明(ming)書進(jin)行(xing)操作。

2.試劑配(pei)制(zhi)（試劑準(zhun)備區）根據待(dai)檢測樣本總(zong)數(shu)，設所需(xu)要(yao)的PCR 反(fan)應(ying)管(guan)管(guan)數(shu)為 N(N=樣本數(shu)+1 管(guan)陰(yin)性對照(zhao)+1 管(guan)陽性對(dui)照(zhao)；反(fan)應(ying)管(guan)數(shu)每(mei)滿10 份，多(duo)配(pei)制(zhi)1 份)，每(mei)測試反(fan)應(ying)體系(xi)配(pei)制(zhi)如(ru)下(xia)表(biao)：

將混合(he)好(hao)的測試反(fan)應(ying)液分裝(zhuang)到 PCR 反(fan)應(ying)管(guan)中(zhong)，20μL/管(guan)。

3.加樣（樣本處(chu)理區(qu)）將步驟 1 提取的(de)核(he)酸(suan)、陽性質(zhi)控品(pin)、陰(yin)性質(zhi)控品(pin)各取5μL，分別加入(ru)相應(ying)的反(fan)應(ying)管(guan)中(zhong)，蓋(gai)好管(guan)蓋(gai)，混勻，短(duan)暫(zan)離心。

4.PCR 擴增（核(he)酸(suan)擴(kuo)增(zeng)區(qu)）

2.1 將待(dai)檢測反(fan)應(ying)管(guan)置(zhi)於(yu)熒(ying)光(guang)定量(liang) PCR 儀反(fan)應(ying)槽(cao)內；

2.2 設置好(hao)通道、樣品(pin)信息，反(fan)應(ying)體系(xi)設置為 25μL；熒光通道選擇：檢測通道（Reporter Dye）FAM，淬滅通道（Quencher Dye）NONE，ABI 系列儀器(qi)請勿選擇(ze) ROX 參比熒(ying)光(guang)，選(xuan)擇(ze) None 即(ji)可。

2.3 推(tui)薦(jian)循(xun)環參數(shu)設置：

5.結果(guo)分析(xi)判(pan)定(ding)

5.1結果(guo)分析(xi)條(tiao)件設定（請參照(zhao)各(ge)儀器(qi)使用說(shuo)明(ming)書進(jin)行(xing)設置，以(yi)分析(xi) ABI7500 儀器(qi)為例） 反(fan)應(ying)結束後(hou)自動保存(cun)結果(guo)，根據(ju)分析(xi)後圖像調節 Baseline 的 Start 值(zhi)、End 值(zhi)以(yi)及(ji) Threshold 值(zhi)（用戶可根 據實際情(qing)況(kuang)自行(xing)調整，Start 值(zhi)可設在(zai) 3～15、End 值(zhi)可設在(zai) 5～20，使閾值(zhi)線位(wei)於(yu)擴(kuo)增(zeng)曲線指(zhi)數(shu)期(qi)，陰(yin)性質(zhi)控 品(pin)的擴(kuo)增(zeng)曲線平(ping)直或(huo)低於(yu)閾(yu)值(zhi)線），點(dian)擊 Analyze 自動獲(huo)得分析(xi)結果(guo)。

5.2結果(guo)判(pan)斷

陽性：檢(jian)測通道Ct 值(zhi)≤40，且曲線有(you)明(ming)顯(xian)的指(zhi)數(shu)增(zeng)長曲線；

陰(yin)性：樣本檢(jian)測結果(guo)無Ct 值(zhi)，且無(wu)特(te)異性(xing)擴(kuo)增(zeng)曲線；

可疑：樣本檢(jian)測結果(guo)40＜Ct 值(zhi)≤45，建(jian)議(yi)重(zhong)復檢(jian)測，如(ru)果(guo)檢測通道仍為40值(zhi)≤45，且曲線有(you)明(ming)顯(xian)的增(zeng)長 曲線，判(pan)定(ding)為陽性，否(fou)則(ze)為陰(yin)性。

5.3 質(zhi)控標準(zhun) 陰(yin)性質(zhi)控品(pin)：無特(te)異性(xing)擴(kuo)增(zeng)曲線或(huo)無(wu)Ct 值(zhi)顯(xian)示；陽性質(zhi)控品(pin)：擴增(zeng)曲線有(you)明(ming)顯(xian)指(zhi)數(shu)增(zeng)長期，且 Ct 值(zhi)≤32；以(yi)上(shang)條(tiao)件應(ying)同時滿足(zu)，否(fou)則(ze)實驗(yan)視(shi)為無效(xiao)。

3. 檢測方(fang)法(fa)的(de)局限性

1. 樣本檢(jian)測結果(guo)與(yu)樣本收(shou)集、處理、運(yun)送(song)以(yi)及(ji)保存(cun)質(zhi)量有(you)關；

2. 樣本提(ti)取過(guo)程中沒(mei)有(you)控制(zhi)好(hao)交叉汙(wu)染(ran)，會出(chu)現(xian)假陽性結果(guo)；

3. 陽性對(dui)照(zhao)、擴(kuo)增(zeng)產(chan)物(wu)泄漏，會(hui)導(dao)致假(jia)陽性結果(guo)；

4. 病原體(ti)在(zai)流行(xing)過程中(zhong)基(ji)因(yin)突變、重(zhong)組，會(hui)導(dao)致假(jia)陰(yin)性結果(guo)；

5. 不同的提(ti)取方(fang)法(fa)存(cun)在(zai)提取效(xiao)率(lv)差異，會導(dao)致假(jia)陰(yin)性結果(guo)；

6. 試劑運(yun)輸，保(bao)存(cun)不當(dang)或(huo)試劑配(pei)制(zhi)不準(zhun)確(que)引起(qi)的試劑檢(jian)測效(xiao)能(neng)下(xia)降(jiang)，出(chu)現(xian)假陰(yin)性或(huo)定(ding)量檢測不準(zhun)確(que)的結果(guo)；

7. 本檢測結果(guo)僅供(gong)參考，如須(xu)確(que)診請結合(he)臨床癥(zheng)狀以(yi)及(ji)其他(ta)檢(jian)測手段(duan)。

【日(ri)本乙型腦(nao)炎(yan)病毒(du)(JEV)核(he)酸(suan)試劑盒(he)(熒光-PCR法(fa))註(zhu)意事項(xiang)】

1.所有操(cao)作(zuo)嚴(yan)格(ge)按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書進(jin)行(xing)；

2.試劑盒(he)內各種(zhong)組分使用前應(ying)自然融化，完(wan)quan混勻並(bing)短(duan)暫(zan)離心；

3.反(fan)應(ying)液應(ying)避光(guang)保(bao)存(cun)；

4.反(fan)應(ying)中盡(jin)量(liang)避免氣泡(pao)存(cun)在(zai)，管(guan)蓋(gai)需蓋(gai)緊；

5.使用壹(yi)次(ci)性吸(xi)頭(tou)、壹次(ci)性手套(tao)和(he)各(ge)區(qu)專用工作(zuo)服(fu)；

6.樣本處(chu)理、試劑配(pei)制(zhi)、加樣需在(zai)不同區進(jin)行(xing)，以(yi)免交叉汙(wu)染(ran)；

7.實驗(yan)完(wan)畢(bi)後(hou)用 10%次氯酸(suan)或(huo) 75%酒(jiu)精(jing)或(huo)紫外燈(deng)處理工作(zuo)臺和(he)移液(ye)器(qi)；

8.試劑盒(he)裏所有物(wu)品(pin)應(ying)視為汙染(ran)物(wu)對待(dai)，並按照(zhao)《微(wei)生物(wu)生物(wu)醫(yi)學實驗(yan)室(shi)生物(wu)安全通則(ze)》進(jin)行(xing)處理。

我司(si)的(de)實時熒光探針法(fa)試劑盒(he)種(zhong)類(lei)齊全（涵蓋(gai)禽(qin)病、豬病、馬牛羊(yang)病和(he)水(shui)產(chan)動物(wu)病原體(ti)檢(jian)測），精(jing)準(zhun)高(gao)效(xiao)，多(duo)重(zhong)檢測（壹(yi)重(zhong)、雙重(zhong)、三重(zhong)），現貨(huo)供(gong)應(ying)歡迎廣大新(xin)老客(ke)戶前來(lai)選購(gou)。