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PCR試(shi)劑(ji)盒(he)
豬(zhu)病PCR試(shi)劑(ji)盒(he)
50T豬(zhu)藍耳(er)病病毒通用型(xing)(PRRSV-U)核(he)酸試(shi)劑(ji)盒(he)





產品(pin)簡介(jie)
豬(zhu)藍耳(er)病病毒通用型(xing)(PRRSV-U)核(he)酸試(shi)劑(ji)盒(he)是(shi)我(wo)司(si)實時(shi)熒光(guang)探(tan)針法試(shi)劑(ji)盒(he),種類齊全(quan),精(jing)準(zhun)高(gao)效(xiao),現(xian)貨(huo)供應(ying),歡(huan)迎廣(guang)大新(xin)老客戶前來選(xuan)購。
【產品名(ming)稱(cheng)】
商(shang)品(pin)名(ming)稱(cheng):豬(zhu)藍耳(er)病病毒通用型(xing)(PRRSV-U)核(he)酸試(shi)劑(ji)盒(he)(熒光(guang)-PCR法(fa))
【包裝(zhuang)規格(ge)】25T/盒(he)、50T/盒(he)
【檢驗原理】本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)采(cai)用TaqMan 探針法實時(shi)熒光(guang)PCR 技術,根(gen)據(ju) 豬(zhu)藍耳(er)病病毒通用型(xing)(PRRSV-U)基(ji)因(yin)設計(ji)特(te)異性(xing)引(yin)物和(he)熒光(guang)探(tan)針,用熒光(guang)PCR技術對(dui)豬(zhu)藍耳(er)病病毒通用型(xing)(PRRSV-U)的核(he)酸進行體(ti)外擴(kuo)增(zeng)檢測(ce),用於臨床(chuang)上對(dui)可疑(yi)感(gan)染(ran)病料的病原學診(zhen)斷。
【試(shi)劑(ji)組成】
包裝(zhuang)規格(ge) | 25T/盒(he) | 50T/盒(he) |
反應(ying)液(ye) | 500μL×1 管 | 500μL×2 管 |
酶液(ye) | 25μL×1 管 | 50μL×1 管 |
陽性(xing)質控品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管 |
陰性(xing)質控品(pin) | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管 |
說(shuo)明:不同(tong)批(pi)號(hao)的試(shi)劑(ji)盒(he)組分(fen)不可(ke)交(jiao)互使用
【儲存條件(jian)及有效(xiao)期】
-20℃±5℃,避(bi)光保(bao)存、運(yun)輸、反(fan)復凍(dong)融次數(shu)不(bu)超過(guo) 5 次,有效(xiao)期 12 個(ge)月(yue)。
【適(shi)用儀器】 ABI7500、安(an)捷(jie)倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR 檢測儀。
【使(shi)用方法】
1.樣品處理(li)(樣本(ben)處(chu)理(li)區)
核(he)酸提取(qu) 推(tui)薦(jian)采(cai)用核(he)酸提取(qu)或(huo)純(chun)化(hua)試(shi)劑(ji)(磁珠(zhu)法(fa)或離(li)心(xin)柱(zhu)法)進行核(he)酸提取(qu), 請按照(zhao)試(shi)劑(ji)說(shuo)明書進行操(cao)作。
2.試(shi)劑(ji)配制(zhi)(試(shi)劑(ji)準備區)根(gen)據(ju)待(dai)檢測(ce)樣本(ben)總(zong)數(shu),設所需(xu)要的PCR 反應(ying)管管(guan)數(shu)為(wei) N(N=樣本(ben)數(shu)+1 管陰性對(dui)照(zhao)+1 管(guan)陽性(xing)對(dui)照(zhao);反應(ying)管(guan)數(shu)每滿(man)10 份(fen),多配(pei)制(zhi)1 份(fen)),每測試(shi)反(fan)應體系配(pei)制(zhi)如(ru)下(xia)表(biao):
試(shi)劑(ji) | 反應(ying)液(ye) | 酶液(ye) |
用量(liang)(樣本(ben)數(shu)為(wei) N) | 19μL | 1μL |
將(jiang)混合(he)好的測試(shi)反(fan)應液(ye)分裝(zhuang)到 PCR 反(fan)應(ying)管(guan)中(zhong),20μL/管(guan)。
3.加樣(樣本(ben)處(chu)理(li)區)將(jiang)步(bu)驟(zhou) 1 提(ti)取(qu)的核(he)酸、陽性(xing)質控品(pin)、陰(yin)性質(zhi)控品(pin)各(ge)取5μL,分(fen)別加入相(xiang)應(ying)的反應(ying)管(guan)中,蓋好(hao)管蓋(gai),混(hun)勻,短(duan)暫(zan)離(li)心(xin)。
4.PCR 擴增(zeng)(核(he)酸擴增(zeng)區)
2.1 將(jiang)待(dai)檢測(ce)反(fan)應(ying)管置(zhi)於熒光(guang)定(ding)量(liang) PCR 儀反應(ying)槽(cao)內(nei);
2.2 設置(zhi)好通(tong)道、樣品信息,反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)設置(zhi)為 25μL;熒光(guang)通(tong)道選(xuan)擇(ze):檢(jian)測(ce)通(tong)道(Reporter Dye)FAM,淬(cui)滅通道(Quencher Dye)NONE,ABI 系(xi)列儀器請(qing)勿選(xuan)擇(ze) ROX 參(can)比熒光(guang),選(xuan)擇(ze) None 即(ji)可(ke)。
2.3 推薦(jian)循(xun)環參(can)數(shu)設置(zhi):
步(bu)驟(zhou) | 循(xun)環數(shu) | 溫度 | 時(shi)間 | 收(shou)集熒光(guang)信號(hao) |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否(fou) |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否 |
60℃ | 30sec | 是(shi) |
5.結(jie)果(guo)分析(xi)判(pan)定
5.1結(jie)果(guo)分析(xi)條件(jian)設定(請(qing)參(can)照(zhao)各(ge)儀器使(shi)用說(shuo)明書進行設置(zhi),以分(fen)析 ABI7500 儀器為(wei)例) 反應(ying)結(jie)束(shu)後自(zi)動(dong)保(bao)存結(jie)果(guo),根(gen)據(ju)分(fen)析後圖(tu)像調節(jie) Baseline 的 Start 值(zhi)、End 值(zhi)以(yi)及(ji) Threshold 值(zhi)(用戶可根(gen) 據(ju)實際情況自(zi)行調(tiao)整,Start 值(zhi)可(ke)設在(zai) 3~15、End 值(zhi)可(ke)設在(zai) 5~20,使(shi)閾(yu)值(zhi)線(xian)位(wei)於擴增(zeng)曲線(xian)指數(shu)期,陰(yin)性質(zhi)控 品的擴增(zeng)曲線(xian)平(ping)直(zhi)或(huo)低於閾(yu)值(zhi)線(xian)),點(dian)擊(ji) Analyze 自動獲得(de)分析結(jie)果(guo)。
5.2結(jie)果(guo)判(pan)斷
陽性(xing):檢測通(tong)道Ct 值(zhi)≤40,且(qie)曲線有明顯的指數(shu)增(zeng)長曲線(xian);
陰(yin)性:樣本(ben)檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)無Ct 值(zhi),且(qie)無(wu)特(te)異性(xing)擴增(zeng)曲線(xian);
可疑:樣本(ben)檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)40<Ct 值(zhi)≤45,建議(yi)重復檢測(ce),如(ru)果(guo)檢測(ce)通道(dao)仍(reng)為40值(zhi)≤45,且曲(qu)線(xian)有明顯的增(zeng)長 曲線,判(pan)定為(wei)陽性(xing),否則為陰(yin)性(xing)。
5.3 質(zhi)控標(biao)準(zhun) 陰性質控品(pin):無(wu)特(te)異性(xing)擴增(zeng)曲線(xian)或無(wu)Ct 值(zhi)顯(xian)示;陽性(xing)質控品(pin):擴(kuo)增(zeng)曲線(xian)有明顯指數(shu)增(zeng)長期,且(qie) Ct 值(zhi)≤32;以(yi)上條件(jian)應同(tong)時(shi)滿(man)足,否(fou)則實驗視為無效(xiao)。
3. 檢測方法的局(ju)限(xian)性(xing)
1. 樣本(ben)檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)與(yu)樣本(ben)收(shou)集、處理、運(yun)送以(yi)及保(bao)存質量(liang)有關(guan);
2. 樣本(ben)提(ti)取(qu)過(guo)程中沒有控制(zhi)好(hao)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染,會(hui)出(chu)現(xian)假(jia)陽性(xing)結(jie)果(guo);
3. 陽性(xing)對(dui)照(zhao)、擴增(zeng)產物泄(xie)漏(lou),會(hui)導(dao)致假陽性(xing)結(jie)果(guo);
4. 病原體在(zai)流(liu)行過(guo)程中基因(yin)突(tu)變(bian)、重組,會(hui)導(dao)致假陰(yin)性結(jie)果(guo);
5. 不同(tong)的提取(qu)方法存在(zai)提取效(xiao)率(lv)差(cha)異,會(hui)導(dao)致假陰(yin)性結(jie)果(guo);
6. 試(shi)劑(ji)運(yun)輸,保(bao)存不當(dang)或(huo)試(shi)劑(ji)配制(zhi)不(bu)準(zhun)確(que)引(yin)起的試(shi)劑(ji)檢測效(xiao)能(neng)下(xia)降(jiang),出現(xian)假(jia)陰(yin)性或定(ding)量(liang)檢(jian)測不準確(que)的結(jie)果(guo);
7. 本(ben)檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)僅供(gong)參(can)考(kao),如(ru)須(xu)確(que)診(zhen)請(qing)結(jie)合臨床癥狀(zhuang)以(yi)及其(qi)他(ta)檢測手(shou)段(duan)。
【豬(zhu)藍耳(er)病病毒通用型(xing)(PRRSV-U)核(he)酸試(shi)劑(ji)盒(he)(熒光(guang)-PCR法(fa))註意(yi)事項】
1.所有操(cao)作(zuo)嚴格按照(zhao)說(shuo)明書進行;
2.試(shi)劑(ji)盒(he)內(nei)各(ge)種組分(fen)使(shi)用前應自(zi)然融化(hua),完quan混(hun)勻並短(duan)暫(zan)離(li)心(xin);
3.反應液(ye)應避(bi)光保(bao)存;
4.反(fan)應中(zhong)盡(jin)量(liang)避(bi)免(mian)氣泡存在(zai),管蓋需(xu)蓋緊;
5.使用壹次性吸(xi)頭、壹次性手(shou)套(tao)和各(ge)區專用工(gong)作(zuo)服(fu);
6.樣本(ben)處(chu)理(li)、試(shi)劑(ji)配制(zhi)、加(jia)樣需(xu)在(zai)不同(tong)區進行,以(yi)免(mian)交叉(cha)汙(wu)染;
7.實驗完畢後用 10%次氯酸或 75%酒精或(huo)紫(zi)外燈處(chu)理(li)工(gong)作(zuo)臺和(he)移(yi)液(ye)器;
8.試(shi)劑(ji)盒(he)裏(li)所(suo)有物品(pin)應(ying)視(shi)為(wei)汙(wu)染物對(dui)待(dai),並按照(zhao)《微生(sheng)物生(sheng)物醫學實驗室生(sheng)物安(an)全(quan)通(tong)則》進行處(chu)理。
我(wo)司(si)的實時(shi)熒光(guang)探(tan)針法試(shi)劑(ji)盒(he)種類齊全(quan)(涵(han)蓋禽(qin)病、豬(zhu)病、馬(ma)牛(niu)羊(yang)病和水(shui)產(chan)動(dong)物病原體檢(jian)測(ce)),精準(zhun)高效(xiao),多重檢測(壹重、雙重、三重),現(xian)貨(huo)供應(ying)歡(huan)迎廣(guang)大新(xin)老客戶前來選(xuan)購。
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