產品簡介(jie)

豬(zhu)輪狀(zhuang)病毒A組(PRV-A)核酸(suan)試(shi)劑(ji)盒(he)是我(wo)司實時熒光(guang)探(tan)針法試(shi)劑(ji)盒(he),種類齊(qi)全(quan),精(jing)準(zhun)高效(xiao)，現(xian)貨(huo)供應(ying),歡迎(ying)廣(guang)大新老(lao)客(ke)戶(hu)前來(lai)選(xuan)購。

【產品名(ming)稱】

商(shang)品名(ming)稱：豬(zhu)輪狀(zhuang)病毒A組(PRV-A)核酸(suan)試(shi)劑(ji)盒(he)(熒光(guang)-PCR法(fa))

【包(bao)裝規(gui)格(ge)】25T/盒(he)、50T/盒(he)

【檢(jian)驗原(yuan)理】本試(shi)劑(ji)盒(he)采(cai)用TaqMan 探(tan)針法實時熒光(guang)PCR 技術(shu)，根據(ju) 豬(zhu)輪狀(zhuang)病毒A組(PRV-A)基(ji)因設(she)計(ji)特異性(xing)引物和熒光(guang)探(tan)針，用熒光(guang)PCR技術(shu)對豬(zhu)輪狀(zhuang)病毒A組(PRV-A)的(de)核酸(suan)進行(xing)體外(wai)擴增檢(jian)測，用於(yu)臨(lin)床(chuang)上對可疑感染病料的病原(yuan)學(xue)診斷。

【試(shi)劑(ji)組成】

說(shuo)明：不同(tong)批(pi)號的試(shi)劑(ji)盒(he)組分不可交(jiao)互(hu)使用(yong)

【儲(chu)存條件及(ji)有效期(qi)】

 -20℃±5℃，避(bi)光(guang)保(bao)存、運輸(shu)、反(fan)復凍(dong)融(rong)次(ci)數不超(chao)過(guo) 5 次(ci)，有效期(qi) 12 個(ge)月。

【適(shi)用儀(yi)器】 ABI7500、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系列(lie)熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR 檢(jian)測儀。

【使用(yong)方法(fa)】

1.樣(yang)品處理（樣(yang)本處(chu)理區）

 核(he)酸提取 推(tui)薦采(cai)用核酸(suan)提取或純(chun)化(hua)試(shi)劑(ji)（磁珠(zhu)法或離心柱(zhu)法(fa)）進行(xing)核(he)酸提取， 請(qing)按(an)照試(shi)劑(ji)說明(ming)書(shu)進行(xing)操作。

2.試(shi)劑(ji)配制(zhi)（試(shi)劑(ji)準(zhun)備區）根據(ju)待(dai)檢(jian)測樣本總(zong)數，設所需要的(de)PCR 反(fan)應(ying)管管(guan)數為 N(N=樣(yang)本數+1 管(guan)陰性(xing)對照+1 管(guan)陽性(xing)對照；反(fan)應(ying)管數每滿10 份(fen)，多配(pei)制(zhi)1 份(fen))，每(mei)測試(shi)反(fan)應(ying)體系(xi)配制(zhi)如(ru)下(xia)表：

將(jiang)混合(he)好的(de)測試(shi)反(fan)應(ying)液分裝到(dao) PCR 反(fan)應(ying)管中(zhong)，20μL/管(guan)。

3.加(jia)樣(yang)（樣本處(chu)理區）將(jiang)步驟(zhou) 1 提取的(de)核酸、陽性(xing)質(zhi)控品、陰性(xing)質(zhi)控品各取5μL，分別加(jia)入(ru)相應(ying)的反(fan)應(ying)管中(zhong)，蓋好管(guan)蓋，混勻，短暫離心。

4.PCR 擴增（核(he)酸擴增區）

2.1 將(jiang)待(dai)檢(jian)測反(fan)應(ying)管置於(yu)熒光(guang)定(ding)量(liang) PCR 儀(yi)反(fan)應(ying)槽內(nei)；

2.2 設(she)置好通道、樣品信息，反(fan)應(ying)體系(xi)設置為(wei) 25μL；熒光(guang)通道選(xuan)擇(ze)：檢(jian)測通道（Reporter Dye）FAM，淬(cui)滅通道（Quencher Dye）NONE，ABI 系(xi)列(lie)儀(yi)器請(qing)勿選(xuan)擇(ze) ROX 參比(bi)熒光(guang)，選(xuan)擇(ze) None 即(ji)可。

2.3 推(tui)薦循(xun)環參數設置：

5.結(jie)果(guo)分析判定(ding)

5.1結(jie)果(guo)分析條件設(she)定(ding)（請(qing)參照各(ge)儀器使用(yong)說明(ming)書(shu)進行(xing)設置，以分析 ABI7500 儀(yi)器為例） 反(fan)應(ying)結束(shu)後自(zi)動(dong)保(bao)存結(jie)果(guo)，根據(ju)分析後圖(tu)像(xiang)調節 Baseline 的(de) Start 值(zhi)、End 值(zhi)以及(ji) Threshold 值(zhi)（用戶(hu)可根 據(ju)實際(ji)情(qing)況(kuang)自(zi)行(xing)調(tiao)整，Start 值(zhi)可設(she)在(zai) 3～15、End 值(zhi)可設(she)在(zai) 5～20，使閾值線位於(yu)擴增曲線指數期，陰性(xing)質(zhi)控 品的擴增曲線平(ping)直或低於(yu)閾值線），點擊(ji) Analyze 自(zi)動(dong)獲得分析結果(guo)。

5.2結(jie)果(guo)判斷(duan)

陽性(xing)：檢(jian)測通道Ct 值(zhi)≤40，且(qie)曲線有明顯的(de)指(zhi)數增長(chang)曲線；

陰(yin)性(xing)：樣本檢(jian)測結果(guo)無(wu)Ct 值(zhi)，且(qie)無(wu)特異性(xing)擴增曲線；

可疑：樣本檢(jian)測結果(guo)40＜Ct 值(zhi)≤45，建議重(zhong)復檢(jian)測，如(ru)果(guo)檢(jian)測通道仍為40值(zhi)≤45，且(qie)曲線有明顯的(de)增長(chang) 曲線，判定(ding)為(wei)陽性(xing)，否則為(wei)陰(yin)性(xing)。

5.3 質(zhi)控標準(zhun) 陰(yin)性(xing)質(zhi)控品：無(wu)特異性(xing)擴增曲線或無(wu)Ct 值(zhi)顯示；陽性(xing)質(zhi)控品：擴增曲線有明顯指(zhi)數增長(chang)期，且(qie) Ct 值(zhi)≤32；以上條件應(ying)同(tong)時滿足，否則實驗(yan)視為(wei)無(wu)效。

3. 檢(jian)測方法(fa)的局(ju)限性(xing)

1. 樣(yang)本檢(jian)測結果(guo)與(yu)樣本收(shou)集、處理、運(yun)送以及(ji)保存(cun)質(zhi)量(liang)有關；

2. 樣(yang)本提取過(guo)程中沒(mei)有控制(zhi)好交(jiao)叉汙染，會出(chu)現(xian)假(jia)陽性(xing)結果(guo)；

3. 陽性(xing)對照、擴增產物泄(xie)漏(lou)，會導致假(jia)陽性(xing)結果(guo)；

4. 病(bing)原體在(zai)流(liu)行過程(cheng)中基(ji)因突(tu)變(bian)、重(zhong)組，會導(dao)致假(jia)陰(yin)性(xing)結果(guo)；

5. 不同(tong)的提取方(fang)法存在(zai)提取效(xiao)率差(cha)異，會(hui)導致假(jia)陰(yin)性(xing)結果(guo)；

6. 試(shi)劑(ji)運輸(shu)，保存(cun)不當或試(shi)劑(ji)配制(zhi)不準(zhun)確(que)引起(qi)的(de)試(shi)劑(ji)檢(jian)測效能(neng)下(xia)降(jiang)，出現(xian)假(jia)陰性(xing)或定(ding)量(liang)檢(jian)測不準(zhun)確(que)的(de)結果(guo)；

7. 本檢(jian)測結果(guo)僅供參考(kao)，如(ru)須(xu)確(que)診請(qing)結(jie)合(he)臨(lin)床(chuang)癥(zheng)狀(zhuang)以及(ji)其他檢(jian)測手(shou)段。

【豬(zhu)輪狀(zhuang)病毒A組(PRV-A)核(he)酸試(shi)劑(ji)盒(he)(熒光(guang)-PCR法(fa))註(zhu)意事項(xiang)】

1.所(suo)有操作嚴格(ge)按(an)照說(shuo)明書(shu)進行(xing)；

2.試(shi)劑(ji)盒(he)內各(ge)種組分使用(yong)前應(ying)自(zi)然(ran)融(rong)化，完(wan)quan混(hun)勻並(bing)短暫離心；

3.反(fan)應(ying)液應(ying)避光(guang)保(bao)存；

4.反(fan)應(ying)中盡(jin)量避(bi)免(mian)氣泡(pao)存(cun)在(zai)，管(guan)蓋需蓋(gai)緊(jin)；

5.使用(yong)壹次(ci)性(xing)吸頭、壹次(ci)性(xing)手(shou)套和各(ge)區專(zhuan)用工作服(fu)；

6.樣(yang)本處(chu)理、試(shi)劑(ji)配制(zhi)、加(jia)樣(yang)需在(zai)不同(tong)區進(jin)行，以免(mian)交(jiao)叉(cha)汙染；

7.實驗(yan)完畢(bi)後用(yong) 10%次(ci)氯酸(suan)或 75%酒(jiu)精或紫外(wai)燈(deng)處(chu)理工作臺和移(yi)液器；

8.試(shi)劑(ji)盒(he)裏(li)所(suo)有物品應(ying)視為(wei)汙染物對(dui)待(dai)，並(bing)按(an)照《微(wei)生(sheng)物生(sheng)物醫(yi)學(xue)實驗(yan)室(shi)生(sheng)物安全(quan)通則(ze)》進行處(chu)理。

我(wo)司的(de)實時熒光(guang)探(tan)針法試(shi)劑(ji)盒(he)種類齊(qi)全(quan)（涵蓋(gai)禽(qin)病、豬(zhu)病、馬(ma)牛(niu)羊病和水(shui)產動物(wu)病(bing)原體檢(jian)測），精準(zhun)高效(xiao)，多重(zhong)檢(jian)測（壹重(zhong)、雙重(zhong)、三(san)重(zhong)），現(xian)貨(huo)供應(ying)歡迎(ying)廣(guang)大新老(lao)客(ke)戶(hu)前來(lai)選(xuan)購。